本文關鍵詞：基于RTB的新型免疫增強劑構(gòu)建、表達及免疫效果評估

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【摘要】：目的利用自主知識產(chǎn)權抗體3E1,確定蓖麻毒素B鏈與細胞特異性結(jié)合的活性肽部位,通過構(gòu)建含肽的綠色熒光蛋白原核表達載體,實現(xiàn)含肽的綠色熒光蛋白在大腸桿菌中的高效、可溶性表達,評價小鼠舌下口服含蓖麻毒素B鏈肽的綠色熒光蛋白后黏膜免疫應答的能力。方法用生物信息學技術,確定蓖麻毒素B鏈與細胞特異性結(jié)合的活性肽部位;分子克隆技術構(gòu)建含不同肽的綠色熒光蛋白原核表達載體;鎳金屬離子鏊合柱純化目的蛋白;間接ELISA測定小鼠舌下口服不同肽-GFP融合蛋白后各種抗體水平的變化。結(jié)果實現(xiàn)了含不同肽的GFP在大腸桿菌中的高效、可溶性表達,獲得了純度大于90%的肽-GFP融合蛋白。免疫小鼠后,小鼠血清中均檢測到了較高水平的IgG抗體,其中的P1肽-GFP融合蛋白免疫小鼠血清中檢測到了較高水平的IgG2a和IgM抗體。免疫組血清中IgG2b、IgG3、IgA水平與對照組無明顯差異。結(jié)論分別用4個小分子肽-GFP融合蛋白免疫小鼠后,小鼠血清中均檢測到了較高水平的IgG抗體,其中的P1肽-GFP融合蛋白免疫小鼠的血清中檢測到了較高水平的IgG2a和IgM抗體,激發(fā)了Th1型免疫應答。
【作者單位】： 海軍總醫(yī)院檢驗科;海軍總醫(yī)院眼科;軍事醫(yī)學科學院基礎研究所;
【關鍵詞】： 蓖麻毒素B鏈 黏膜免疫 小分子肽 Th型免疫應答
【基金】：國家自然科學基金(30872394)
【分類號】：R392.12
【正文快照】： 黏膜免疫可誘導局部黏膜產(chǎn)生分泌性保護性抗體,并誘導其它部位產(chǎn)生sIgA和全身體液免疫應答,同時,黏膜免疫還誘導黏膜及全身CTL反應,并產(chǎn)生分泌IFN-γ的CD4+T細胞[1],在疫苗研究中具有重要意義。由于目前黏膜免疫中使用抗原的免疫原性普遍較弱,使基于黏膜免疫疫苗誘導的免疫應

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【共引文獻】

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【二級參考文獻】

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中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳U，

本文編號：1016070