目的探討經腹腔注射香煙提取物(cigarette smoke extract, CSE)建立肺氣腫小鼠模型,并評價模型的病理改變,肺功能,細胞凋亡,蛋白酶表達,抗氧化能力。 方法21只SPF級BALB/C小鼠隨機分為PBS組(n=7)和CSE組(n=14),制備香煙提取物。兩組分別在0,11,22天經腹腔注射0.3mlPBS或CSE,第28天處理兩組小鼠,收集標本。 PLY3211小動物肺功能檢測系統(tǒng)進行小鼠肺功能檢查；采用靜脈留置針行灌洗術留取支氣管肺泡灌洗液(BALF),并用終點比色法檢測BALF總抗氧化能力(T-AOC);肺組織病理切片蘇木素-伊紅(HE)染色后觀察形態(tài)學改變并定量測定肺泡平均截距(MLI),肺泡破壞指數(shù)(DI)和平均肺泡隔厚度(MAST);末端轉移酶標記技術(TUNEL法)測定肺組織細胞凋亡指數(shù)(AI)；免疫組織化學法測定肺組織MMP-2和MMP-9表達。 結果 (1)與PBS組比較,CSE組小鼠動態(tài)肺順應性減低(p0.05),氣道阻力升高(p0.05)。 (2)病理學觀察示：CSE組小鼠肺組織肺泡腔擴大、部分肺泡間隔斷裂、肺氣腫形成,氣道上皮排列紊亂、部分氣道上皮增生、周圍炎癥細胞浸潤并伴有平滑肌增生。部分小血管管腔狹窄,甚至閉鎖,血管壁增厚,平滑肌增殖。病理形態(tài)學定量分析顯示：與PBS組比較,CSE組小鼠肺泡平均截距及肺泡破壞指數(shù)增高(均p0.05),、平均肺泡隔厚度減少(p0.05)。 (3)與PBS組比較,CSE組小鼠肺組織細胞凋亡率升高(p0.05)。 (4)與PBS組比較,CSE組小鼠肺組織MMP-2及MMP-9表達增高(p0.05)。 (5)與PBS組比較,CSE組小鼠支氣管肺泡灌洗液抗氧化能力減低(p0.05)。 結論經腹腔注射CSE可以建立肺氣腫小鼠模型,該模型穩(wěn)定可靠,與人類慢性阻塞性肺疾病高度相似。 目的探討內皮特異性分子-1(Endothelial cell specific molecule-1, ESM-1)在經腹腔注射香煙提取物所致慢性阻塞性肺疾病小鼠中的變化情況,了解其與肺組織結構細胞凋亡的相關性。 方法21只6周雄性SPF級BALB/C小鼠隨機分為2組：PBS組,CSE組。PBS組7只,CSE組14只。分別在0,11,22天經腹腔注射PBS/CSE,第28天處死小鼠。留取肺組織,凍存在—86℃冰箱中,提取組織蛋白,采用Western Blotting法檢測肺組織ESM-1的表達。肺組織包埋切片,用免疫組織化學法檢測肺組織ESM—1原位表達情況。用ELISA法測定小鼠血清ESM-1濃度。 結果 (1)與PBS組比較,CSE組小鼠肺組織ESM-1表達(Western Blotting)降低(p0.05)。 (2)與PBS組比較,CSE組小鼠肺組織ESM-1表達(免疫組織化學法)降低(p0.05)。 (3)與PBS組比較,CSE組小鼠血清ESM-1濃度降低(p0.05)。 (4)肺組織細胞凋亡指數(shù)(AI)與肺組織ESM-1表達(Western Blotting法) (r=-0.998,p0.001)呈負相關,與血清ESM-1濃度呈負相關(r=-0.774,p0.05)。 結論本研究證明了肺氣腫小鼠肺組織ESM-1的表達以及血清濃度降低,且與AI呈負相關。ESM-1可能參與了COPD細胞凋亡/修復失衡機制。 目的探討內皮特異性分子-1(Endothelial cell specific molecule-1, ESM-1)在慢性阻塞性肺疾病(Chronic obstructive pulmonary disease, COPD)患者體內的變化情況,了解其與肺組織結構細胞凋亡及肺功能的相關性。 方法收集COPD患者及正常人的肺組織、血清。肺組織分組：A組：非吸煙(?)COPD者；B組：吸煙并COPD組(穩(wěn)定期輕度)；C組：吸煙并COPD患者(穩(wěn)定期中度)。血清分組：D組：健康不吸煙者；E組：吸煙并COPD組(穩(wěn)定期中度)；F組：吸煙并COPD患者(穩(wěn)定期重度)；G組：吸煙并COPD患者(穩(wěn)定期極重度)。肺組織病理切片蘇木素-伊紅(HE)染色后觀察形態(tài)學改變并定量測定肺泡平均截距(MLI),肺泡破壞指數(shù)(DI)和平均肺泡隔厚度(MAST);末端轉移酶標記技術(TUNEL法)測定肺組織細胞凋亡指數(shù)(AI)；免疫組織化學法檢測肺組織ESM-1原位表達情況。ELISA法測定人血清ESM-1濃度。 結果 (1)病理學觀察示：B組及C組人肺組織肺泡腔擴大、部分肺泡間隔斷裂、肺氣腫形成,氣道上皮排列紊亂、部分氣道上皮增生周圍炎癥細胞浸潤并伴有平滑肌增生。部分小血管管腔狹窄,甚至閉鎖,血管壁增厚,平滑肌增殖。 病理形態(tài)學定量分析顯示：B組及C組MLI較A組明顯增高,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。C組MLI較B組明顯增高,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。B組及C組DI較A組明顯增高,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。C組DI較B組明顯增高,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。B組及C組MAST較A組明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。C組MAST較B組明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。 (2)B組及C組凋亡細胞指數(shù)(AI)較A組明顯增高,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。C組AI較B組明顯增高,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。 (3)B組及C組ESM-1蛋白表達較A組明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。C組ESM-1蛋白表達較B組明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05) (4)E組、F組、G組血清ESM-1濃度較D組明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。F組、G組血清ESM-1濃度較E組明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。G組血清ESM-1濃度較F組明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05) (5)肺組織細胞凋亡指數(shù)(AI)與肺組織ESM-1表達(r--0.886,p0.001)呈負相關 結論本研究證明了COPD患者肺組織ESM-1的表達以及血清濃度降低,且與AI呈負相關,且與肺功能相關。ESM-1可能參與了COPD細胞凋亡/修復失衡機制。
【學位單位】：中南大學
【學位級別】：博士
【學位年份】：2011
【中圖分類】：R563.9

【參考文獻】

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本文編號：2820966