本論文對(duì)杭州地區(qū)社區(qū)獲得性肺炎(Community-acquired Pneumonia，CAP)三種主要致病菌(肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌、卡他莫拉菌)的耐藥性檢測及肺炎鏈球菌對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類抗生素耐藥機(jī)制作了初步研究。收集2002年10月至2003年03月杭州地區(qū)六所醫(yī)院(浙醫(yī)一院、浙醫(yī)二院、浙醫(yī)兒院、市一醫(yī)院、邵逸夫醫(yī)院、浙江省人民醫(yī)院)住院、門診診斷為CAP患者臨床分離的肺炎鏈球菌68株、流感嗜血桿菌64株、卡他莫拉菌28株。根據(jù)美國國家臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)(the National Committee for Clinical Laboratory Standards，NCCLS，2003)制定標(biāo)準(zhǔn)，采用瓊脂稀釋法及Etest方法測定三種細(xì)菌對(duì)常用抗菌藥物的敏感性，并用煮沸法提取肺炎鏈球菌基因組DNA，通過聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase Chain Reaction，PCR)擴(kuò)增耐藥基因ermB和mefA，PCR產(chǎn)物克隆并測序。結(jié)果：68株肺炎鏈球菌僅1株對(duì)青霉素高度耐藥，但中介(低度耐藥)率達(dá)61.8％(42／68)，頭孢克洛耐藥率為54.4％(37／68)，對(duì)紅霉素和阿奇霉素表現(xiàn)出較高的耐藥率，均為86.8％(59／68)，其中89.8％(53／59)為高度耐藥(MIC≥64 μg／ml)，對(duì)頭孢噻肟敏感率為85.3％(58／68)，對(duì)頭孢曲松、左氧氟沙星敏感率分別為94.1％(64／68)和97.1％(66／68)，對(duì)阿莫西林／克拉維酸、利福平、萬占霉素和替考拉寧敏感率均為100％。流感嗜血桿菌β-內(nèi)酰胺酶陽性率為7.8％(5／64)，對(duì)氨芐西林耐藥率7.8％(5／64)，對(duì)阿齊霉素耐藥率3.1％(2／64)，對(duì)阿莫西林／克拉維酸、頭孢克洛、頭孢曲松及左氧氟沙星均100％敏感。92.9％(26／28)的卡他莫拉菌產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶，對(duì)氨芐西林MIC_(50)和MIC_(90)分別為0.5和2，對(duì)所測的其他β-內(nèi)酰胺類、氟喹諾酮類抗菌藥物和阿齊霉素均100％敏感。68株肺炎鏈球菌對(duì)紅霉素和阿奇霉素表現(xiàn)高度耐約。ermB基因檢出率70.6％(48／68)、mefA基因檢出率25.0％(17／68)；攜帶ermB基因耐藥表型率93.8％(45／48)，單獨(dú)攜帶mefA基因的耐藥表型率100％(3／3)，同時(shí)攜帶ermB基因和mefA基因的14株肺炎鏈球菌均表現(xiàn)為對(duì)紅霉素和阿奇霉素的高度耐藥(MI≥64μg／ml)，11株耐藥株未檢測到ermB和mefA基因。將肺炎鏈球菌ermB和mefA基因的PCR產(chǎn)物克隆，酶切鑒定陽性的克隆菌測序，所測ermB和mefA基因序列與基因庫收錄序列高度一致。結(jié)論：(1)杭州地區(qū)分離的肺炎鏈球菌對(duì)青霉素高度耐藥率低，中介(低度耐藥)較高，有發(fā)展成高度耐藥株的趨勢，對(duì)頭孢克洛耐藥率較高，對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類抗生素耐藥非常普遍，且多為高度耐藥，對(duì)含酶抑制劑的復(fù)合抗 生素、第三代頭抱菌素、氟喳諾酮類、利福平、萬古霉素及替考拉寧敏感性好。(2)產(chǎn)p- 內(nèi)酞胺酶的流感嗜血桿菌發(fā)生率低，但卡他莫拉菌的產(chǎn)酶率達(dá)92.9%，除對(duì)氨節(jié)西林有一 定的耐藥性外，對(duì)含酶抑制劑的復(fù)合抗生素、第二、第三代頭抱菌素、氟哇諾酮類和阿 齊霉素均高度敏感。(3)杭州地區(qū)肺炎鏈球菌菌株中存在ernZB、。efrt基因，二者單獨(dú)或 共同表達(dá)均可致肺炎鏈球菌對(duì)大環(huán)內(nèi)酷類抗生素耐藥，另外，同時(shí)亦存在非ermB、mefA 基因所致的肺炎鏈球菌對(duì)大環(huán)內(nèi)酷類抗生素耐藥，本地區(qū)肺炎鏈球菌對(duì)大環(huán)內(nèi)酷類抗生 素耐藥主要由er川B基因介導(dǎo)。
【學(xué)位單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2004
【中圖分類】：R563.1
【文章目錄】：
致謝
縮略語
技術(shù)路線示意圖
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 杭州地區(qū)社區(qū)獲得性肺炎主要細(xì)菌耐藥性監(jiān)測
    1 材料和方法
        1.1 受試菌株來源
        1.2 主要材料
        1.3 主要儀器
        1.4 方法
    2 結(jié)果
        2.1 肺炎鏈球菌對(duì)常用抗生素的敏感性
        2.2 流感嗜血桿菌對(duì)常用抗生素的敏感性
        2.3 卡他莫拉菌對(duì)常用抗生素的敏感性
    3 討論
    4 結(jié)論
第二部分 肺炎鏈球菌對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類抗生素耐藥機(jī)制
    1 材料和方法
        1.1 受試菌來源和藥敏資料
        1.2 主要材料
        1.3 主要儀器
        1.4 主要方法
    2 結(jié)果
        2.1 耐藥基因ermB和mefA的PCR檢測結(jié)果
        2.2 肺炎鏈球菌對(duì)紅霉素藥敏與ermB、mefA的檢出情況
        2.3 PCR產(chǎn)物克隆測序結(jié)果
    3 討論
    4 結(jié)論
第三部分 文獻(xiàn)綜述
    1 社區(qū)獲得性肺炎病原種類及病原體構(gòu)成譜的變化
        1.1 CAP最常見的病原體是肺炎鏈球菌
        1.2 非典型病原體的重要性
        1.3 影響CAP病原體構(gòu)成譜調(diào)查結(jié)果的因素
    2 社區(qū)獲得性肺炎主要細(xì)菌耐藥性現(xiàn)狀
        2.1 肺炎鏈球菌耐藥性現(xiàn)狀
        2.2 流感嗜血桿菌耐藥性現(xiàn)狀
        2.3 卡他莫拉菌耐藥性現(xiàn)狀
    3 社區(qū)獲得性肺炎主要細(xì)菌耐藥機(jī)制
        3.1 肺炎鏈球菌耐藥機(jī)制
        3.2 流感嗜血桿菌和卡他莫拉菌的耐藥機(jī)制
參考文獻(xiàn)

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