第一部分:慢阻肺患者血清對PM2.5致MH-S細胞炎癥的影響目的:以MH-S細胞建立模型,以慢阻肺患者血清與PM2.5刺激MH-S細胞,模擬霧霾情況下慢阻肺患者氣道炎癥環(huán)境,觀察MH-S細胞HDAC2活性及IL-17的變化。方法:用不同濃度的慢阻肺患者及健康人血清刺激MH-S細胞,最終確定血清刺激濃度為1%、時間6h。用血清及PM2.5刺激巨噬細胞,分為:對照組、PM2.5組、慢阻肺患者血清組、健康人血清組、PM2.5+慢阻肺病人血清組、PM2.5+健康人血清組。酶聯(lián)免疫吸附(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法檢測細胞上清液中IL-17濃度、活性比色法定量測定試劑盒檢測細胞HDAC2活性。Pearson相關分析IL-17與HDAC2活性之間有無相關性。結果:PM2.5、血清單純刺激MH-S細胞后,較空白對照組細胞HDAC2活性降低,IL-17分泌增加,且加入慢阻肺患者血清組較加入健康志愿者血清組IL-17升高,MH-S細胞HDAC2活性降低更明顯,兩組之間差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。同時加入血清和PM2.5組,MH-S細胞HDAC2活性降低、IL-17分泌增多更明顯,與單純加入PM2.5組、單純加入血清組相比,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。慢阻肺患者血清與PM2.5共同刺激組較健康志愿者血清與PM2.5共同刺激組IL-17升高、HDAC2活性降低明顯,且差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。IL-17與HDAC2之間存在負相關(r=-0.786,P0.01)。結論:單純PM2.5、血清會導致MH-S細胞IL-17分泌增多、HDAC2活性降低。血清會加重PM2.5對MH-S細胞的影響。慢阻肺患者血清與PM2.5共同刺激對MH-S細胞的影響較健康人血清與PM2.5更明顯。HDAC2活性與IL-17呈負相關。第二部分:Salubrinal在PM2.5致MH-S細胞炎癥中的作用目的:在前期研究基礎上進一步以MH-S細胞為研究對象,應用salubrinal干預PM2.5刺激的MH-S,探討salubrinal在PM2.5誘導的炎癥細胞損傷中的作用。方法:本實驗分為3組:(1)對照組:不給于刺激;(2)PM2.5組:培養(yǎng)基中加入PM2.5,使其終濃度為100ug/ml,刺激12小時;(3)PM2.5+salubrinal組:培養(yǎng)基中同時加入salubrina(lsalubrinal提前1小時加入30uMol)和PM2.5,刺激12小時。免疫熒光觀測MH-S的CHOP、GRP78表達,ELISA測IL-17,活性比色法測HDAC2。結果:PM2.5刺激12小時后細胞較空白對照組CHOP熒光增強、核內(nèi)居多,GRP78熒光增強、胞質(zhì)明顯,IL-17含量增加、HDAC2活性降低,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。加入Salubrinal干預后CHOP熒光較PM2.5組減弱、GRP78熒光較PM2.5組增強、IL-17含量降低、HDAC2活性增加。差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論:PM2.5刺激使CHOP、GRP78表達增多,激活MH-S細胞ERS。Salibrinal抑制MH-S細胞CHOP的表達,增強GRP78的表達。Salubrinal減輕了PM2.5對MH-S細胞的損傷作用。
【學位單位】：河北醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2019
【中圖分類】：R563.9
【部分圖文】：

慢阻肺患者血清與PM2.5對MH-S細胞分泌IL-17的影響

慢阻肺患者血清與PM2.5對MH-S細胞HDAC2活性的影響

salubrinal對PM2.5刺激的MH-S細胞分泌IL-17的影響
【參考文獻】

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1 楊媛媛;劉輝國;;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激及其與呼吸系統(tǒng)疾病的關系[J];中華哮喘雜志(電子版);2013年04期

本文編號：2850750