本文關(guān)鍵詞：Ⅰ、Ⅱ型膠原酶分離心肌細(xì)胞的效果比較及分析

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【摘要】：目的比較Ⅰ型和Ⅱ膠原酶對(duì)大鼠心肌細(xì)胞分離的分離效果,并對(duì)其成因進(jìn)行分析。方法利用Ⅰ、Ⅱ型膠原酶分別消化心肌組織,比較兩種酶對(duì)心肌細(xì)胞的分離效果;采用免疫組織化學(xué)、免疫熒光和Western blotting技術(shù)檢測(cè)成年大鼠心肌組織中是否存在Ⅱ型膠原;用大鼠劍突軟骨部組織的Ⅱ型膠原和心肌組織的Ⅲ型膠原作為陽性對(duì)照;用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)檢測(cè)Ⅱ型膠原酶試劑的成分。結(jié)果Ⅰ、Ⅱ型膠原酶分別消化心肌組織,所獲心肌細(xì)胞數(shù)量分別為(5.66±0.83)×106和(5.61±1.01)×106,心肌細(xì)胞存活率分別為(74.17±6.27)%及(75.50±9.07)%,兩者差異無顯著性。分離的心肌細(xì)胞大部分不搏動(dòng),極少數(shù)細(xì)胞保持自律性收縮;Ⅱ型膠原在成年大鼠心肌組織中呈陰性表達(dá),在劍突的軟骨組織中呈陽性表達(dá),Ⅲ型膠原在心肌組織中呈陽性表達(dá);Western blotting檢測(cè)顯示,心肌組織中并無Ⅱ型膠原表達(dá);SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳結(jié)果顯示,Ⅱ型膠原酶試劑是一種包括5種蛋白的混合物。結(jié)論成年大鼠心肌組織中無Ⅱ型膠原,用Ⅱ型膠原酶分離大鼠心肌細(xì)胞不具有針對(duì)性。
【作者單位】： 新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院 河南省醫(yī)用組織再生重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院腫瘤科;
【關(guān)鍵詞】： Ⅱ型膠原酶 Ⅱ型膠原 心肌 免疫組織化學(xué) 免疫熒光 大鼠
【基金】：河南省21世紀(jì)優(yōu)秀人才支持計(jì)劃資助項(xiàng)目(2005HANCET215) 河南省重點(diǎn)攻關(guān)資助項(xiàng)目(072102310012)
【分類號(hào)】：R329
【正文快照】： 心肌細(xì)胞外基質(zhì)是心肌組織的重要組成部分,它們對(duì)心肌細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化等發(fā)揮重要作用[1]。心肌細(xì)胞外基質(zhì)的主要成分包括:結(jié)構(gòu)蛋白(膠原蛋白、彈性蛋白等)、黏連蛋白(層黏連蛋白、纖黏連蛋白等)、蛋白聚糖等[2~5]。其中,膠原是細(xì)胞外基質(zhì)中含量最豐富的成分,在成年動(dòng)物心臟中

【參考文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1016329