目的探討經(jīng)腹腔注射香煙提取物(cigarette smoke extract, CSE)建立肺氣腫小鼠模型,并評(píng)價(jià)模型的病理改變,肺功能,細(xì)胞凋亡,蛋白酶表達(dá),抗氧化能力。 方法21只SPF級(jí)BALB/C小鼠隨機(jī)分為PBS組(n=7)和CSE組(n=14),制備香煙提取物。兩組分別在0,11,22天經(jīng)腹腔注射0.3mlPBS或CSE,第28天處理兩組小鼠,收集標(biāo)本。 PLY3211小動(dòng)物肺功能檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行小鼠肺功能檢查；采用靜脈留置針行灌洗術(shù)留取支氣管肺泡灌洗液(BALF),并用終點(diǎn)比色法檢測(cè)BALF總抗氧化能力(T-AOC);肺組織病理切片蘇木素-伊紅(HE)染色后觀察形態(tài)學(xué)改變并定量測(cè)定肺泡平均截距(MLI),肺泡破壞指數(shù)(DI)和平均肺泡隔厚度(MAST);末端轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記技術(shù)(TUNEL法)測(cè)定肺組織細(xì)胞凋亡指數(shù)(AI)；免疫組織化學(xué)法測(cè)定肺組織MMP-2和MMP-9表達(dá)。 結(jié)果 (1)與PBS組比較,CSE組小鼠動(dòng)態(tài)肺順應(yīng)性減低(p0.05),氣道阻力升高(p0.05)。 (2)病理學(xué)觀察示：CSE組小鼠肺組織肺泡腔擴(kuò)大、部分肺泡間隔斷裂、肺氣腫形成,氣道上皮排列紊亂、部分氣道上皮增生、周圍炎癥細(xì)胞浸潤并伴有平滑肌增生。部分小血管管腔狹窄,甚至閉鎖,血管壁增厚,平滑肌增殖。病理形態(tài)學(xué)定量分析顯示：與PBS組比較,CSE組小鼠肺泡平均截距及肺泡破壞指數(shù)增高(均p0.05),、平均肺泡隔厚度減少(p0.05)。 (3)與PBS組比較,CSE組小鼠肺組織細(xì)胞凋亡率升高(p0.05)。 (4)與PBS組比較,CSE組小鼠肺組織MMP-2及MMP-9表達(dá)增高(p0.05)。 (5)與PBS組比較,CSE組小鼠支氣管肺泡灌洗液抗氧化能力減低(p0.05)。 結(jié)論經(jīng)腹腔注射CSE可以建立肺氣腫小鼠模型,該模型穩(wěn)定可靠,與人類慢性阻塞性肺疾病高度相似。 目的探討內(nèi)皮特異性分子-1(Endothelial cell specific molecule-1, ESM-1)在經(jīng)腹腔注射香煙提取物所致慢性阻塞性肺疾病小鼠中的變化情況,了解其與肺組織結(jié)構(gòu)細(xì)胞凋亡的相關(guān)性。 方法21只6周雄性SPF級(jí)BALB/C小鼠隨機(jī)分為2組：PBS組,CSE組。PBS組7只,CSE組14只。分別在0,11,22天經(jīng)腹腔注射PBS/CSE,第28天處死小鼠。留取肺組織,凍存在—86℃冰箱中,提取組織蛋白,采用Western Blotting法檢測(cè)肺組織ESM-1的表達(dá)。肺組織包埋切片,用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)肺組織ESM—1原位表達(dá)情況。用ELISA法測(cè)定小鼠血清ESM-1濃度。 結(jié)果 (1)與PBS組比較,CSE組小鼠肺組織ESM-1表達(dá)(Western Blotting)降低(p0.05)。 (2)與PBS組比較,CSE組小鼠肺組織ESM-1表達(dá)(免疫組織化學(xué)法)降低(p0.05)。 (3)與PBS組比較,CSE組小鼠血清ESM-1濃度降低(p0.05)。 (4)肺組織細(xì)胞凋亡指數(shù)(AI)與肺組織ESM-1表達(dá)(Western Blotting法) (r=-0.998,p0.001)呈負(fù)相關(guān),與血清ESM-1濃度呈負(fù)相關(guān)(r=-0.774,p0.05)。 結(jié)論本研究證明了肺氣腫小鼠肺組織ESM-1的表達(dá)以及血清濃度降低,且與AI呈負(fù)相關(guān)。ESM-1可能參與了COPD細(xì)胞凋亡/修復(fù)失衡機(jī)制。 目的探討內(nèi)皮特異性分子-1(Endothelial cell specific molecule-1, ESM-1)在慢性阻塞性肺疾病(Chronic obstructive pulmonary disease, COPD)患者體內(nèi)的變化情況,了解其與肺組織結(jié)構(gòu)細(xì)胞凋亡及肺功能的相關(guān)性。 方法收集COPD患者及正常人的肺組織、血清。肺組織分組：A組：非吸煙(?)COPD者；B組：吸煙并COPD組(穩(wěn)定期輕度)；C組：吸煙并COPD患者(穩(wěn)定期中度)。血清分組：D組：健康不吸煙者；E組：吸煙并COPD組(穩(wěn)定期中度)；F組：吸煙并COPD患者(穩(wěn)定期重度)；G組：吸煙并COPD患者(穩(wěn)定期極重度)。肺組織病理切片蘇木素-伊紅(HE)染色后觀察形態(tài)學(xué)改變并定量測(cè)定肺泡平均截距(MLI),肺泡破壞指數(shù)(DI)和平均肺泡隔厚度(MAST);末端轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記技術(shù)(TUNEL法)測(cè)定肺組織細(xì)胞凋亡指數(shù)(AI)；免疫組織化學(xué)法檢測(cè)肺組織ESM-1原位表達(dá)情況。ELISA法測(cè)定人血清ESM-1濃度。 結(jié)果 (1)病理學(xué)觀察示：B組及C組人肺組織肺泡腔擴(kuò)大、部分肺泡間隔斷裂、肺氣腫形成,氣道上皮排列紊亂、部分氣道上皮增生周圍炎癥細(xì)胞浸潤并伴有平滑肌增生。部分小血管管腔狹窄,甚至閉鎖,血管壁增厚,平滑肌增殖。 病理形態(tài)學(xué)定量分析顯示：B組及C組MLI較A組明顯增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。C組MLI較B組明顯增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。B組及C組DI較A組明顯增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。C組DI較B組明顯增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。B組及C組MAST較A組明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。C組MAST較B組明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。 (2)B組及C組凋亡細(xì)胞指數(shù)(AI)較A組明顯增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。C組AI較B組明顯增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。 (3)B組及C組ESM-1蛋白表達(dá)較A組明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。C組ESM-1蛋白表達(dá)較B組明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05) (4)E組、F組、G組血清ESM-1濃度較D組明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。F組、G組血清ESM-1濃度較E組明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。G組血清ESM-1濃度較F組明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05) (5)肺組織細(xì)胞凋亡指數(shù)(AI)與肺組織ESM-1表達(dá)(r--0.886,p0.001)呈負(fù)相關(guān) 結(jié)論本研究證明了COPD患者肺組織ESM-1的表達(dá)以及血清濃度降低,且與AI呈負(fù)相關(guān),且與肺功能相關(guān)。ESM-1可能參與了COPD細(xì)胞凋亡/修復(fù)失衡機(jī)制。
【學(xué)位單位】：中南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位年份】：2011
【中圖分類】：R563.9

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 嚴(yán)桂珍,鄭家鏗,許少峰,李奕棋,吳敏怡,王薌斌;巳申亥時(shí)辰不同療法對(duì)脾陽虛家兔免疫功能的影響[J];福建中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2000年02期

2 宋一平,崔德健,茅培英;慢性阻塞性肺病大鼠模型的建立及藥物干預(yù)的影響[J];軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院學(xué)報(bào);2001年02期

3 常福厚,劉素珍,滿達(dá),田丹萍;尼古丁,焦油半數(shù)致死量的測(cè)定[J];內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1999年03期

4 李亞光,曹柏龍,賈東巖,朱祝生,李原青;慢性阻塞性肺疾病“肺脾氣虛證”復(fù)合證型動(dòng)物模型的研究[J];內(nèi)蒙古中醫(yī)藥;2005年05期

5 張煒;畢小利;;慢性阻塞性肺病復(fù)合腎虛證大鼠模型的建立[J];實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與比較醫(yī)學(xué);2005年03期

6 項(xiàng)軼;黃紹光;萬歡英;吳華成;;吸煙者肺小氣道病理形態(tài)學(xué)半定量化標(biāo)準(zhǔn)研究及其與肺功能相關(guān)性研究[J];上海醫(yī)學(xué);2005年12期

7 黃河;湯耀卿;;內(nèi)皮祖細(xì)胞在炎癥損傷修復(fù)中的作用和機(jī)制[J];生命科學(xué);2008年02期

8 ;Damaging Effect of Cigarette Smoke Extract on PrimaryCultured Human Umbilical Vein Endothelial Cells and Its Mechanism[J];Biomedical and Environmental Sciences;2004年02期

9 楊永紅;王導(dǎo)新;;慢性阻塞性肺病患者血清TNF-α水平與肺功能的關(guān)系探討[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2010年09期

10 遲春花,何冰,湯秀英,張紅;煙草霧吸入導(dǎo)致慢阻肺機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究——大鼠Clara細(xì)胞結(jié)構(gòu)及其分泌蛋白的變化[J];心肺血管病雜志;2000年03期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 曹君;內(nèi)皮祖細(xì)胞在煙霧暴露所致慢性阻塞性肺疾病小鼠模型中的作用及機(jī)制[D];中南大學(xué);2010年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 沈芹;前列環(huán)素在慢性阻塞性肺疾病患者肺組織中的表達(dá)及其在香煙提取物誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞凋亡中的保護(hù)作用[D];中南大學(xué);2009年

本文編號(hào)：2820966