【摘要】： 目的研究閉塞性氣道疾病OAD(obliterative airway disease OAD)模型中氣道上皮細(xì)胞的動(dòng)態(tài)變化。 方法BALB/c小鼠氣管異位移植到BALB/c小鼠(I組)和C57BL/6小鼠(II、III組)頸背部皮下。第Ⅰ、Ⅱ組不注射環(huán)孢素A(cyclosporin CsA),第Ⅲ組全程腹腔注射CsA25mg·kg~(-1)·d~(-1) ,第Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ組均在移植后第3、7、14、21、30天后取出移植氣管。獲取標(biāo)本后,HE染色評(píng)價(jià)氣道上皮的完整性、氣道上皮中纖毛上皮所占的比例、粘膜下炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)和纖維組織增生情況。形態(tài)學(xué)定量分析軟件對(duì)HE切片進(jìn)行定量分析。測(cè)定移植氣管中5-溴-2′-脫氧尿苷(5-Bromo-2′-deoxyuridine BrdU)標(biāo)記指數(shù)和TUNEL的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)。 結(jié)果形態(tài)學(xué)結(jié)果:第Ⅰ組管腔始終通暢,術(shù)后第3天氣道上皮細(xì)胞輕度損傷丟失,粘膜輕度水腫,第7-21天,氣道上皮逐漸恢復(fù)正常,粘膜水腫減輕并逐漸消失,術(shù)后第30天,氣道上皮接近空白組正常上皮;第Ⅱ組,術(shù)后第3天,氣道上皮輕度損傷,粘膜水腫明顯,第7-21天,纖毛丟失,氣管上皮脫落、壞死,淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)逐漸加重,開(kāi)始出現(xiàn)纖維增殖并逐漸加重,第30天時(shí),上皮細(xì)胞完全消失,管腔被纖維組織填塞,接近閉塞;第Ⅲ組,術(shù)后第3天,氣道上皮輕度損傷,部分與固有層分離,粘膜水腫,第7-21天,纖毛丟失,部分氣管上皮脫落、壞死,淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)逐漸加重,開(kāi)始出現(xiàn)纖維增殖,與第Ⅱ組相比淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)程度及纖維增殖程度較輕,第30天時(shí),第Ⅲ組纖維組織增生明顯,仍有少量上皮細(xì)胞,管腔大部分被纖維組織填塞。氣道上皮中纖毛上皮的比例:術(shù)后第3天,第Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ組氣道上皮纖毛比例均大于90%,各組間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);術(shù)后第7天,第I組氣道上皮纖毛比例為94%左右,第Ⅱ和Ⅲ組為80%左右,第Ⅰ與第Ⅱ、Ⅲ相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.000,p=0.001),第Ⅱ組與第Ⅲ組之間差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.370);術(shù)后第14天,第Ⅱ和第Ⅲ組纖毛上皮比例分別55%和71%左右,較第Ⅰ組明顯減少(p=0.000,p=0.000),第Ⅱ組較第Ⅲ組減少,二者相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.000);第21天,第Ⅱ和第Ⅲ組纖毛上皮比例分別15%和63%左右,較第Ⅰ組明顯減少(p=0.000),第Ⅱ組較第Ⅲ組減少(p=0.000);術(shù)后第30天,第Ⅱ組和第Ⅲ組纖毛上皮基本消失(纖毛上皮比例低于5%),較第Ⅰ組明顯減少(p=0.000);BrdU檢測(cè)結(jié)果:第Ⅰ組在5個(gè)時(shí)間點(diǎn)的變化范圍為3～5%;術(shù)后第3天,第Ⅱ組較第Ⅰ、第Ⅲ組增殖明顯(p=0.000, p=0.001);術(shù)后第7天,第Ⅱ組標(biāo)記指數(shù)為15%左右,遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于第Ⅰ組的3%(p=0.000)和第Ⅲ組的11%(p=0.000);術(shù)后第14天,第Ⅱ、Ⅲ組標(biāo)記指數(shù)達(dá)到最高,并且第Ⅱ組遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于第Ⅰ組(p=0.000)和第Ⅲ組(p=0.000);術(shù)后第21天,第Ⅱ組較第Ⅰ、第Ⅲ組增殖明顯(p=0.000, p=0.002);術(shù)后第30天,第Ⅱ和Ⅲ組標(biāo)記指數(shù)明顯降低,特別是第Ⅱ組降低到最低點(diǎn)為2%左右。TUNEL檢測(cè)結(jié)果:第Ⅰ組在5個(gè)時(shí)間點(diǎn)的變化范圍為3～4;術(shù)后第3天,第I組、第Ⅱ和第Ⅲ組間差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);術(shù)后第7天,第Ⅱ組、Ⅲ組陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)較第Ⅰ組明顯增多(p=0.000,p=0.000);術(shù)后第14天,第Ⅲ組達(dá)到最大值,第Ⅱ、Ⅲ組陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于第Ⅰ組(p=0.000,p=0.000);術(shù)后第21天,第Ⅱ組達(dá)到最大值,第Ⅱ、Ⅲ組陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于第Ⅰ組(p=0.000,p=0.000);術(shù)后第30天,第Ⅱ、Ⅲ組略高與第I組,但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.613, p=0.061)。 結(jié)論1.在同種異體免疫排斥環(huán)境中,損傷的同種異體氣道上皮可以引起氣道上皮細(xì)胞大量增生,增生的細(xì)胞停滯在S期未能繼續(xù)進(jìn)行有絲分裂,繼而發(fā)生了凋亡;同時(shí)這些增生的細(xì)胞作為抗原促進(jìn)了同種異體免疫排斥反應(yīng),進(jìn)一步加重了氣道的損傷,氣道上皮細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制和加速凋亡可能為最終導(dǎo)致OAD的發(fā)生的原因之一。 2.在小鼠異位氣管移植模型中,CsA短期內(nèi)可以減輕同種異體移植氣道的纖維化,未能阻止OB的發(fā)生,說(shuō)明其對(duì)氣道上皮的長(zhǎng)期保護(hù)作用不明顯。
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類(lèi)號(hào)】：R562
【圖文】：

術(shù)后第3天第Ⅱ組（100X）

術(shù)后第3天第Ⅲ組（100X）

術(shù)后第7天第Ⅰ組（100X）

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本文編號(hào)：2744653