高氧致慢性肺疾病新生鼠Caveolin-1表達及其可能機制的研究
發(fā)布時間:2023-11-03 19:36
前言:隨著機械通氣的廣泛開展、早產(chǎn)兒管理技術(shù)的日益提高和肺表面活性物質(zhì)的普遍應用,隨之而來因長時間吸入高濃度氧所導致的早產(chǎn)兒支氣管肺發(fā)育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)卻成為威脅早產(chǎn)兒健康和生命的首要疾病。因其發(fā)病機制尚不十分清楚,目前仍無有效的防治手段,反復下呼吸道感染、高反應性氣道疾病、生長發(fā)育遲緩、喂養(yǎng)困難等一直是存活者常遺留的病癥,因此,早產(chǎn)兒呼吸系統(tǒng)疾病一直是國內(nèi)外新生兒科醫(yī)生面臨的最具挑戰(zhàn)性的存在。盡管BPD的發(fā)病機制目前尚未完全清楚,但其肺間質(zhì)纖維化的晚期病理結(jié)局已無可置疑,肺間質(zhì)纖維化主要表現(xiàn)為過度增殖的肺成纖維細胞(lung fibrolast,LF)沉積于肺間質(zhì)或替代正常的肺上皮。在醫(yī)學方面對BPD的研究始終持續(xù)著也是由于在其治療中,肺間質(zhì)纖維化的防治一直是一個難題,所以。目前關(guān)于BPD肺間質(zhì)纖維化發(fā)生機制的研究多集中以下方面:(1)細胞外基質(zhì)合成與降解失衡;(2)龐大的細胞因子網(wǎng)絡(luò),轉(zhuǎn)化生長因子β(TGF-β)是其中研究最多的,不僅對于膠原蛋白的合成同時對成纖維細胞的增生兩者它都是可以產(chǎn)生促進作用的;(3)細胞作用的復雜化:在纖...
【文章頁數(shù)】:75 頁
【學位級別】:博士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮略語
第一部分 暴露高氧后新生鼠肺組織Caveolin-1 表達及其作用的研究
1 前言
2 實驗材料與方法
2.1 材料
2.1.1 實驗動物
2.1.2 主要試劑
2.1.3 主要儀器
2.2 方法
2.2.1 實驗對象、分組及BPD大鼠動物模型的建立
2.2.2 標本的采集和處理
2.2.3 免疫組化技術(shù)檢測各組肺組織caveolin-1 表達
2.2.4 Western blot法檢測各組肺組織caveolin-1 動態(tài)表達
2.2.5 Real-time PCR法檢測各組肺組織caveolin-1 m RNA的動態(tài)表達
2.3 統(tǒng)計學分析
3 結(jié)果
3.1 肺組織的形態(tài)學改變
3.2 肺組織纖維化評分
3.3 caveolin-1 在空氣組和高氧組不同日齡大鼠肺組織的動態(tài)表達
3.3.1 免疫組織化學染色方法觀察caveolin-1 在各組不同日齡大鼠肺組織的動態(tài)表達
4 討論
5 結(jié)論
第二部分 暴露高氧后新生鼠肺成纖維細胞Caveolin-1 表達及其對細胞周期的影響
1 前言
2 實驗材料與方法
2.1 材料
2.1.1 實驗動物同論文一
2.1.2 實驗試劑
2.1.3 實驗儀器
2.2 方法
2.2.1 實驗對象、分組及BPD模型的建立同論文一
2.2.2 體外肺成纖維細胞的分離、培養(yǎng)及鑒定
2.2.3 Western blot法檢測各組肺成纖維細胞caveolin-1 動態(tài)表達
2.2.4 流式細胞技術(shù)檢測各組肺成纖維細胞的周期
2.3 統(tǒng)計學分析
3 結(jié)果
3.1 原代培養(yǎng)大鼠肺成纖維細胞形態(tài)及鑒定結(jié)果
3.2 Western blot方法檢測caveolin-1 在肺成纖維細胞動態(tài)表達
3.3 空氣和高氧各組LF細胞周期的變化
4 討論
5 結(jié)論
第三部分 干預TGF-β/SMAD信號轉(zhuǎn)導通路后caveolin-1 的動態(tài)表達
1 前言
2 材料和方法
2.1 材料
2.1.1 實驗動物
2.1.2 實驗試劑
2.1.3 實驗儀器
2.2 方法
2.2.1 研究對象
2.2.2 細胞分組
2.2.3 Western blot法檢測各組成纖維細胞Caveolin-1 的表達
2.2.4 Real-time PCR法檢測各組成纖維細胞的Caveolin-1 m RNA水平同論文一。
2.2.5 流式細胞技術(shù)檢測各組肺成纖維細胞的周期
2.3 統(tǒng)計學分析
3 結(jié)果
3.1 Western blot法檢測Caveolin-1 在各組成纖維細胞中的表達
3.2 Real-time PCR法檢測各組成纖維細胞的Caveolin-1 m RNA水平
3.3 流式細胞技術(shù)檢測各組肺成纖維細胞的周期
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
綜述
參考文獻
攻讀學位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷
本文編號:3859769
【文章頁數(shù)】:75 頁
【學位級別】:博士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮略語
第一部分 暴露高氧后新生鼠肺組織Caveolin-1 表達及其作用的研究
1 前言
2 實驗材料與方法
2.1 材料
2.1.1 實驗動物
2.1.2 主要試劑
2.1.3 主要儀器
2.2 方法
2.2.1 實驗對象、分組及BPD大鼠動物模型的建立
2.2.2 標本的采集和處理
2.2.3 免疫組化技術(shù)檢測各組肺組織caveolin-1 表達
2.2.4 Western blot法檢測各組肺組織caveolin-1 動態(tài)表達
2.2.5 Real-time PCR法檢測各組肺組織caveolin-1 m RNA的動態(tài)表達
2.3 統(tǒng)計學分析
3 結(jié)果
3.1 肺組織的形態(tài)學改變
3.2 肺組織纖維化評分
3.3 caveolin-1 在空氣組和高氧組不同日齡大鼠肺組織的動態(tài)表達
3.3.1 免疫組織化學染色方法觀察caveolin-1 在各組不同日齡大鼠肺組織的動態(tài)表達
4 討論
5 結(jié)論
第二部分 暴露高氧后新生鼠肺成纖維細胞Caveolin-1 表達及其對細胞周期的影響
1 前言
2 實驗材料與方法
2.1 材料
2.1.1 實驗動物同論文一
2.1.2 實驗試劑
2.1.3 實驗儀器
2.2 方法
2.2.1 實驗對象、分組及BPD模型的建立同論文一
2.2.2 體外肺成纖維細胞的分離、培養(yǎng)及鑒定
2.2.3 Western blot法檢測各組肺成纖維細胞caveolin-1 動態(tài)表達
2.2.4 流式細胞技術(shù)檢測各組肺成纖維細胞的周期
2.3 統(tǒng)計學分析
3 結(jié)果
3.1 原代培養(yǎng)大鼠肺成纖維細胞形態(tài)及鑒定結(jié)果
3.2 Western blot方法檢測caveolin-1 在肺成纖維細胞動態(tài)表達
3.3 空氣和高氧各組LF細胞周期的變化
4 討論
5 結(jié)論
第三部分 干預TGF-β/SMAD信號轉(zhuǎn)導通路后caveolin-1 的動態(tài)表達
1 前言
2 材料和方法
2.1 材料
2.1.1 實驗動物
2.1.2 實驗試劑
2.1.3 實驗儀器
2.2 方法
2.2.1 研究對象
2.2.2 細胞分組
2.2.3 Western blot法檢測各組成纖維細胞Caveolin-1 的表達
2.2.4 Real-time PCR法檢測各組成纖維細胞的Caveolin-1 m RNA水平同論文一。
2.2.5 流式細胞技術(shù)檢測各組肺成纖維細胞的周期
2.3 統(tǒng)計學分析
3 結(jié)果
3.1 Western blot法檢測Caveolin-1 在各組成纖維細胞中的表達
3.2 Real-time PCR法檢測各組成纖維細胞的Caveolin-1 m RNA水平
3.3 流式細胞技術(shù)檢測各組肺成纖維細胞的周期
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
綜述
參考文獻
攻讀學位期間取得的研究成果
致謝
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本文編號:3859769
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