【摘要】： 目的:研究不同潮氣量和呼氣末正壓(PEEP)機械通氣對急性肺損傷大鼠肺組織細胞凋亡的影響。 方法:40只健康SD大鼠隨機分為5組(n=8),⑴小潮氣量組(LV組):潮氣量8ml/kg,不加PEEP;⑵大潮氣量組:潮氣量30ml/kg,不加PEEP;⑶小潮氣量+2PEEP組(LV2P組):潮氣量8ml/kg,同時給PEEP 2cmH2O;⑷小潮氣量+5PEEP組(LV5P組):潮氣量8ml/kg,同時給PEEP 5cmH2O;⑸小潮氣量+8PEEP組(LV8P組):潮氣量8ml/kg,同時給PEEP 8cmH2O。經(jīng)頸靜脈注射油酸0.1ml/kg復制急性肺損傷模型成功,隨即進行機械通氣。通氣2h后處死動物,取血及全肺稱濕重,計算肺系數(shù)(肺濕重/體重×100)來比較肺水腫的程度;取支氣管肺泡灌洗液(BALF),測定BALF中腫瘤壞死因子的濃度;用脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導的末端轉(zhuǎn)移法(TUNEL)檢測肺組織中細胞凋亡指數(shù);采用免疫組織化學技術(shù)檢測肺組織caspase-3蛋白酶的表達和分布。 結(jié)果: 1潮氣量的增加使肺臟充血明顯,肺組織結(jié)構(gòu)紊亂,有肺不張,多量炎性細胞浸潤,肺泡腔內(nèi)有紅色的滲出,微血管內(nèi)有血栓形成;加用PEEP后病變明顯減輕。 2肺系數(shù)的變化:各組肺系數(shù)相比,HV組明顯高于LV組(p0.01);小潮氣量組加用PEEP各組中,LV2P和LV8P組明顯高于加LV5P組(p0.01),而這兩組間相比無顯著差異(p0.05)。 3血清和支氣管肺泡灌洗液中TNF-α的變化: 3.1血清TNF-α濃度變化:HV組明顯高于LV組(p0.01),小潮氣量組加用PEEP各組中,LV2P組明顯高于LV5P和LV8P組(p0.01),后兩組比較組無顯著性差異(p0.05)。 3.2支氣管肺泡灌洗液中TNF-α濃度變化:HV組明顯高于LV組(p0.01),小潮氣量組加用PEEP各組中,LV8P組明顯高于LV2P組和LV5P組(p0.01),而后兩組間比較無顯著性差異(p0.05)。 4 TUNEL分析結(jié)果:隨著潮氣量的增加,肺組織細胞凋亡指數(shù)增加,凋亡細胞主要分布在肺泡間隔和支氣管上皮;加用PEEP后,凋亡細胞減少,以LV5P組凋亡細胞最少,與LV、LV2P、LV8P組比較有統(tǒng)計學意義(p0.01)。 5 caspase-3蛋白的表達:隨著潮氣量的增加,caspase-3蛋白的陽性表達明顯增加,以支氣管上皮表達增強最為顯著。LV、LV2P、LV8P組陽性細胞較少,主要在血管內(nèi)皮和細支氣管上皮,三組無統(tǒng)計學差異(p0.05);而LV5P組表達最少,與前三組相比有統(tǒng)計學差異(p0.01)。 結(jié)論: 1大潮氣量機械通氣加重了ALI大鼠的肺損傷,小潮氣量加用PEEP對肺有保護作用。 2大潮氣量明顯增加肺組織細胞凋亡的數(shù)目和caspase-3蛋白酶的表達,小潮氣量及加用PEEP組凋亡細胞的數(shù)目明顯減少,且分布不同。 3 TUNEL檢測凋亡細胞與免疫組化法caspase-3蛋白的陽性表達分布不完全相同,表明在ALI模型VILI的發(fā)病機制中有關(guān)細胞凋亡是否存在其他的途徑及調(diào)控基因值得進一步研究。
【學位授予單位】：河北醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2007
【分類號】：R563.8

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4 李e

本文編號：2739335