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實(shí)驗(yàn)性氣道高反應(yīng)動(dòng)物模型肺內(nèi)神經(jīng)肽及其受體時(shí)空分布

發(fā)布時(shí)間:2020-08-12 19:05
【摘要】: 第一部分 氣道高反應(yīng)性動(dòng)物模型的建立及檢測(cè) 目的:基于氣道上皮穩(wěn)態(tài)假說,通過臭氧應(yīng)激損傷氣道上皮細(xì)胞,建立新型氣道高反應(yīng)性動(dòng)物模型。 方法:12只新西蘭兔隨機(jī)分為兩組,(1)臭氧攻擊組:將動(dòng)物暴露于2.0ppm臭氧中攻擊3天,每天1小時(shí)。(2)正常對(duì)照組。末次攻擊后12小時(shí)用乙酰甲膽堿霧化吸入激發(fā)氣道反應(yīng),RM-6240C生物信號(hào)采集系統(tǒng)實(shí)時(shí)、動(dòng)態(tài)觀測(cè)跨肺壓和氣流量,計(jì)算氣道阻力,收集肺泡灌洗液進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)、分類,總蛋白,IL-1含量測(cè)定及肺組織病理切片,以證實(shí)氣道高反應(yīng)性的存在。 結(jié)果:①臭氧應(yīng)激組動(dòng)物激發(fā)后,氣道阻力增加,呼氣阻力增加程度更明顯。②肺泡灌洗液中總蛋白、IL-1含量升高,細(xì)胞總數(shù)及各細(xì)胞分類均高于正常對(duì)照組。③肺組織病理切片可見臭氧應(yīng)激組動(dòng)物支氣管腔狹窄,氣道上皮脫落,肺泡、肺間質(zhì)中大量炎細(xì)胞浸潤(rùn)。 第二部分 降鈣素基因相關(guān)肽及其受體在氣道高反應(yīng)性形成中的時(shí)空分布 目的:探討降鈣素基因相關(guān)肽在氣道高反應(yīng)性形成中的作用。 方法:將25只新西蘭兔隨機(jī)分為五組,分別臭氧攻擊0、1、2、4、8天,每天1h,采用放射免疫法檢測(cè)肺組織勻漿中CGRP含量,RT-PCR測(cè)定肺內(nèi)CGRPRlmRNA表達(dá)改變,原位雜交法觀察CGRPRl mRNA陽(yáng)性細(xì)胞肺內(nèi)分布。 結(jié)果:①放射免疫結(jié)果顯示,臭氧應(yīng)激使肺組織勻漿中CGRP濃度24h內(nèi)迅速升高,并于應(yīng)激第二天達(dá)到峰值,之后緩慢下降,應(yīng)激第八天降至正常水平;②RT-PCR結(jié)果顯示,隨應(yīng)激時(shí)間的延長(zhǎng),肺內(nèi)CGRPRl mRNA表達(dá)逐漸增強(qiáng),于應(yīng)激第4天達(dá)到峰值,之后逐漸下降,應(yīng)激第八天降至正常水平;③原位雜交結(jié)果顯示,臭氧應(yīng)激0天組陽(yáng)性反應(yīng)細(xì)胞主要均勻分布于肺間質(zhì)、支氣管上皮細(xì)胞,血管及支氣管平滑 碩士學(xué)位論文 摘 要 肌亦有少量表達(dá)。隨應(yīng)激時(shí)間的延長(zhǎng),鏡下可見陽(yáng)性反應(yīng)細(xì)胞分布不 均,多呈散在的片裝或灶狀集中于氣管、血管周圍。臭氧應(yīng)激第八天, 肺組織表達(dá)CGRPRI mRNA陽(yáng)性細(xì)胞明顯減少。 第三部分 血管活性腸肚及其受體在氣道高反應(yīng)性 形成中的時(shí)空分布 目的:探討血管活性腸肽在氣道高反應(yīng)性形成過程中的作用。 方法:25只新西蘭兔隨機(jī)分為五組,分別臭氧攻擊0、1、2、4、S 天,每天1小時(shí)。采用放射免疫法檢測(cè)肺組織勻漿中VIP含量,RT干CR 測(cè)定肺內(nèi)VIPRlmRNA表達(dá)改變,原位雜交法觀察VIPRI m刪陽(yáng)性細(xì) 胞肺內(nèi)分布。 結(jié)果:①臭氧應(yīng)激第一天肺組織勻漿中VIP濃度未見明顯改變,隨應(yīng) 激時(shí)間延長(zhǎng),VIP濃度逐漸增高,于第四天達(dá)最高值,四天后開始下 降,第八天降至正常水平;②與肺組織勻漿中UP含量變化相似, VIPRI mRNA表達(dá)經(jīng)歷了先增加后降低的雙向過程,隨應(yīng)激時(shí)間的延 長(zhǎng),表達(dá)逐漸增強(qiáng),應(yīng)激2~4天表達(dá)達(dá)到峰值,之后逐漸下降,應(yīng) 激第八天降至正常水平;③臭氧應(yīng)激0天組動(dòng)物肺間質(zhì)、支氣管上皮 細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞均有VIPRI mRNA表達(dá),分布均勻。 臭氧應(yīng)激第一天,肺內(nèi)染色陽(yáng)性細(xì)胞分布未見明顯改變,應(yīng)激2~4 天,陽(yáng)性細(xì)胞分布不均,呈斑片狀集中于氣管、血管周圍,染色強(qiáng)度 增加,肺泡腔內(nèi)亦可見陽(yáng)性染色細(xì)胞,至臭氧應(yīng)激第八天,陽(yáng)性染色 細(xì)胞減少。
【學(xué)位授予單位】:中南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2003
【分類號(hào)】:R56

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 秦曉群,孫秀泓,羅自強(qiáng);血管活性腸肽、表皮生長(zhǎng)因子上調(diào)支氣管上皮細(xì)胞bcl-2基因表達(dá)[J];生理學(xué)報(bào);1999年04期

2 譚宇蓉,秦曉群,管茶香,張長(zhǎng)青;肺內(nèi)調(diào)節(jié)肽對(duì)兔支氣管上皮細(xì)胞與嗜酸性粒細(xì)胞粘附功能的影響及機(jī)制探討[J];生理學(xué)報(bào);2002年01期

3 譚宇蓉,秦曉群,管茶香,張長(zhǎng)青,向陽(yáng),任雁宏;肺內(nèi)調(diào)節(jié)肽對(duì)兔支氣管上皮細(xì)胞分泌白介素的影響[J];生理學(xué)報(bào);2002年02期



本文編號(hào):2790902

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