發(fā)布時(shí)間：2017-09-19 07:13

  本文關(guān)鍵詞：干擾MH-S細(xì)胞株β-catenin表達(dá)的shRNA慢病毒載體構(gòu)建及功能鑒定

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【摘要】：目的針對(duì)β-catenin基因構(gòu)建短發(fā)夾RNA(short harpin RNA,shRNA)慢病毒表達(dá)載體,鑒定β-catenin基因干擾效率,并檢測(cè)其對(duì)小鼠肺泡巨噬細(xì)胞株MH-S功能的影響。方法設(shè)計(jì)并構(gòu)建5個(gè)針對(duì)β-catenin基因的shRNA干擾載體。實(shí)驗(yàn)分為空白細(xì)胞對(duì)照組(MH-S)、二氧化硅誘導(dǎo)組(silica)、病毒干擾組(silica+LV-shβ-catenin)、病毒對(duì)照組(silica+LV-shβ-catenin-NC)4組,realtime-PCR檢測(cè)各組細(xì)胞β-catenin基因mRNA的表達(dá)水平,ELISA檢測(cè)各組細(xì)胞培養(yǎng)上清中轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(transforming growth factor-β,TGF-β1)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)、腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)的分泌情況。結(jié)果二氧化硅誘導(dǎo)后,與silica組和silica+LV-shβ-catenin組比較,silica+LV-shβ-catenin-NC組β-catenin mRNA的表達(dá)率降低(均有P0.05),silica+LVshβ-catenin-NC組TGF-β1、IL-6和TNF-α的分泌減少(均有P0.05)。結(jié)論構(gòu)建的shRNA慢病毒載體能夠有效抑制經(jīng)二氧化硅誘導(dǎo)的MH-S細(xì)胞株β-catenin基因表達(dá),并抑制TGF-β1、IL-6和TNF-α的分泌,為體內(nèi)矽肺纖維化的分子機(jī)制研究奠定基礎(chǔ)。
【作者單位】： 天津市疾病預(yù)防控制中心職業(yè)病預(yù)防控制所;天津醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院勞動(dòng)衛(wèi)生與環(huán)境衛(wèi)生學(xué)系;
【關(guān)鍵詞】： RNA 慢病毒屬 細(xì)胞因子類
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(81102106) 中國(guó)博士后科學(xué)基金(2014M560189) 天津市自然科學(xué)基金(15JCQNJC10500)
【分類號(hào)】：R135.2
【正文快照】： (Chin J Dis Control Prev 2015,19(9):922-925)矽肺是目前我國(guó)發(fā)病率最高的職業(yè)病之一,嚴(yán)重危害我國(guó)工人健康。目前尚無(wú)治療矽肺纖維化的有效方法。研究表明,Wnt/β-catenin信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑與肺纖維化的形成密切相關(guān)[1],而β-catenin是經(jīng)典Wnt/β-catenin信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中最重要的

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 張建功;王思華;李小龍;姚武;燕貞;吳擁軍;吳逸明;王威;;POT1 RNA干擾與煤焦瀝青煙提取物對(duì)BEAS-2B細(xì)胞端粒的損傷效應(yīng)[J];中華疾病控制雜志;2013年08期

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 張素梅;郝春秋;康文臻;彭梅娟;賈戰(zhàn)生;謝玉梅;;攜TIMP-1基因RNAi慢病毒載體感染大鼠HSC-T6細(xì)胞抑制目的基因表達(dá)[J];實(shí)用肝臟病雜志;2013年06期

2 王樹偉;王楊;談夢(mèng)偉;袁揚(yáng);龔德軍;韓林;徐志云;;靶向人BRG1基因的慢病毒載體構(gòu)建及效率驗(yàn)證[J];國(guó)際心血管病雜志;2014年04期

3 陳丹;姚冬生;謝春芳;劉大嶺;;四環(huán)素核酸適配體電化學(xué)生物傳感器的研制[J];中國(guó)生物工程雜志;2013年11期

4 唐德平;毛愛紅;王芳;張虹;王黎;廖世奇;;適配體介導(dǎo)脂質(zhì)體靶向遞送siRNA的研究[J];中國(guó)生物工程雜志;2015年01期

5 徐瑩;和姬苓;孫洪英;;RNA干擾技術(shù)及其在心腦血管疾病中的應(yīng)用[J];醫(yī)學(xué)綜述;2013年19期

6 王翔凌;孫寧玲;馬麗萍;郭曉夏;姜娟;王魯雁;何湘君;;大鼠PER2基因RNAi慢病毒載體的構(gòu)建及干擾效率的測(cè)定[J];西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2014年01期

7 龔建勇;;小干擾RNA非病毒載體研究進(jìn)展[J];藥品評(píng)價(jià);2013年24期

8 萬(wàn)康;李健;;組織因子小干擾RNA在預(yù)防支架內(nèi)再狹窄的研究進(jìn)展[J];心血管病學(xué)進(jìn)展;2014年01期

9 邱崇;張亞琦;劉衛(wèi)中;王堅(jiān)成;張強(qiáng);;用于腫瘤治療的siRNA納米輸送系統(tǒng)[J];中國(guó)新藥雜志;2014年16期

10 孔令雷;李樺;;RNA干擾技術(shù)在藥物轉(zhuǎn)運(yùn)體研究中的應(yīng)用[J];中國(guó)藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志;2014年06期

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前7條

1 肖科;VEGF-A，，VEGF-C及MMP-2表達(dá)調(diào)控膽管癌增殖、侵襲轉(zhuǎn)移能力及細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究[D];中南大學(xué);2012年

2 錢江;RNA干擾Slug基因?qū)Y(jié)腸癌HCT116細(xì)胞生物學(xué)行為影響及其機(jī)制研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2013年

3 陳迪;膜型1基質(zhì)金屬蛋白酶（MT1-MMP）在視網(wǎng)膜前膜中的表達(dá)[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2010年

4 王偉琦;十七β羥脫氫酶抑制劑的乳腺癌細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)及功能研究[D];吉林大學(xué);2014年

5 王海霞;NEDD9在上皮性卵巢癌惡性生物學(xué)行為中的作用及機(jī)制的初步研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2014年

6 王樹偉;BRG1與相關(guān)長(zhǎng)鏈非編碼RNA在胸主動(dòng)脈夾層中的作用機(jī)制研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2014年

7 陳琛;組織因子靶向性納米粒介導(dǎo)siRNA的靶向遞送[D];華中科技大學(xué);2014年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 丁超;陽(yáng)離子脂質(zhì)體為載體的基因體內(nèi)遞送效果研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2012年

2 刁艷君;3TAT-DRBD融合蛋白的原核表達(dá)及其siRNA結(jié)合活性與穿膜功能鑒定[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2013年

3 張素梅;基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-1基因的RNAi載體構(gòu)建及其抑制效應(yīng)[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2013年

4 劉俊麗;靶向干擾Akt對(duì)耐順鉑人卵巢癌細(xì)胞系SKOV3/DDP細(xì)胞體外生長(zhǎng)的研究[D];南昌大學(xué);2014年

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 李智濤;馮艷銘;王威;王麗霞;趙勇;祝寒松;吳衛(wèi)東;吳逸明;;煤焦瀝青煙提取物致人支氣管上皮細(xì)胞BEAS-2B染色體不穩(wěn)定性研究[J];工業(yè)衛(wèi)生與職業(yè)病;2011年03期

2 趙紅軍;胡建明;黎銀燕;楊磊;凌曉璇;王云南;曾婉明;曾波航;呂嘉春;;廣州地區(qū)原發(fā)性肺癌危險(xiǎn)因素的病例對(duì)照研究[J];中華疾病控制雜志;2013年02期

3 王威;李智濤;祝寒松;趙勇;王麗霞;燕貞;李時(shí)恩;許東;吳衛(wèi)東;吳擁軍;吳逸明;;煤焦瀝青煙提取物致人支氣管上皮細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化細(xì)胞端粒損傷研究[J];中國(guó)職業(yè)醫(yī)學(xué);2011年05期

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王奇峰;范欽和;彭韜;宋國(guó)新;;孤立性纖維性腫瘤中β-catenin的表達(dá)及其臨床意義[J];臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志;2008年03期

2 ;Effects of basic fibroblast growth factor on beta-catenin protein and mRNA expression during the proliferation of endogenous neural stem cells following focal cerebral ischemia[J];Neural Regeneration Research;2009年02期

3 Hong-Wen Wu;Cheng-Yong Qin;Ji-Lai Huang;Xian-Yi Kong;Wen-Ji Wang;Wen-Kun Bai;;Correlations of β-catenin,Ki67 and Her-2/neu with gastric cancer[J];Asian Pacific Journal of Tropical Medicine;2014年04期

4 DAVID KIMELMAN;β-Catenin and Theβ-Catenin Destruction Complex From Basic Science to Drug Design[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;2005年10期

5 李津;鐘清玲;劉德伍;章志偉;彭燕;;β-catenin信號(hào)分子的生物學(xué)功能及其在創(chuàng)傷修復(fù)中的研究進(jìn)展[J];南昌大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2014年07期

6 ;Expression of T cell factor-4 in non-small-cell lung cancer[J];Chinese Medical Journal;2005年02期

7 Kevin A.Maupin;Casey J.Droscha;Bart O.Williams;;A Comprehensive Overview of Skeletal Phenotypes Associated with Alterations in Wnt/β-catenin Signaling in Humans and Mice[J];Bone Research;2013年01期

8 劉凱;β-catenin與腫瘤關(guān)系的研究進(jìn)展[J];重慶醫(yī)學(xué);2003年10期

9 孫為;王遠(yuǎn)勤;晏奇;盧銳;施斌;;Effects of Er-Zhi-Wan on Microarchitecture and Regulation of Wnt/β-catenin Signaling Pathway in Alveolar Bone of Ovariectomized Rats[J];Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences);2014年01期

10 楊秀,李慶昌,邱雪杉,王恩華;β-catenin在肺癌中的表達(dá)與預(yù)后的研究[J];中國(guó)醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2001年03期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 ;Regulatory roles of β-catenin on the proliferation of hair follicle stem cells[A];“細(xì)胞活動(dòng) 生命活力”——中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)全體會(huì)員代表大會(huì)暨第十二次學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要集[C];2011年

2 ;WntSa inhibits the growth of hair follicles by antagonizing canonical Wnt/p-catenin signaling in mice in vivo[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十八次全國(guó)皮膚性病學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2012年

3 ;The Cytoplasmic Domain of MUC1 Induces Hyperplasia in the Mammary Gland and Correlates with Nuclear Accumulation of β-catenin[A];“細(xì)胞活動(dòng) 生命活力”——中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)全體會(huì)員代表大會(huì)暨第十二次學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要集[C];2011年

4 Jing Du;Yan Zu;Jing Li;Xiao-fei Chen;Guang-yao Zhang;Chun Yang;;Wnt/p-catenin feedback loop plays an important role in mechano-sensation of ECM elasticity[A];第十屆全國(guó)生物力學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議暨第十二屆全國(guó)生物流變學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2012年

5 Chan Xie;Dong-ying Xie;Geng-lin Zhang;Pei-pei Wang;Liang Peng;Zhi-liang Gao;;FOXG1 promote HCC stem cell self-renewal through promoting b-catenin nuclear accumulating by forming TCF4/b-cateinin/FOXG1 complex[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十六次全國(guó)病毒性肝炎及肝病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2013年

6 武海麗;李宗偉;楊鵬;李卓玉;;Knockdown of PKM2 induces the compensation of glutaminolysis through β-catenin-Myc pathway intumor cells[A];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)第十一次會(huì)員代表大會(huì)暨2014年全國(guó)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集——大會(huì)報(bào)告及博士生論壇[C];2014年

7 武海麗;李宗偉;楊鵬;李卓玉;;Knockdown of PKM2 induces the compensation of glutaminolysis through β-catenin-Myc pathway in tumor cells[A];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)第十一次會(huì)員代表大會(huì)暨2014年全國(guó)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集——專題報(bào)告二[C];2014年

8 岳曉;張志勇;楊e

本文編號(hào)：880245