HCV核心蛋白抑制SFRP1基因啟動子活性
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【摘要】:目的探討HCV核心蛋白對Wnt信號通路抑制分子SFRP1啟動子活性的影響。方法以人肝癌細胞系Huh7基因組為模板,擴增SFRP1啟動子區(qū)不同片段(-407~-27bp,-837~-27 bp,-1 202~-27 bp,-1 619~-27 bp,-2 029~-27 bp),以pGL3-Basic為載體分別構(gòu)建SFRP1啟動子區(qū)截短報告質(zhì)粒。將構(gòu)建好的質(zhì)粒與pRL-TK共轉(zhuǎn)染HEK293細胞,確定啟動子區(qū)活性最強區(qū)域;分別用編碼HCV核心蛋白的腺病毒或GFP對照腺病毒感染已轉(zhuǎn)染重組報告質(zhì)粒的SK-Hep1細胞,觀察AdCore對SFRP1啟動子活性的調(diào)控作用。結(jié)果 SFRP1啟動子區(qū)域-407~-27 bp片段活性最強;與pGL3-Basic對照組相比較,相對熒光素酶活性增加了37.31±4.45倍(P0.01),pGL3-S2~S5的活性分別增加了28.74±2.47、13.56±2.52、12.97±0.87和8.29±0.09倍(P0.01);HCV Core蛋白能夠抑制SFRP1基因啟動子區(qū)活性,其對pGL3-S1的抑制作用最強,與GFP對照組相比較,抑制率為63.8%±1.0%(P0.01)。結(jié)論 HCV核心蛋白通過抑制SFRP1啟動子區(qū)活性下調(diào)SFRP1基因的表達,可能參與Wnt/β-catenin信號通路的活化,并與原發(fā)性肝癌的發(fā)生密切相關(guān)。
【作者單位】: 重慶醫(yī)科大學感染性疾病分子生物學教育部重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】: SFRP 啟動子 熒光素酶報告基因載體 HCV核心蛋白
【基金】:國家自然科學基金(31171307;30972586)
【分類號】:R373.21
【正文快照】: 核心蛋白是丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)編碼的一種多功能蛋白,通過激活多種信號通路,與原癌基因直接作用或者干擾機體免疫防御功能,參與HCV相關(guān)肝病,如肝癌的發(fā)生[1-2]。然而,丙型肝炎病毒核心蛋白(hepatitis C virus coreprotein,HCV Core)是如何誘導肝細胞肝癌(Hep
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,本文編號:1016228
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