發(fā)布時間：2020-07-06 13:35

【摘要】： 目的探討睡眠呼吸暫停模式間歇低氧不同程度及頻率對炎性反應(yīng)的影響及相應(yīng)的規(guī)律。從而為睡眠呼吸暫停綜合征(Sleep Apnea Syndrome, SAS)及其心腦血管合并癥的炎性機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和理論依據(jù)。 方法實(shí)驗(yàn)分為兩大部分。 第一部分：將人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞可傳代細(xì)胞株ECV304置于細(xì)胞培養(yǎng)艙,以模擬睡眠呼吸暫停(Sleep Apnea, SA)模式低氧／再氧合模式,將艙內(nèi)氣體由計算機(jī)程控為不同程度與頻率間歇低氧(Intermittent Hypoxia, IH)環(huán)境。細(xì)胞株分為1個持續(xù)正常氧(對照組)和18個實(shí)驗(yàn)組。不同IH程度分3組,頻率固定為12次／h,即IH程度組1(10%02)、IH程度組2(1.5%02)及IH程度組3(0.5%O2組)。每一不同IH程度組分別設(shè)立不同IH頻率5組,共15組。頻率組1(40次／h)；頻率組2(20次／h)；頻率組3(12次／h)；頻率組4(9.23次／h)和頻率組5(6.32次／h)。細(xì)胞暴露后以酶聯(lián)免疫吸附法(Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay, ELISA)測定培養(yǎng)液中白細(xì)胞介素(Interleukin-6, IL-6)及白細(xì)胞介素-8(Interleukin-8, IL-8)濃度。 第二部分：通過臨床多導(dǎo)睡眠監(jiān)測收集病例,設(shè)立1個正常對照組(A組)和輕度OSAS(B組)、中度OSAS(C組)、重度OSAS(D組)及重度OSAS合并高血壓組(E組)4個實(shí)驗(yàn)組。于次日晨起睡眠監(jiān)測結(jié)束后采集靜脈血,以ELISA法分別測定血清中IL-6及IL-8濃度。 結(jié)果第一部分：①IL-6和IL-8水平在3個不同程度IH組均高于正常O2組(P均0.05),隨IH程度加重IL-6及IL-8水平呈逐步升高趨勢(P均0.05)。不同程度IH組間兩兩比較,差別均有統(tǒng)計學(xué)意義(P均0.05)。②10%02IH狀態(tài)下,IL-6除IH頻率組3與IH頻率組4之間相比無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)外,其余不同頻率IH組間IL-6水平不同,均具有統(tǒng)計學(xué)差異(P均0.05)。IL-8除IH頻率組1與組2、組1與組5、組2與組5、組3與組4及組4與組5兩兩相比無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)外,其余不同頻率IH組間IL-8水平不同,均具有統(tǒng)計學(xué)差異(P均0.05)。③1.5%02IH狀態(tài)下,不同頻率組別IL-6水平不同(P均0.05)。隨著IH頻率的降低,IL-6水平隨之升高,至12次／h升至最高,以后隨IH頻率降低,IL-6水平略有下降。IL-8除IH頻率組2與IH頻率組5、組3與組4、組4與組5之間相比無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)外,兩兩相比均具有統(tǒng)計學(xué)差異(P均0.05)。④0.5%O2IH狀態(tài)下,隨著IH頻率降低IL-6及IL-8水平在20次／小時組輕度升高(P0.05),至12次／小時達(dá)最高(P0.05),9.23次／小時略下降(P0.05),6.32次／小時進(jìn)一步下降(P0.05)�？傮w呈現(xiàn)隨IH頻率下降而漸升高而后略有下降的趨勢。 第二部分：①與正常對照組(A組)比較,不同程度OSAS各組(B、C、D組)及OSAS合并高血壓組(E組)IL-6、IL-8水平均增高(P0.05),具有統(tǒng)計學(xué)意義。②B、C、D、E各組組間兩兩比較,IL-6、IL-8水平差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P均0.05)。IL-6及工L-8水平隨著OSAS程度加重而增加；IL-6及IL-8在重度OSAS與重度OSAS合并高血壓組間水平不同,具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論SA模式下間歇低氧對細(xì)胞及機(jī)體的炎性損傷是存在的,且炎性反應(yīng)水平具低氧程度依賴性。輕、中、重低氧暴露下,炎性反應(yīng)水平有隨頻率減低而增加,而后下降趨勢,并非間歇低氧頻率越高損傷越嚴(yán)重。炎性反應(yīng)水平在OSAS患者中隨OSAS程度加重而升高。重度OSAS合并高血壓患者炎性反應(yīng)水平高于重度OSAS患者。
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號】：R56
【圖文】：

1.1對象和方法1.1.1細(xì)胞模型選擇細(xì)胞模型選用人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)可傳代細(xì)胞株ECV304，細(xì)胞的可獲得性及細(xì)胞自身的行為。究其因有以下三點(diǎn):第一，原代細(xì)胞困難、增殖活性低、需要添加特殊的生長因子才能成活;第二，ECV304細(xì)具有原代細(xì)胞的特征，如鵝卵石樣的單層生長模式，胞質(zhì)內(nèi)特異We1bel一Palade小體，攝取低密度脂蛋白等;第三，ECV3O4細(xì)胞增殖活力能良好的貼壁生長和多次傳代。血管內(nèi)皮細(xì)胞(VasC。兒rendothelialCeEC)襯在血管腔面，對于血.液中氧分壓的變化非常敏感，也是氧化應(yīng)激及反應(yīng)的敏感器官，在體液內(nèi)壞境中各種刺激下，能合成和分泌多種生物活性質(zhì)。論為:ECV304與原代人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞生理、病理學(xué)特性基本一可應(yīng)用于本實(shí)驗(yàn)研究。ECV304細(xì)胞由天津南開大學(xué)生命科學(xué)研究院惠贈。

IH/f20X模式實(shí)驗(yàn)暴露裝置全貌

1.5%02)而pCoZ由 152mmHg(約20%COZ)I瞬lhJ降至 38mmHg(約50， 0eoZ)時，根據(jù)實(shí)測結(jié)果繪制出厚度為 3mm的空白培養(yǎng)基底部氣體分壓相對于時間的變化曲線，見圖5。卜卜 卜 入入飛 飛 八八一 一 丫丫丫 丫丫~氧分版 版~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~二氧化碳 碳一一工于玄 玄玄 分壓 壓三三飛街什經(jīng)經(jīng)經(jīng)經(jīng)經(jīng)經(jīng)經(jīng)經(jīng)經(jīng)經(jīng)經(jīng)經(jīng)經(jīng)經(jīng) 經(jīng)卜 卜卜 {{{皿皿皿皿皿皿皿皿皿 .....， ， ， 月 月 月月 月 一一占工卜卜‘ _1111口口右 右右右右右右右右右右右右右 二 二二1卜 卜 2040008060206040

本文編號：2743704