實(shí)驗(yàn)背景氣道上皮是呼吸系統(tǒng)對抗有害刺激的第一道防線,各種病原微生物在機(jī)體抵抗力低下時(shí)均可引起肺部感染性疾病。其中以革蘭陰性菌細(xì)胞壁的主要成分脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）為主要致病因素,不僅引起肺部炎癥反應(yīng),還可使原有肺部疾病發(fā)展和加重。氣道上皮在致病因素的攻擊下受到損傷,隨后啟動(dòng)自身修復(fù)機(jī)制。LPS致氣道上皮細(xì)胞損傷后,可促使細(xì)胞發(fā)生壞死、凋亡和分泌前炎癥因子等反應(yīng),這些反應(yīng)共同推動(dòng)肺損傷的發(fā)展過程。大量研究證明,核因子-κB （nuclear factor, NF-κB）信號(hào)途徑參與調(diào)節(jié)細(xì)胞生長、分化、增殖、存活、凋亡及炎癥反應(yīng)過程中多種基因的轉(zhuǎn)錄,與LPS引起的肺損傷密切相關(guān)。然而,LPS導(dǎo)致肺部炎癥反應(yīng)的分子機(jī)制還遠(yuǎn)未闡明。NF-κB在正常情況下與其抑制蛋白ⅠκB結(jié)合以無活性的形式存在于靜息細(xì)胞胞漿中。外界刺激可引起ⅠκB被迅速磷酸化、泛素化而降解,從而釋放NF-κB活性亞單位轉(zhuǎn)位入核,激活下游靶基因轉(zhuǎn)錄。P120-catenin（p120）是連環(huán)素家族成員,可在細(xì)胞膜上與上皮鈣粘蛋白（E-Cadherin, E-Cad）相互結(jié)合而調(diào)節(jié)細(xì)胞粘附。近年來... 

【文章來源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：97 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

LPS抑制氣道上皮細(xì)胞p120的表達(dá)

并提取細(xì)胞總RNA，采用ELIsA和Real一 TimePCR，分別從蛋白和RNA水平檢測IL一8的表達(dá)變化。EUSA結(jié)果顯示，細(xì)胞經(jīng)LPS刺激后，IL一8的分泌顯著增加，并呈時(shí)間依賴性(圖1一3A)。PCR結(jié)果顯示了同樣的趨勢(圖1一3B)。..-....-.........-.......-...曰.--.~.....................-.一-.~...-...-...-.-3l

nVCU八U︵日︶ nUnUnU八 nUUCVCU︵0︸On︶02片月，自門1.︵一鋤日3側(cè)。一4。匕。。叩悶工Time(min)圖1一 ALPS誘導(dǎo)IL.8的分泌培養(yǎng)的16HBE14一細(xì)胞經(jīng)LPS處理后，在不同的時(shí)間點(diǎn)收集培養(yǎng)上清，使用ELIsA試劑盒檢測上清中IL一8的含量(見材料和方法)。顯示的數(shù)據(jù)代表重復(fù)了3次的獨(dú)立實(shí)驗(yàn)的平均值(*表示與對照組相比較，P<0.05)。︵云國召腸易︶閱之州叩日日Time(min)圖1一 BLPS促進(jìn)IL一8的轉(zhuǎn)錄培養(yǎng)的細(xì)胞經(jīng)LPS處理后，在不同的時(shí)間點(diǎn)提取總RNA，逆轉(zhuǎn)錄后應(yīng)用熒光定量PCR--.-.

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3119773