發(fā)布時(shí)間：2017-10-14 13:34

  本文關(guān)鍵詞：溫針灸對(duì)制動(dòng)引起的KOA模型兔膝關(guān)節(jié)軟骨MMP-1和IL-1β的影響

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【摘要】：溫針灸(warming needle moxibustion)是針刺和艾灸結(jié)合的一種治療手段,適用于既需要留針又需要艾灸的病癥,具有操作方便,省時(shí)省力等優(yōu)點(diǎn)。對(duì)于膝骨關(guān)節(jié)炎,溫針灸有獨(dú)特的治療作用,可通過(guò)針刺疏通局部氣血,并結(jié)合艾灸的溫?zé)嶙饔檬枭⒑�。兔膝骨關(guān)節(jié)炎制動(dòng)造模法制備的膝骨關(guān)節(jié)炎(knee osteoarthritis,KOA)模型可有效模擬膝關(guān)節(jié)在長(zhǎng)期負(fù)重受壓狀態(tài)下造成的病理改變,與KOA發(fā)病中隨著年齡增長(zhǎng)、膝關(guān)節(jié)負(fù)荷增大等情況造成軟骨退行性病變機(jī)制相符合。并規(guī)避了手術(shù)建立KOA模型造成的炎性并發(fā)癥影響實(shí)驗(yàn)指標(biāo)的情況。膝關(guān)節(jié)軟骨代謝是一個(gè)復(fù)雜的動(dòng)態(tài)平衡,一旦失衡,就會(huì)發(fā)展為KOA。其中,破壞性細(xì)胞因子是打破平衡的關(guān)鍵,在眾多導(dǎo)致KOA的細(xì)胞因子中,以白介素1β(IL-1β)為始動(dòng)環(huán)節(jié)、以基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)為主導(dǎo)因子,IL-1β可激活基質(zhì)金屬蛋白酶原,而后者通過(guò)酶的生物活性作用催化軟骨基質(zhì)的降解,加重KOA表現(xiàn)。本文主要通過(guò)三部分來(lái)探討溫針灸治療膝骨關(guān)節(jié)炎的機(jī)制和效果。第一部分是理論研究,綜述一主要闡述KOA中西醫(yī)機(jī)制和中西醫(yī)治療方法。中醫(yī)方面：KOA和古代痹證的關(guān)系；古代醫(yī)家對(duì)痹證的認(rèn)識(shí)包括病因、病機(jī)、證型等；中醫(yī)方藥的治療,西醫(yī)方面：膝關(guān)節(jié)解剖結(jié)構(gòu)；KOA流行病學(xué)調(diào)查；KOA發(fā)生機(jī)制學(xué)說(shuō)；KOA的影響因素；西醫(yī)臨床治療方法。綜述二主要是針對(duì)針灸理論和針灸療法和KOA關(guān)系的探討,通過(guò)對(duì)古代針灸醫(yī)家的理論研究,結(jié)合針灸治療的現(xiàn)代機(jī)理,探討針灸治療KOA的機(jī)制,并初步探討了近5年內(nèi)針灸相關(guān)的治療方法。綜述三探討細(xì)胞因子和KOA的關(guān)系,并概述關(guān)于針灸改變KOA細(xì)胞因子表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究。第二部分為實(shí)驗(yàn)操作。第三部分是討論,主要探討動(dòng)物模型選擇的理由、對(duì)細(xì)胞因子指標(biāo)選擇的理由和取穴理念。目的：本課題以膝關(guān)節(jié)制動(dòng)法復(fù)制的KOA模型兔為研究對(duì)象,以溫針灸為干預(yù)手段,干預(yù)后觀察膝關(guān)節(jié)大體形態(tài),以MMP-1和IL-1β為主要指標(biāo),探討溫針灸在KOA中降低炎性因子表達(dá)的相關(guān)機(jī)制,以期為臨床提供一定實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法：①選用雄性日本大耳白兔30只,適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后,采用隨機(jī)數(shù)字表法分為正常組、模型組、治療組,每組各10只。②除正常組外,其余2組兔通過(guò)膝關(guān)節(jié)強(qiáng)迫伸直位制動(dòng)6周建立膝骨關(guān)節(jié)炎模型。將兔的右下肢膝關(guān)節(jié)伸直呈150-180°,踝關(guān)節(jié)背屈60-90°,并用石膏繃帶固定,外纏繞紗布防止磨損,腳趾端露出以便于觀察血流是否通暢,防止缺血壞死,共計(jì)6周。第7周末日結(jié)束造模。③第8周首日,肉眼觀察各組兔膝關(guān)節(jié)大體形態(tài),并比較各組間差別。④正常組兔常規(guī)飼養(yǎng),不做干預(yù)；治療組兔肉眼觀察后針刺“內(nèi)膝眼”、“外膝眼”、“陽(yáng)陵泉”、“足三里”,并搓艾絨于針柄上點(diǎn)燃,行溫針灸,計(jì)20min,1日1次共4周；模型組同治療組一樣每天抓取后固定于兔臺(tái),但不做溫針灸干預(yù)。⑤采用Lequesne MG法評(píng)分并記錄各組兔膝關(guān)節(jié)腫脹程度、疼痛程度、活動(dòng)范圍和步態(tài)。⑥采用HE染色法觀察膝關(guān)節(jié)軟骨。⑦采用放射免疫法檢測(cè)各組兔膝關(guān)節(jié)軟骨組織中IL-1β和MMP-1含量。結(jié)果：①膝關(guān)節(jié)大體形態(tài)：正常組兔膝關(guān)節(jié)無(wú)變形,活動(dòng)度好,兔驅(qū)趕時(shí)行動(dòng)正常；模型組及治療組兔膝關(guān)節(jié)腫脹明顯,備皮后可觀察到膝關(guān)節(jié)軟骨變形,兔驅(qū)趕時(shí)跛行。②膝關(guān)節(jié)軟骨形態(tài)：正常組軟骨細(xì)胞分布均勻,結(jié)構(gòu)清楚,層次清晰；模型組可見(jiàn)排列散亂的軟骨細(xì)胞,部分細(xì)胞呈簇狀排列,結(jié)構(gòu)層次不明晰；治療組可見(jiàn)軟骨細(xì)胞排列較規(guī)則,偶見(jiàn)少量簇集的軟骨細(xì)胞。③ Lequesne MG評(píng)分：治療后,與正常組相比,模型組、治療組膝關(guān)節(jié)腫脹程度、疼痛程度、活動(dòng)范圍和步態(tài)四項(xiàng)評(píng)分均升高(均為P0.05)；與模型組相比,治療組膝關(guān)節(jié)腫脹程度、活動(dòng)范圍評(píng)分降低(均為P0.05)。④IL-1 β含量：與正常組相比,模型組、治療組含量顯著升高(分別為P0.01、P0.01)；與模型組相比,治療組含量顯著降低(P0.01)。⑤MMP-1含量：與正常組相比,模型組、治療組均顯著升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(分別為P0.01,P0.01)；與模型組相比,治療組含量顯著降低(P0.01)。結(jié)論：①溫針灸能降低軟骨組織中IL-1 β和MMP-1的含量。②溫針灸能改善膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞簇集現(xiàn)象。③溫針灸能降低膝關(guān)節(jié)腫脹程度,增大膝關(guān)節(jié)活動(dòng)范圍。④溫針灸治療KOA的作用機(jī)制可能與降低軟骨組織中IL-1β和MMP-1的含量有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：膝骨關(guān)節(jié)炎 基質(zhì)金屬蛋白酶-1 白細(xì)胞介素-1β 溫針灸 膝關(guān)節(jié)軟骨
【學(xué)位授予單位】：北京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R245;R-332
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• Abstract7-10
• 英文縮略詞表10-11
• 綜述一 中西醫(yī)對(duì)膝骨關(guān)節(jié)炎的研究探討11-23
• 1. 中醫(yī)對(duì)膝骨關(guān)節(jié)炎的研究探討11-14
• 1.1 簡(jiǎn)述古代中醫(yī)對(duì)膝骨關(guān)節(jié)炎的研究探討11-12
• 1.2 古代醫(yī)家對(duì)膝骨關(guān)節(jié)炎的中藥治療12-13
• 1.3 現(xiàn)代中醫(yī)對(duì)膝骨關(guān)節(jié)炎的中藥治療13-14
• 2. 西醫(yī)對(duì)膝骨關(guān)節(jié)炎的研究探討14-21
• 2.1 膝關(guān)節(jié)的結(jié)構(gòu)和生理特點(diǎn)15
• 2.2 膝骨關(guān)節(jié)炎的流行病學(xué)研究15
• 2.3 病因和影響因素15-16
• 2.4 膝骨關(guān)節(jié)炎的機(jī)制研究16-17
• 2.5 臨床表現(xiàn)和診斷17-18
• 2.6 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)治療方法18-21
• 參考文獻(xiàn)21-23
• 綜述二 針灸治療膝骨關(guān)節(jié)炎的研究進(jìn)展23-30
• 1. 針灸治療KOA機(jī)制23-24
• 1.1 針灸治療KOA機(jī)制傳統(tǒng)中醫(yī)理論研究23
• 1.2 針灸治療KOA機(jī)制現(xiàn)代醫(yī)學(xué)理論研究23-24
• 2. 針灸治療KOA方法24-28
• 2.1 毫針療法24-25
• 2.2 電針療法25
• 2.3 火針療法25-26
• 2.4 溫針灸療法26-27
• 2.5 針刀及其他療法27-28
• 參考文獻(xiàn)28-30
• 綜述三 細(xì)胞因子在KOA機(jī)制中的作用和針灸對(duì)細(xì)胞因子含量的影響30-38
• 1. 細(xì)胞因子在KOA機(jī)制中的作用30-33
• 1.1 白介素30-31
• 1.2 前列腺素E231
• 1.3 基質(zhì)金屬蛋白酶131
• 1.4 一氧化氮31-32
• 1.5 腫瘤壞死因子α32
• 1.6 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β32-33
• 1.7 胰島素樣生長(zhǎng)因子133
• 1.8 骨形態(tài)發(fā)生蛋白33
• 2. 針灸對(duì)細(xì)胞因子含量的影響33-36
• 2.1 針灸對(duì)白介素含量的影響34
• 2.2 針灸對(duì)金屬蛋白酶含量的影響34
• 2.3 針灸對(duì)生長(zhǎng)因子含量的影響34-36
• 參考文獻(xiàn)36-38
• 前言38-39
• 實(shí)驗(yàn)39-50
• 1. 實(shí)驗(yàn)材料39-40
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物39
• 1.2 主要試劑及設(shè)備39-40
• 1.3 溫針灸器具40
• 2. 實(shí)驗(yàn)方法40-43
• 2.1 動(dòng)物分組40
• 2.2 模型制備40
• 2.3 實(shí)驗(yàn)干預(yù)40-41
• 2.4 標(biāo)本的采集與保存41-42
• 2.5 膝關(guān)節(jié)腫脹、疼痛程度觀察42
• 2.6 指標(biāo)檢測(cè)42-43
• 2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法43
• 2.8 誤差控制43
• 3. 結(jié)果43-50
• 3.1 各組兔膝關(guān)節(jié)外觀肉眼觀察和運(yùn)動(dòng)步態(tài)觀察44
• 3.2 各組兔膝關(guān)節(jié)治療前后Lequesne MG評(píng)估44-46
• 3.3 各組兔膝關(guān)節(jié)軟骨觀察46-47
• 3.4 光鏡下膝關(guān)節(jié)軟骨形態(tài)47
• 3.5 關(guān)節(jié)軟骨中IL-1β含量47
• 3.6 關(guān)節(jié)軟骨中MMP-1含量47-50
• 討論50-60
• 1 KOA動(dòng)物模型的討論50-53
• 1.1 改良Hulth模型50-51
• 1.2 膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)木瓜蛋白酶注射模型51-52
• 1.3 骸韌帶內(nèi)側(cè)缺損構(gòu)建模型52
• 1.4 關(guān)節(jié)制動(dòng)模型52
• 1.5 本實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ瓦x則的討論52-53
• 2 細(xì)胞因子的討論53-56
• 2.1 損傷性細(xì)胞因子54-55
• 2.2 保護(hù)性細(xì)胞因子55-56
• 2.3 本實(shí)驗(yàn)選取指標(biāo)的討論56
• 3 穴位選取的討論56-57
• 4 干預(yù)方法的討論57
• 5 對(duì)膝關(guān)節(jié)、軟骨組織的觀察57-58
• 6 溫針灸對(duì)膝關(guān)節(jié)腫脹程度、疼痛程度、活動(dòng)范圍和步態(tài)的影響58
• 7 溫針灸對(duì)KOA模型兔關(guān)節(jié)軟骨IL-1β、MMP-1含量的影響58
• 8 存在的問(wèn)題與展望58-60
• 結(jié)論60-61
• 參考文獻(xiàn)61-63
• 附錄63-67
• 致謝67-68
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷68

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1031381