本文關(guān)鍵詞：體外合成修飾mRNA可轉(zhuǎn)染hUC-MSCs

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【摘要】：目的探討體外合成修飾的mRNA能否穩(wěn)定高效的轉(zhuǎn)入人臍帶間充質(zhì)干細胞(hUC-MSC)中,為利用mRNA誘導(dǎo)分化hUC-MSC進行細胞治療奠定基礎(chǔ)。方法體外構(gòu)建合成mRNA的模板并合成eGFP的修飾mRNA,將其轉(zhuǎn)入hUC-MSCs,流式檢測轉(zhuǎn)染效率、最佳轉(zhuǎn)染劑量及mRNA在細胞中的半衰期。相同方法合成hPdx1修飾mRNA轉(zhuǎn)染hUC-MSCs,免疫熒光檢測轉(zhuǎn)染效果。結(jié)果體外合成的eGFP修飾mRNA可高效轉(zhuǎn)入hUC-MSCs,最佳轉(zhuǎn)染劑量為1.5μg/mL,轉(zhuǎn)染后翻譯的蛋白在細胞中可穩(wěn)定存在3 d。hPdx1的修飾mRNA也可穩(wěn)定地導(dǎo)入hUC-MSCs。結(jié)論體外合成的修飾mRNA穩(wěn)定性好,可進入細胞并翻譯成蛋白。
【作者單位】： 湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬太和醫(yī)院胚胎干細胞研究湖北省重點實驗室;朝鮮國家科學(xué)院生物工程實驗室;武漢大學(xué)中南醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】： 修飾mRNA hUC-MSC 轉(zhuǎn)染效率
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81070614) 湖北醫(yī)藥學(xué)院自然科學(xué)研究啟動金(2011QDZR-26)
【分類號】：R346
【正文快照】： 雖然醫(yī)學(xué)發(fā)展快速,但迄今仍有一些疾病無法治愈。以細胞分化為基礎(chǔ)的再生醫(yī)學(xué)為細胞治療的臨床運用奠定了基礎(chǔ)。目前對于細胞分化的研究主要是以質(zhì)粒[1]、病毒[2]、蛋白[3]等作用方式將外源分化因子轉(zhuǎn)入細胞內(nèi),但用這些方法進行細胞重編程得到的具有運用價值的細胞都存在一定

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3 劉君;向川;衛(wèi)小春;;同步化法處理軟骨細胞后對病毒轉(zhuǎn)染效率影響的研究[J];中國藥物與臨床;2008年11期

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1 李曉英;王紅寧;唐夢君;潘盛;;脂質(zhì)體在DNA疫苗中的作用研究進展[A];2005全國第二屆核酸疫苗研討會論文集[C];2005年

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3 張銳;王f，

本文編號：1055903