本文關(guān)鍵詞：星形膠質(zhì)細(xì)胞條件培養(yǎng)液誘導(dǎo)骨髓基質(zhì)細(xì)胞向神經(jīng)元樣細(xì)胞分化的神經(jīng)營養(yǎng)機(jī)制探討

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【摘要】：目的星形膠質(zhì)細(xì)胞(AS)與Aβ1-40誘導(dǎo)凋亡的PC12細(xì)胞共育,觀察其共育條件培養(yǎng)液誘導(dǎo)骨髓基質(zhì)細(xì)胞(BMSCs)向神經(jīng)元樣細(xì)胞分化的影響,探討神經(jīng)營養(yǎng)素家族蛋白[包括腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)、神經(jīng)生長因子(NGF)、神經(jīng)營養(yǎng)素3(NT-3)]是否參與了此過程。方法 PC12細(xì)胞分別經(jīng)10μg/mL Aβ1-40誘導(dǎo)不同時(shí)間點(diǎn)(0 h、4 h、6 h、12 h、24 h)后分為兩部分,一部分應(yīng)用流式細(xì)胞技術(shù)檢測不同時(shí)間點(diǎn)PC12細(xì)胞凋亡率;另一部分與星形膠質(zhì)細(xì)胞共育2 d,收集各組條件培養(yǎng)液;各組條件培養(yǎng)液分為兩部分,一部分應(yīng)用ELASA法檢測各組細(xì)胞條件培養(yǎng)液中的BDNF、NGF、NT-3蛋白含量;將另一部分各組細(xì)胞條件培養(yǎng)液對BMSCs進(jìn)行誘導(dǎo)分化,免疫熒光檢測BMSCs神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)、巢蛋白(nestin)蛋白表達(dá)和計(jì)數(shù)神經(jīng)元樣細(xì)胞分化比例。結(jié)果在Aβ1-40作用6 h時(shí)間點(diǎn),PC12細(xì)胞凋亡率達(dá)高峰(P0.05);與各組比較,與Aβ1-40誘導(dǎo)6 h后的PC12細(xì)胞共育2 d后的星形膠質(zhì)細(xì)胞條件培養(yǎng)液中(即C3組)的BDNF蛋白總量明顯增高(A=1.87±0.43),具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),并且其誘導(dǎo)的BMSCs NSE(A=38.63±2.72)、nestin(A=43.53±5.63)表達(dá)和神經(jīng)元樣細(xì)胞分化比例(A=44.62±3.22)明顯升高,與其他組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論星形膠質(zhì)細(xì)胞與Aβ1-40誘導(dǎo)凋亡的PC12細(xì)胞共育后,星形膠質(zhì)細(xì)胞共育條件培養(yǎng)液促進(jìn)BMSCs向神經(jīng)元樣細(xì)胞分化,BDNF可能參與了這一過程。
【作者單位】： 中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科;中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科;
【關(guān)鍵詞】： 星形膠質(zhì)細(xì)胞 骨髓基質(zhì)細(xì)胞 分化 腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子 神經(jīng)生長因子神經(jīng)營養(yǎng)素-
【基金】：遼寧省博士科研啟動(dòng)基金(20091106)
【分類號】：R329
【正文快照】： 骨髓基質(zhì)細(xì)胞(bone marrow stromal cells,BM-SCs)具有明顯的可塑性,既能在體外增殖,又能保持未分化狀態(tài),在一定的環(huán)境中和特異的因子誘導(dǎo)下,具有向多種細(xì)胞系分化的潛能,如:神經(jīng)樣細(xì)胞[1]。而且取材方便,容易分離和體外擴(kuò)增,目前被應(yīng)用在神經(jīng)系統(tǒng)變性病領(lǐng)域的研究,如阿爾茨

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