發(fā)布時(shí)間：2020-10-12 04:06

　　 背景：細(xì)胞間粘附分子-1(ICAM-1)通過與其配體-β2整合素的結(jié)合介導(dǎo)炎癥細(xì)胞向炎癥部位遷移以及介導(dǎo)炎癥細(xì)胞和靶細(xì)胞之間的相互作用,在炎癥過程中起到重要作用。近年來有大量研究表明ICAM-1常見的K469E基因多態(tài)性與眾多疾病相關(guān),其中包括支氣管哮喘。并有研究表明其可能對(duì)ICAM-1表達(dá)產(chǎn)生影響,可能是與多種疾病相關(guān)的機(jī)制之一。慢性阻塞性肺病(COPD)與哮喘有部分相似的特點(diǎn),因此,K469E基因多態(tài)性可能也與COPD存在相關(guān)性。 目的：通過對(duì)主要來自湖南的我國(guó)中南地區(qū)漢族人群的慢性阻塞性肺疾病患者和正常對(duì)照者中ICAM-1基因外顯子6的K469E基因多態(tài)性的分布頻率和血清sICAM-1水平的檢測(cè),研究該基因多態(tài)性是否與我國(guó)漢族人群的COPD相關(guān)以及是否影響ICAM-1的表達(dá),并探討二者之間的可能關(guān)系。 方法：采取病例對(duì)照的研究方法,收集相互無親緣關(guān)系的慢性阻塞性肺疾病患者及健康對(duì)照者的空腹血液標(biāo)本,從外周血白細(xì)胞中獲得基因組DNA,同時(shí)提取外周血清標(biāo)本備用。利用PCR方法擴(kuò)增包含ICAM-1第6外顯子編碼469氨基酸位點(diǎn)的堿基序列片段,瓊脂糖電泳確定擴(kuò)增產(chǎn)物,通過對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物的堿基測(cè)序確定基因型。隨機(jī)抽取部分確定了基因型的COPD患者和正常對(duì)照者的外周血清,以雙夾心抗體法(ELISA)檢測(cè)血清可溶性細(xì)胞間粘附分子(sICAM-1)水平。 結(jié)果：共91例COPD患者、80例正常對(duì)照者完成了基因型的鑒定,隨機(jī)抽取了60例COPD、26例正常對(duì)照共86例進(jìn)行了血清sICAM-1的檢測(cè)。COPD患者的K、E等位基因以及KK、KE、EE三種基因型分布頻率與正常對(duì)照組比較沒有顯著性差異,但在極重度的COPD患者中,KE+EE基因型和E等位基因頻率較非極嚴(yán)重度的患者增高。病例組的血清sICAM-1水平較對(duì)照組增高。在不同嚴(yán)重程度的COPD患者以及正常對(duì)照人群中,KK與KE+EE基因型的sICAM-1水平比較均未有見到明顯差異。 結(jié)論：ICAM-1基因K469E多態(tài)性與本研究中人群慢性阻塞性肺病的發(fā)病沒有明顯相關(guān)關(guān)系,但攜帶E等位基因可能是慢性阻塞性肺疾病病情嚴(yán)重程度的危險(xiǎn)因素。K469E多態(tài)性對(duì)本研究中的COPD患者和正常人群的ICAM-1表達(dá)均沒有明顯影響。
【學(xué)位單位】：中南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2010
【中圖分類】：R563.8
【部分圖文】：

上游引物:5’一GGAACCCATTGCCCGAGC一3’下游引物:5’一GGTGAGGATTGCATTAGGTC一3’擴(kuò)增的堿基序列見圖2一1。Ir二。seq:e:eel妞陰皿.j一 1.11，SNP!rs54，Sl.lle母epos=3011.。，。ILe一，60llt〕xi.l=，60‘l，一peld牛11.llele卜’A硯玉飛l一。I=呀玉e:0一，CCTG幾山GGTCC山TCGTCTTTTGGCC‘G山已山CC山T乙?guī)譍GTCTTCC幾G二T(;G幽TTCCC自G(二山T山血五以;山TCG

圖3一4EE基因型(CG)測(cè)序圖(箭頭標(biāo)記處為多態(tài)位點(diǎn))3.2遺傳平衡性檢驗(yàn)根據(jù)Hardy-Weinberg遺傳平衡定律，對(duì)病例組和對(duì)照組人群ICAM一1各基因型頻率進(jìn)行檢驗(yàn)。將實(shí)際檢測(cè)到的K、E等位基因頻率代入公式(P=PZ，H=ZPQ，Q=QZ)計(jì)算各基因型平衡頻率，然后乘以總?cè)藬?shù)，得到期望值，將測(cè)量值和期望值行x2檢驗(yàn)。病例組的KK、KE、EE測(cè)量值分別為55.0、30.0和6.0，期望值為54.0、32.2和4.9(獷=0.165，P>0.05)。對(duì)照組從、既、EE測(cè)量值分別為52.0，21.0和7.0，期望值為45.7、27.5和3.9(才=1.901，P>0.05)，總體從、跳、EE測(cè)量值分別為107、51、13，期望值為104.0、55.7、5.3，(才=1.5一5，P>0.05)，結(jié)果均符合Hard夢(mèng)Weinberg遺傳平衡定律，說明研究對(duì)象具有群體代表性，見表3一2。

100甲i:o人 CGGG八 GGTC人 CCCGC再人GCTG人CCGTG人人TGTCCTCTGTG八G圖3一3KE基因型(AG)測(cè)序圖(箭頭標(biāo)記處為多態(tài)位點(diǎn))100甲110圖3一 4EE基因型(CG)測(cè)序圖(箭頭標(biāo)記處為多態(tài)位點(diǎn))3.2遺傳平衡性檢驗(yàn)根據(jù)Hardy-Weinberg遺傳平衡定律，對(duì)病例組和對(duì)照組人群ICAM一1各基因型頻率進(jìn)行檢驗(yàn)。將實(shí)際檢測(cè)到的K、E等位基因頻率代入公式(P=PZ，H=ZPQ，Q=QZ)計(jì)算各基因型平衡頻率，然后乘以總?cè)藬?shù)，得到期望值，將測(cè)量值和期望值行x2檢驗(yàn)。病例組的KK、KE、EE測(cè)量值分別為55.0、30.0和6.0，期望值為54.0、32.2和4.9(獷=0.165，P>0.05)。對(duì)照組從、既、 EE測(cè)量值分別為52.0，21.0和7.0
【參考文獻(xiàn)】

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1 韋葉生,趙邦,唐任光,蒙蘭青;廣西壯族人群ICAM-1基因多態(tài)性及血清水平與腦梗死關(guān)系的研究[J];現(xiàn)代免疫學(xué);2005年01期

2 嚴(yán)敏嬋;朱敏;戴美珍;張曉雪;;細(xì)胞間黏附分子-1基因C469T多態(tài)性與復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的關(guān)系[J];中國(guó)預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2010年04期

3 ;慢性阻塞性肺疾病診治指南(2007年修訂版)[J];中華內(nèi)科雜志;2007年03期

本文編號(hào)：2837614