本文關(guān)鍵詞：日本血吸蟲SjIrV1的基因特性及免疫保護(hù)效果

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【摘要】：鈣結(jié)合蛋白是日本血吸蟲生長發(fā)育不可缺少的蛋白,具有非常廣泛而重要的功能。在課題組日本血吸蟲體被表膜蛋白研究基礎(chǔ)上,利用PCR技術(shù)克隆了中國大陸株日本血吸蟲66 kDa鈣結(jié)合蛋白(SjIrV1)編碼基因的cDNA序列,BLAST分析與菲律賓株日本血吸蟲SjIrV1 cDNA編碼序列一致,熒光定量PCR分析表明該基因在童蟲和成蟲期不同發(fā)育階段均有表達(dá),其中在35 d和42 d成蟲中表達(dá)量較高,在42 d雌蟲中該基因表達(dá)水平遠(yuǎn)高于42 d雄蟲。構(gòu)建重組表達(dá)質(zhì)粒pET28a(+)-SjIrV1,在大腸桿菌中成功誘導(dǎo)表達(dá),重組蛋白主要以可溶性形式存在,通過高效液相色譜法(RP-HPLC)以及串聯(lián)質(zhì)譜法(MS/MS)鑒定所獲蛋白為目的蛋白SjIrV1。蛋白質(zhì)印跡(Western blotting)分析結(jié)果顯示重組蛋白能被感染日本血吸蟲鼠血清和免疫鼠血清所識(shí)別,SjIrV1蛋白在蟲體各發(fā)育階段中均表達(dá)。免疫熒光染色實(shí)驗(yàn)觀察表明SjIrV1主要分布在日本血吸蟲成蟲的表膜。應(yīng)用重組蛋白免疫BALB/c小鼠后,免疫鼠血清中檢測到較高水平的特異性IgG、IgG1和IgG2a抗體。結(jié)果表明SjIrV1可能在日本血吸蟲的生長發(fā)育過程中起著重要作用。
【作者單位】： 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海獸醫(yī)研究所農(nóng)業(yè)部動(dòng)物寄生蟲學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;廈門大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 日本血吸蟲 鈣結(jié)合蛋白 表達(dá) 免疫原性 免疫保護(hù)
【基金】：國家自然科學(xué)基金(No.31172315) 上�？萍及l(fā)展基金(No.12140902700) 中國博士后科學(xué)基金(No.2012M510630)資助~~
【分類號(hào)】：R392
【正文快照】： 血吸蟲病是由血吸蟲感染引起的一種慢性寄生蟲病,被世界衛(wèi)生組織認(rèn)為是僅次于瘧疾的第2個(gè)最具社會(huì)經(jīng)濟(jì)破壞性的寄生蟲病,全球有數(shù)以百萬的人感染[1-2]。寄生于人體的血吸蟲主要有3種:日本血吸蟲、曼氏血吸蟲和埃及血吸蟲,其中在我國流行的血吸蟲病是由日本血吸蟲(中國大陸株)

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 何毅勛,楊惠中;日本血吸蟲發(fā)育的生理學(xué)研究[J];動(dòng)物學(xué)報(bào);1980年01期

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本文編號(hào)：1041147