【摘要】： 目的:本研究以大鼠矽肺動(dòng)物模型為研究對(duì)象,通過(guò)測(cè)定矽肺相關(guān)生物活性介質(zhì)并確定相關(guān)介質(zhì)致纖維化的節(jié)點(diǎn)。初步探討腫瘤壞死因子α(tumor necrosisαfactor,TNF-α)可溶性受體對(duì)二氧化硅(silicon dioxide,SiO2)粉塵致大鼠肺纖維化的防治作用以及相關(guān)細(xì)胞因子表達(dá)的影響。 方法:根據(jù)隨機(jī)化原則將大鼠分為3個(gè)實(shí)驗(yàn)組,即對(duì)照組(control group,CL)、染矽塵組(silica-instilled group,SA)、干擾組(intervention group,IN),對(duì)照組、染矽塵組每組48只,干擾組10只。對(duì)照組大鼠氣管內(nèi)注入生理鹽水,染矽塵組大鼠氣管內(nèi)注入矽塵混懸液1ml(50mg/ml),干擾組大鼠氣管內(nèi)注入矽塵混懸液1ml(50mg/ml)后于1、5、8d給予500ug TNF-α可溶性受體皮下注射。氣管暴露法建立大鼠矽肺模型,模型建立后,對(duì)照組、染矽塵組于1d、3d、7d、14d、21d、28d 6個(gè)時(shí)間點(diǎn)分別取8只大鼠將其處死。干擾組于7d、14d 2個(gè)時(shí)間點(diǎn)取5只大鼠處死。HE染色觀察大鼠肺組織形態(tài)學(xué)的變化。血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定支氣管肺泡灌洗液細(xì)胞總數(shù)。天狼猩紅染色法結(jié)合偏振光顯微鏡觀察肺組織Ⅰ、Ⅲ型膠原合成。用Image-Pro Plus Version 4.5 for windows TM圖象分析系統(tǒng)對(duì)圖像進(jìn)行分析。一氧化氮(nitrogen monoxidum,NO)測(cè)定采用南京建成生物工程研究所NO試劑盒。酶聯(lián)免疫吸附法( enzyme-labeledimmunosorbent assay,ELISA)檢測(cè)對(duì)照組、染矽塵組和干擾組各時(shí)間點(diǎn)外周血核因子κB(nuclear factorκB,NF-κB)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)、白介素(interleukin-1,IL-1β)、TNF-α等4種生物活性介質(zhì)表達(dá)水平。所有數(shù)值均用x±s表示,兩組間采用t檢驗(yàn),不同組間的比較用單因素方差分析的LSD法,全部數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)學(xué)處理均采用SPSS15.0 for windows分析軟件。 結(jié)果: 1 HE染色法證實(shí)氣管暴露注入SiO2粉塵懸液成功建立矽肺模型。 2 TNF-α可溶性受體對(duì)染矽塵大鼠肺臟器系數(shù)的影響。與對(duì)照組比較,染矽塵組大鼠7d以后各時(shí)間點(diǎn)肺臟器系數(shù)高于對(duì)照組(P0.05);與染矽塵組比較,干擾組大鼠各時(shí)間點(diǎn)肺臟器系數(shù)低于染矽塵組,但高于對(duì)照組,差異有顯著性(P0.05)。 3 TNF-α可溶性受體對(duì)染矽塵大鼠肺泡灌洗液(broncho alveolar lavage fluid,BALF)白細(xì)胞總數(shù)的影響。與對(duì)照組比較,染矽塵組相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)BALF白細(xì)胞總數(shù)均不同程度增高,在14d、21d、28d具有顯著性差異(P0.01);與染矽塵組比較,干擾組各相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)BALF白細(xì)胞總數(shù)均小于染矽塵組,在14d差異有顯著性(P0.05)。 4 TNF-α可溶性受體對(duì)染矽塵大鼠Ⅰ、Ⅲ型膠原合成的影響。與對(duì)照組比較,染矽塵組7d、14d、21d、28dⅠ型膠原均高于對(duì)照組,差異有顯著性(P0.01);與染矽塵組比較,干擾組各時(shí)間點(diǎn)Ⅰ膠原低于染矽塵組組,在14d差異有顯著性(P0.05)。與對(duì)照組比較,染矽塵組各時(shí)間點(diǎn)Ⅲ膠原在21d時(shí)上升陡然趨緩,僅在7d、14d、21d時(shí)有顯著性差異(P0.01);與染矽塵組比較,干擾組各時(shí)間點(diǎn)Ⅲ膠原均低于染矽塵組,但僅在14d差異有顯著性(P0.05)。 5 TNF-α可溶性受體對(duì)染矽塵大鼠外周血清NO表達(dá)的影響。與對(duì)照組比較,染矽塵組各時(shí)間點(diǎn)外周血清NO的濃度均高于對(duì)照組(P0.01),在7d、14d、21d、28d具有顯著性差異(P0.05);與染矽塵組比較,干擾組各時(shí)間點(diǎn)外周血清NO濃度低于染矽塵組,在14d時(shí)差異有顯著性(P0.05)。 6 TNF-α可溶性受體對(duì)染矽塵大鼠外周血清IL-1β表達(dá)的影響。與對(duì)照組比較,染矽塵組各時(shí)間點(diǎn)外周血清IL-1β的濃度均高于對(duì)照組(P0.01),但僅在3d、7d時(shí)有顯著性差異(P0.05)。與染矽塵組比較,干擾組各時(shí)間點(diǎn)外周血清IL-1β濃度低于染矽塵組,在7d時(shí)差異有顯著性(P0.01)。 7 TNF-α可溶性受體對(duì)染矽塵大鼠外周血清TGF-β表達(dá)的影響。與對(duì)照組比較,染矽塵組在14d、21d、28d時(shí)外周血清TGF-β的濃度高于對(duì)照組(P0.01,P0.05),其表達(dá)高峰在染矽塵后的第21d;與染矽塵組比較,干擾組各時(shí)間點(diǎn)外周血清TGF-β濃度低于染矽塵組,在14d時(shí)差異有顯著性(P0.05)。 8 TNF-α可溶性受體對(duì)染矽塵大鼠外周血清NF-κB表達(dá)的影響。與對(duì)照組比較,染矽塵組各時(shí)間點(diǎn)外周血清NF-κB的濃度均高于對(duì)照組(P0.01,P0.05),其表達(dá)高峰在染矽塵后的第21d;與染矽塵組比較,干擾組各時(shí)間點(diǎn)外周血清NF-κB濃度低于染矽塵組,差異有顯著性(P0.05)。 9 TNF-α可溶性受體對(duì)染矽塵大鼠外周血清TNF-α表達(dá)的影響。染矽塵組與干擾組各時(shí)間點(diǎn)外周血清TNF-α的濃度比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;與染矽塵組比較,干擾組各時(shí)間點(diǎn)外周血清TNF-α濃度低于染矽塵組,但差異無(wú)顯著性。 結(jié)論:本研究認(rèn)為:1大鼠支氣管內(nèi)滴入矽塵可引起大鼠肺組織炎性和纖維化性病理變化,并有矽結(jié)節(jié)形成。2 TNF-α可溶性受體可以緩解矽塵誘導(dǎo)的大鼠肺臟器系數(shù)的增加。3 TNF-α可溶性受體對(duì)矽塵誘導(dǎo)的大鼠BALF中細(xì)胞總數(shù)的顯著增加有抑制作用。4 TNF-α可溶性受體能夠抑制矽塵誘導(dǎo)的大鼠肺組織Ⅰ、Ⅲ型膠原的增加。5 TNF-α可溶性受體能夠抑制矽塵誘導(dǎo)的大鼠肺外周血清中NO、IL-1β、TGF-β1、NF-κB、TNF-α的表達(dá)水平。
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類(lèi)號(hào)】：R135.2

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2744628