高氧致慢性肺疾病新生鼠Caveolin-1表達(dá)及其可能機(jī)制的研究
發(fā)布時(shí)間:2023-11-03 19:36
前言:隨著機(jī)械通氣的廣泛開展、早產(chǎn)兒管理技術(shù)的日益提高和肺表面活性物質(zhì)的普遍應(yīng)用,隨之而來因長時(shí)間吸入高濃度氧所導(dǎo)致的早產(chǎn)兒支氣管肺發(fā)育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)卻成為威脅早產(chǎn)兒健康和生命的首要疾病。因其發(fā)病機(jī)制尚不十分清楚,目前仍無有效的防治手段,反復(fù)下呼吸道感染、高反應(yīng)性氣道疾病、生長發(fā)育遲緩、喂養(yǎng)困難等一直是存活者常遺留的病癥,因此,早產(chǎn)兒呼吸系統(tǒng)疾病一直是國內(nèi)外新生兒科醫(yī)生面臨的最具挑戰(zhàn)性的存在。盡管BPD的發(fā)病機(jī)制目前尚未完全清楚,但其肺間質(zhì)纖維化的晚期病理結(jié)局已無可置疑,肺間質(zhì)纖維化主要表現(xiàn)為過度增殖的肺成纖維細(xì)胞(lung fibrolast,LF)沉積于肺間質(zhì)或替代正常的肺上皮。在醫(yī)學(xué)方面對(duì)BPD的研究始終持續(xù)著也是由于在其治療中,肺間質(zhì)纖維化的防治一直是一個(gè)難題,所以。目前關(guān)于BPD肺間質(zhì)纖維化發(fā)生機(jī)制的研究多集中以下方面:(1)細(xì)胞外基質(zhì)合成與降解失衡;(2)龐大的細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò),轉(zhuǎn)化生長因子β(TGF-β)是其中研究最多的,不僅對(duì)于膠原蛋白的合成同時(shí)對(duì)成纖維細(xì)胞的增生兩者它都是可以產(chǎn)生促進(jìn)作用的;(3)細(xì)胞作用的復(fù)雜化:在纖...
【文章頁數(shù)】:75 頁
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮略語
第一部分 暴露高氧后新生鼠肺組織Caveolin-1 表達(dá)及其作用的研究
1 前言
2 實(shí)驗(yàn)材料與方法
2.1 材料
2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
2.1.2 主要試劑
2.1.3 主要儀器
2.2 方法
2.2.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象、分組及BPD大鼠動(dòng)物模型的建立
2.2.2 標(biāo)本的采集和處理
2.2.3 免疫組化技術(shù)檢測(cè)各組肺組織caveolin-1 表達(dá)
2.2.4 Western blot法檢測(cè)各組肺組織caveolin-1 動(dòng)態(tài)表達(dá)
2.2.5 Real-time PCR法檢測(cè)各組肺組織caveolin-1 m RNA的動(dòng)態(tài)表達(dá)
2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果
3.1 肺組織的形態(tài)學(xué)改變
3.2 肺組織纖維化評(píng)分
3.3 caveolin-1 在空氣組和高氧組不同日齡大鼠肺組織的動(dòng)態(tài)表達(dá)
3.3.1 免疫組織化學(xué)染色方法觀察caveolin-1 在各組不同日齡大鼠肺組織的動(dòng)態(tài)表達(dá)
4 討論
5 結(jié)論
第二部分 暴露高氧后新生鼠肺成纖維細(xì)胞Caveolin-1 表達(dá)及其對(duì)細(xì)胞周期的影響
1 前言
2 實(shí)驗(yàn)材料與方法
2.1 材料
2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物同論文一
2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
2.2 方法
2.2.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象、分組及BPD模型的建立同論文一
2.2.2 體外肺成纖維細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及鑒定
2.2.3 Western blot法檢測(cè)各組肺成纖維細(xì)胞caveolin-1 動(dòng)態(tài)表達(dá)
2.2.4 流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)各組肺成纖維細(xì)胞的周期
2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果
3.1 原代培養(yǎng)大鼠肺成纖維細(xì)胞形態(tài)及鑒定結(jié)果
3.2 Western blot方法檢測(cè)caveolin-1 在肺成纖維細(xì)胞動(dòng)態(tài)表達(dá)
3.3 空氣和高氧各組LF細(xì)胞周期的變化
4 討論
5 結(jié)論
第三部分 干預(yù)TGF-β/SMAD信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路后caveolin-1 的動(dòng)態(tài)表達(dá)
1 前言
2 材料和方法
2.1 材料
2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
2.2 方法
2.2.1 研究對(duì)象
2.2.2 細(xì)胞分組
2.2.3 Western blot法檢測(cè)各組成纖維細(xì)胞Caveolin-1 的表達(dá)
2.2.4 Real-time PCR法檢測(cè)各組成纖維細(xì)胞的Caveolin-1 m RNA水平同論文一。
2.2.5 流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)各組肺成纖維細(xì)胞的周期
2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果
3.1 Western blot法檢測(cè)Caveolin-1 在各組成纖維細(xì)胞中的表達(dá)
3.2 Real-time PCR法檢測(cè)各組成纖維細(xì)胞的Caveolin-1 m RNA水平
3.3 流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)各組肺成纖維細(xì)胞的周期
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià)
參考文獻(xiàn)
綜述
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷
本文編號(hào):3859769
【文章頁數(shù)】:75 頁
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮略語
第一部分 暴露高氧后新生鼠肺組織Caveolin-1 表達(dá)及其作用的研究
1 前言
2 實(shí)驗(yàn)材料與方法
2.1 材料
2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
2.1.2 主要試劑
2.1.3 主要儀器
2.2 方法
2.2.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象、分組及BPD大鼠動(dòng)物模型的建立
2.2.2 標(biāo)本的采集和處理
2.2.3 免疫組化技術(shù)檢測(cè)各組肺組織caveolin-1 表達(dá)
2.2.4 Western blot法檢測(cè)各組肺組織caveolin-1 動(dòng)態(tài)表達(dá)
2.2.5 Real-time PCR法檢測(cè)各組肺組織caveolin-1 m RNA的動(dòng)態(tài)表達(dá)
2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果
3.1 肺組織的形態(tài)學(xué)改變
3.2 肺組織纖維化評(píng)分
3.3 caveolin-1 在空氣組和高氧組不同日齡大鼠肺組織的動(dòng)態(tài)表達(dá)
3.3.1 免疫組織化學(xué)染色方法觀察caveolin-1 在各組不同日齡大鼠肺組織的動(dòng)態(tài)表達(dá)
4 討論
5 結(jié)論
第二部分 暴露高氧后新生鼠肺成纖維細(xì)胞Caveolin-1 表達(dá)及其對(duì)細(xì)胞周期的影響
1 前言
2 實(shí)驗(yàn)材料與方法
2.1 材料
2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物同論文一
2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
2.2 方法
2.2.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象、分組及BPD模型的建立同論文一
2.2.2 體外肺成纖維細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及鑒定
2.2.3 Western blot法檢測(cè)各組肺成纖維細(xì)胞caveolin-1 動(dòng)態(tài)表達(dá)
2.2.4 流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)各組肺成纖維細(xì)胞的周期
2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果
3.1 原代培養(yǎng)大鼠肺成纖維細(xì)胞形態(tài)及鑒定結(jié)果
3.2 Western blot方法檢測(cè)caveolin-1 在肺成纖維細(xì)胞動(dòng)態(tài)表達(dá)
3.3 空氣和高氧各組LF細(xì)胞周期的變化
4 討論
5 結(jié)論
第三部分 干預(yù)TGF-β/SMAD信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路后caveolin-1 的動(dòng)態(tài)表達(dá)
1 前言
2 材料和方法
2.1 材料
2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
2.2 方法
2.2.1 研究對(duì)象
2.2.2 細(xì)胞分組
2.2.3 Western blot法檢測(cè)各組成纖維細(xì)胞Caveolin-1 的表達(dá)
2.2.4 Real-time PCR法檢測(cè)各組成纖維細(xì)胞的Caveolin-1 m RNA水平同論文一。
2.2.5 流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)各組肺成纖維細(xì)胞的周期
2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果
3.1 Western blot法檢測(cè)Caveolin-1 在各組成纖維細(xì)胞中的表達(dá)
3.2 Real-time PCR法檢測(cè)各組成纖維細(xì)胞的Caveolin-1 m RNA水平
3.3 流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)各組肺成纖維細(xì)胞的周期
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià)
參考文獻(xiàn)
綜述
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷
本文編號(hào):3859769
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