發(fā)布時間：2021-01-25 05:38

　　隨著人口老齡化的速度越來越快,我國已經(jīng)正式步入老齡社會初期。在過去的幾年中,人口老齡化已經(jīng)成為慢性非傳染性疾病最大的風(fēng)險因素,并且直接導(dǎo)致了衰老相關(guān)疾病的發(fā)病率和死亡率的不斷上升。肺屬于衰老較早的組織器官之一,一些呼吸系統(tǒng)疾病如慢性阻塞性肺�。–OPD）、肺癌、哮喘和特發(fā)性肺纖維化（IPF）的發(fā)病都可能與肺組織的衰老密切相關(guān)。在本研究中,我們以肺組織條件敲除Smad7小鼠為模型,分析了在肺組織中特異敲除Smad7對肺衰老及肺組織中具有成體干細(xì)胞特征的肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞（AECⅡ）衰老的影響。我們發(fā)現(xiàn)條件敲除Smad7小鼠肺組織中與衰老有關(guān)的標(biāo)志物β-半乳糖苷酶（SA-β-gal）陽性染色的細(xì)胞數(shù)顯著增加,肺組織細(xì)胞周期抑制蛋白p21、p16顯著升高,纖維化標(biāo)志物α-SMA（α-smooth muscle actin）以及1型膠原也顯著升高。進(jìn)一步分析表明條件敲除Smad7小鼠肺組織中AECⅡ細(xì)胞被p21、p16以及與衰老有關(guān)的異染色質(zhì)灶（SAHF）的標(biāo)志物HP1γ標(biāo)記的陽性細(xì)胞數(shù)顯著增加。這些結(jié)果提示條件敲除Smad7小鼠的肺組織以及肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞發(fā)生顯著衰老。另外我們還發(fā)現(xiàn)條件敲除S... 

【文章來源】：杭州師范大學(xué)浙江省

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖3.1條件敲除Smad7引起肺組織衰老以及形態(tài)的改變A：Smad7+/+與SPA-Cre;Smad7flox/flox小鼠肺組織冰凍切片SA-β-gal染色，藍(lán)色的細(xì)胞為SA-β-gal陽性

圖 3.2 條件敲除 Smad7 引起肺組織中衰老相關(guān)標(biāo)志物的表達(dá)顯著增加A：實(shí)時熒光定量 PCR 檢測 Smad7+/+與 SPA-Cre;Smad7flox/flox小鼠肺組織中細(xì)胞周期抑制蛋白 p21、p16 的 mRNA 表達(dá)量。B：免疫蛋白印跡檢測 Smad7+/+與SPA-Cre;Smad7flox/flox小鼠肺組織中細(xì)胞周期抑制蛋白 p21、p16 的蛋白表達(dá)量。

圖 3.3 條件敲除 Smad7 引起肺組織中肺泡 II 型上皮細(xì)胞衰老顯著增加A：Smad7+/+與 SPA-Cre;Smad7flox/flox小鼠肺組織冰凍切片 SPC 分別與 p21、p16、HP1γ免疫熒光雙標(biāo)染色的 40 倍視野代表性圖片。B：Smad7+/+與 SPA-Cre;Smad7flox/flox小鼠肺組織冰凍切片 SPC 與 p21 免疫熒光雙標(biāo)染色的 20 倍視野代表性圖片以及定量統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果。C：Smad7+/+與 SPA-Cre;Smad7flox/flox小鼠肺組織冰凍切片 SPC 與 p16 免疫熒光雙標(biāo)染色的20 倍視野代表性圖片以及定量統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果。D：Smad7+/+與 SPA-Cre;Smad7flox/flox小鼠肺組織冰凍切片 SPC 與 HP1γ免疫熒光雙標(biāo)染色的 20 倍視野代表性圖片以及定量統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果。E：實(shí)時熒光定量 PCR 檢測 Smad7+/+與 SPA-Cre;Smad7flox/flox小鼠肺組織中 T1α、Ki67的 mRNA 表達(dá)量。


本文編號：2998678