本文關鍵詞：干擾MH-S細胞株β-catenin表達的shRNA慢病毒載體構建及功能鑒定

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【摘要】：目的針對β-catenin基因構建短發(fā)夾RNA(short harpin RNA,shRNA)慢病毒表達載體,鑒定β-catenin基因干擾效率,并檢測其對小鼠肺泡巨噬細胞株MH-S功能的影響。方法設計并構建5個針對β-catenin基因的shRNA干擾載體。實驗分為空白細胞對照組(MH-S)、二氧化硅誘導組(silica)、病毒干擾組(silica+LV-shβ-catenin)、病毒對照組(silica+LV-shβ-catenin-NC)4組,realtime-PCR檢測各組細胞β-catenin基因mRNA的表達水平,ELISA檢測各組細胞培養(yǎng)上清中轉化生長因子-β1(transforming growth factor-β,TGF-β1)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)、腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)的分泌情況。結果二氧化硅誘導后,與silica組和silica+LV-shβ-catenin組比較,silica+LV-shβ-catenin-NC組β-catenin mRNA的表達率降低(均有P0.05),silica+LVshβ-catenin-NC組TGF-β1、IL-6和TNF-α的分泌減少(均有P0.05)。結論構建的shRNA慢病毒載體能夠有效抑制經二氧化硅誘導的MH-S細胞株β-catenin基因表達,并抑制TGF-β1、IL-6和TNF-α的分泌,為體內矽肺纖維化的分子機制研究奠定基礎。
【作者單位】： 天津市疾病預防控制中心職業(yè)病預防控制所;天津醫(yī)科大學公共衛(wèi)生學院勞動衛(wèi)生與環(huán)境衛(wèi)生學系;
【關鍵詞】： RNA 慢病毒屬 細胞因子類
【基金】：國家自然科學基金(81102106) 中國博士后科學基金(2014M560189) 天津市自然科學基金(15JCQNJC10500)
【分類號】：R135.2
【正文快照】： (Chin J Dis Control Prev 2015,19(9):922-925)矽肺是目前我國發(fā)病率最高的職業(yè)病之一,嚴重危害我國工人健康。目前尚無治療矽肺纖維化的有效方法。研究表明,Wnt/β-catenin信號轉導途徑與肺纖維化的形成密切相關[1],而β-catenin是經典Wnt/β-catenin信號轉導途徑中最重要的

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本文編號：880245