【摘要】：目的:探討不同濃度組胺(Hist)對哮喘大鼠氣道平滑肌細胞增殖的影響,及Hist對大鼠氣道平滑肌細胞ERK mRNA、CyclinD1 mRNA表達的影響。 方法: 第一部分:卵蛋白霧化致敏4周,建立哮喘大鼠模型,HE染色、圖像分析判斷是否形成氣道重構。原代培養(yǎng)正常大鼠和哮喘大鼠平滑肌細胞(airway smooth muscle cells,ASMCs),給予不同濃度的組胺(Hist)干預ASMCs生長,依處理方式不同分為5組:(1)正常對照組(2)哮喘模型組;(3) 0.1mmol/L Hist組;(4) 0.3mmol/L Hist組;(5) 0.5mmol/L Hist組。采用四甲基偶氮唑鹽(MTT)法檢測氣道平滑肌細胞(ASMCs)增殖能力,流式細胞術(FCM)測定各組大鼠ASMCs細胞周期。 第二部分:原代培養(yǎng)正常大鼠和哮喘大鼠氣道平滑肌細胞,根據(jù)第一部分確定的Hist濃度0.5mmol/L和ERK特異性抑制劑PD98059干預ASMCs生長,根據(jù)處理方式不同分別分為4組:(1)正常對照組;(2)哮喘模型組;(3)0.5mmol/L Hist組;(4)PD98059+Hist組:加入PD98059 10μmol/L培養(yǎng)1小時后,加入濃度為0.5mmol/L的Hist。采用四甲基偶氮唑鹽(MTT)法檢測氣道平滑肌細胞(ASMCs)吸光度A值,RT-PCR方法檢測ERK1/2和CyclinD1 mRNA表達水平。 結果: 第一部分: (1)肺組織HE染色、圖像分析后哮喘模型組發(fā)生氣道重構,模型復制成功。 (2)哮喘模型組、0.1mmol/L Hist組、0.3mmol/L Hist組、0.5mmol/L Hist組與正常對照組比較,吸光度A值增高(P0.01),G0/G1期細胞比例下降(P0.01),S+G2期比例升高(P0.01);隨著組胺濃度增加,吸光度A值增高,G0/G1期細胞比例下降,S+G2期比例升高,0.5mmol/L Hist為第二部分實驗干預濃度。 第二部分: (1)哮喘模型組、0.5mmol/L Hist組、PD98059+Hist組與正常對照組相比,吸光度A值增高(P0.01);PD98059+Hist組與0.5mmol/L Hist組相比,吸光度A值下降(P0.01);PD98059+ Hist組與哮喘模型組相比,吸光度A值升高(P0.05)。 (2)哮喘組、0.5mmol/L Hist組、PD98059+Hist組與正常對照組相比,ERK1/2 mRNA和CyclinD1 mRNA的表達升高(P0.05);PD98059+Hist組與0.5mmol/L Hist組相比,ERK1/2 mRNA和CyclinD1 mRNA的表達下降(P0.05);PD98059+Hist組與哮喘模型組相比,ERK1/2 mRNA和CyclinD1 mRNA的表達升高(P0.05)。ERK1/2 mRNA和CyclinD1 mRNA的表達趨勢基本一致。 結論: (1)組胺可以進一步促進哮喘大鼠氣道平滑肌細胞增殖,在一定濃度范圍內組胺對氣道平滑肌增殖的影響可能具有濃度依賴性。 (2)組胺可能通過了ERK信號通路上調CyclinD1 mRNA的表達,促進了哮喘大鼠氣道平滑肌細胞增殖。 (3)在ERK信號通路之外,組胺可能還通過其他信號通路促進氣道平滑肌細胞增殖。
【學位授予單位】：山西醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2011
【分類號】：R562.25
【圖文】：

正常對照組大鼠肺組織HE染色(100×)

哮喘模型組大鼠肺組織HE染色(100×)

大鼠氣道平滑肌細胞生長形態(tài)(100×)

【參考文獻】

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1 黃磊;冀章章;陳思;徐愛暉;;ERK信號通路在組胺誘導的大鼠氣道平滑肌細胞增殖中的調控作用[J];臨床肺科雜志;2009年02期

2 王向紅;劉聲遠;陳寶生;余上斌;葉仕喬;陳琪玲;;組胺在哮喘豚鼠氣道重塑中的作用(英文)[J];生理學報;2005年06期

3 謝敏;劉先勝;徐永健;張珍祥;白晶;倪望;陳士新;;細胞外信號調節(jié)激酶1／2信號通路在慢性哮喘模型大鼠支氣管平滑肌細胞遷移功能變化中的調控作用[J];生理學報;2007年01期

4 喬禮芬;徐永健;劉先勝;謝俊剛;杜春玲;張建;倪望;陳士新;;周期蛋白D1正反義表達質粒的構建鑒定及其對哮喘大鼠氣道平滑肌增殖的影響[J];藥學學報;2008年03期

5 白晶;劉先勝;徐永健;謝敏;倪望;陳士新;;ERK在慢性哮喘大鼠氣道平滑肌細胞增殖中的作用[J];中國病理生理雜志;2008年03期

6 戚好文,劉振千,李煥章,廖建軍,劉穎格;組胺對家兔氣道平滑肌細胞增生的影響[J];中國病理生理雜志;1999年03期

7 張愛芝;張煥萍;藺鵬翔;;ERK活化對哮喘大鼠氣道重塑及CyclinD1表達的影響[J];中國比較醫(yī)學雜志;2010年03期

8 白晶;劉先勝;徐永健;謝敏;倪望;;細胞外信號調節(jié)蛋白激酶對哮喘大鼠氣道平滑肌細胞周期的影響[J];中國呼吸與危重監(jiān)護雜志;2010年01期

9 時國朝,鄧偉吾,洪秀華,郭強蘇,郭雪君,李敏,萬歡英,黃紹光;白三烯D_4、組胺誘導在大鼠氣道平滑肌細胞內Ca~(2+)濃度變化[J];中華結核和呼吸雜志;2002年07期

10 趙麗敏,徐永健,張珍祥,倪望,陳士新;鉀通道對人支氣管平滑肌細胞增殖與凋亡及其相關基因表達的影響[J];中華結核和呼吸雜志;2004年12期

本文編號：2767113