【摘要】： 第一章 肺缺血再灌注后NO、NOS及Ps的變化目的：研究肺缺血再灌注后血管壁NO、血漿NO、血管內(nèi)膜上Ps表達(dá)，血漿Ps的動態(tài)變化，同時觀察肺I/R損傷。方法： 1．共分四組 A組：對照組，對動物不做任何處理，其數(shù)值作為對照，而血漿中NO、Ps、血氧分壓及濕/干重比率均取缺血前數(shù)值作對照。 B組：Sham組，術(shù)中僅行左側(cè)開胸，左肺門穿帶。 C組：I/R組，缺血60min后再根據(jù)再灌注時間不同分為5組，分別為再灌注30min、1h、3h、6h及12h。 D組：左肺I/R后右肺血管組，同樣再分5組。 2．采用大鼠單肺原位熱缺血再灌注模型。 3．Ignarro和Shechter方法測定血管壁NO和血漿NO，免疫組化染色觀察eNOS、iNOS、Ps表達(dá)強(qiáng)度，二位點酶聯(lián)免疫法測定血漿Ps。 浙江大學(xué)博士學(xué)位論文 結(jié)果： 1．左、右兩肺血管壁NO含量，eNOS、iNOS、Ps表達(dá)強(qiáng)度以及肺組織濕／干重比 率未見差異。 2．肺缺血再灌注后，血管壁NO和血漿NO含量均先下降，然后上升，至再灌注 后6h達(dá)到一高峰，12h時已經(jīng)開始下降。 3．肺缺血再灌注后，eNOS初期表達(dá)下降，隨后上升到 lh時達(dá)到高峰，隨后下降， 而iNOS在lh后才逐漸上升，6h時達(dá)到高峰，12h時仍明顯表達(dá)。 4．肺 k后，肺血管內(nèi)膜上 Ps表達(dá)很快增強(qiáng)，并維持在高水平，而血漿 Ps到 lh 時才見到升高，并逐漸增加。 5．左肺W后，右肺血管壁NO含量也可見到輕度升高，但其升高的幅度和左肺 存在顯著性差異。eNOS表達(dá)僅見到輕度增加，iNOS未見改變。 6．肺k后，肺組織濕仟重比率在再灌注后 3h開始增加，6h時達(dá)到高值，12h 又有所下降。 7．肺 k后，血氧分壓在再灌注 3h后開始下降，到 6h下降到一最低值，12h時 己經(jīng)開始好轉(zhuǎn)。 8．肺IIR后，肺組織H－E染色可見肺泡組織水腫，增厚，炎性細(xì)胞浸潤。而D組 （右肺）未見改變。 結(jié)論： 1．肺缺血再灌注后初期（＜30min），血管壁NO及血漿NO含量減少，但隨著再 灌注時間延長，NO合成逐漸增加，到 12h后開始降低。 2．肺缺血再灌注初期（＜30min），eNOS表達(dá)下降，但隨后表達(dá)逐漸增加，并維 持一較長時間，iNOS最初并不表達(dá)，到灌注后lh才表達(dá)明顯增加，并持續(xù)較長時間。 3．肺缺血再灌注后，血管壁Ps表達(dá)很快明顯增加（30min內(nèi)），并持續(xù)表達(dá)，而 血漿 Ps后才開始逐漸升高，到 6h時達(dá)到一高值，并持續(xù)保持在高水平。 4．肺缺血再灌注后肺組織結(jié)構(gòu)和功能受損表現(xiàn)為濕／干重比率上升，H．E染色示肺 泡間質(zhì)水腫，增厚，并有中性粒細(xì)胞浸潤，血氧分壓下降。 一2一 浙江大學(xué)博士學(xué)位論文 5．一側(cè)肺缺血再灌注后對對側(cè)肺可造成一定影響，但尚未造成對側(cè)肺組織學(xué)上變 化和氧合功能受損。 第二章 L飛 r g、L－NAME在肺缺血再灌注損傷中的作用 目的：探討L－出g、L－NAME預(yù)處理對肺缺血再灌注損傷的影響。 方法： 1．實驗分組：依隨機(jī)原則分成四組 A組：小劑量卜y處理組（Lmp組），n＝30，此組在缺血再灌注前給予100mg／kg Lny（靜脈推注），又分成凡。、R；、R3、u、R1。5組。 B組：大劑量卜山g處理組（L－y 11組），n—30，此組在缺血再灌注前靜脈推注 100lllg／k L－用g后，靜脈持續(xù)輸注卜創(chuàng)g （10mg／k．min），又分成 Ro。、R；、R3、R6、 R12 5組。 C組：小劑量L－NAME處理組（LNAME組），n＝30，此組在I／R前靜脈推注 10 1tiM LNAME，又分成 u。、R；、R3、R6、R；。5組。 D組：大劑量 LMME處理組（LJqAME 11組），n＝30，此組在 k前靜脈推注 100 mM LMME，又分成 Ro。、RI、R3、R6、R12 5組。 2．實驗中分別在缺血前給予不同的劑量卜p和LNAME預(yù)處理，余步驟同W 組，血管壁NO、PS和血漿中NO、PS檢測及染色方法同第一章相應(yīng)部分。 結(jié)果： 1．小劑量卜印g預(yù)處理后，再灌注初期血管壁NO和血漿中NO濃度均提高，而 大劑量卜巳g同時增加再灌注晚期血管壁NO合成和血漿NO濃度。
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2002
【分類號】：R655.3

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