發(fā)布時間：2020-07-03 06:45

【摘要】： 目的:研究不同潮氣量和呼氣末正壓(PEEP)機械通氣對急性肺損傷大鼠肺組織細胞凋亡的影響。 方法:40只健康SD大鼠隨機分為5組(n=8),⑴小潮氣量組(LV組):潮氣量8ml/kg,不加PEEP;⑵大潮氣量組:潮氣量30ml/kg,不加PEEP;⑶小潮氣量+2PEEP組(LV2P組):潮氣量8ml/kg,同時給PEEP 2cmH2O;⑷小潮氣量+5PEEP組(LV5P組):潮氣量8ml/kg,同時給PEEP 5cmH2O;⑸小潮氣量+8PEEP組(LV8P組):潮氣量8ml/kg,同時給PEEP 8cmH2O。經頸靜脈注射油酸0.1ml/kg復制急性肺損傷模型成功,隨即進行機械通氣。通氣2h后處死動物,取血及全肺稱濕重,計算肺系數(肺濕重/體重×100)來比較肺水腫的程度;取支氣管肺泡灌洗液(BALF),測定BALF中腫瘤壞死因子的濃度;用脫氧核糖核苷酸末端轉移酶介導的末端轉移法(TUNEL)檢測肺組織中細胞凋亡指數;采用免疫組織化學技術檢測肺組織caspase-3蛋白酶的表達和分布。 結果: 1潮氣量的增加使肺臟充血明顯,肺組織結構紊亂,有肺不張,多量炎性細胞浸潤,肺泡腔內有紅色的滲出,微血管內有血栓形成;加用PEEP后病變明顯減輕。 2肺系數的變化:各組肺系數相比,HV組明顯高于LV組(p0.01);小潮氣量組加用PEEP各組中,LV2P和LV8P組明顯高于加LV5P組(p0.01),而這兩組間相比無顯著差異(p0.05)。 3血清和支氣管肺泡灌洗液中TNF-α的變化: 3.1血清TNF-α濃度變化:HV組明顯高于LV組(p0.01),小潮氣量組加用PEEP各組中,LV2P組明顯高于LV5P和LV8P組(p0.01),后兩組比較組無顯著性差異(p0.05)。 3.2支氣管肺泡灌洗液中TNF-α濃度變化:HV組明顯高于LV組(p0.01),小潮氣量組加用PEEP各組中,LV8P組明顯高于LV2P組和LV5P組(p0.01),而后兩組間比較無顯著性差異(p0.05)。 4 TUNEL分析結果:隨著潮氣量的增加,肺組織細胞凋亡指數增加,凋亡細胞主要分布在肺泡間隔和支氣管上皮;加用PEEP后,凋亡細胞減少,以LV5P組凋亡細胞最少,與LV、LV2P、LV8P組比較有統(tǒng)計學意義(p0.01)。 5 caspase-3蛋白的表達:隨著潮氣量的增加,caspase-3蛋白的陽性表達明顯增加,以支氣管上皮表達增強最為顯著。LV、LV2P、LV8P組陽性細胞較少,主要在血管內皮和細支氣管上皮,三組無統(tǒng)計學差異(p0.05);而LV5P組表達最少,與前三組相比有統(tǒng)計學差異(p0.01)。 結論: 1大潮氣量機械通氣加重了ALI大鼠的肺損傷,小潮氣量加用PEEP對肺有保護作用。 2大潮氣量明顯增加肺組織細胞凋亡的數目和caspase-3蛋白酶的表達,小潮氣量及加用PEEP組凋亡細胞的數目明顯減少,且分布不同。 3 TUNEL檢測凋亡細胞與免疫組化法caspase-3蛋白的陽性表達分布不完全相同,表明在ALI模型VILI的發(fā)病機制中有關細胞凋亡是否存在其他的途徑及調控基因值得進一步研究。
【學位授予單位】：河北醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2007
【分類號】：R563.8

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