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Th1與Th17相互調(diào)節(jié)在衣原體呼吸道感染中發(fā)揮免疫保護(hù)作用

發(fā)布時(shí)間:2020-06-30 05:04
【摘要】: 目的: 用沙眼衣原體小鼠肺炎菌株(Chlamydia muridarum, Cm)呼吸道感染BALB/c小鼠,建立小鼠衣原體肺炎模型,檢測衣原體肺炎癥中Thl和Th17免疫應(yīng)答水平。利用體內(nèi)抗體中和技術(shù)探討小鼠衣原體肺感染中Th1和Th17應(yīng)答的作用及IFN-γ和IL-17對(duì)Th17與Th1應(yīng)答的調(diào)節(jié)。 方法: 取6-8周BALB/c小鼠,鼻腔吸入40ul含1×103IFU Cm的PBS,建立Cm肺感染模型。通過觀察感染衣原體后小鼠體重變化、死亡率、肺組織衣原體繁殖及肺組織病理學(xué)變化等確定感染小鼠的疾病狀態(tài);在感染后不同天處死小鼠,分離肺組織,利用RT-PCR技術(shù)檢測感染小鼠肺組織Th1和Th17相關(guān)細(xì)胞因子IFN-γ和IL-17及其上游因子IL-12和IL-23mRNA表達(dá);制備小鼠脾細(xì)胞懸液,利用細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子染色技術(shù)檢測IFN-γ-CD4+T細(xì)胞與IL-17-CD4+T細(xì)胞百分率,確定感染小鼠Th1與Th17免疫應(yīng)答水平。利用單克隆抗體體內(nèi)中和技術(shù)分別中和Cm感染小鼠內(nèi)源性IFN-Y和IL-17,通過觀察小鼠的疾病狀態(tài)確定IFN-γ和IL-17在Cm感染中的作用。在感染后第7天處死小鼠,利用RT-PCR技術(shù)檢測內(nèi)源性IL-17和IFN-γ中和小鼠肺組織IFN-γ和IL-17及其上游因子IL-12和IL-23mRNA的表達(dá);利用細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子染色技術(shù)檢測IFN-γ-CD4+T細(xì)胞與IL-17-CD4+T細(xì)胞的擴(kuò)增,探討小鼠衣原體肺感染中IFN-γ和IL-17對(duì)Th17與Thl應(yīng)答的調(diào)節(jié)。 結(jié)果: Cm鼻腔吸入感染小鼠引起典型的衣原體肺炎,以小鼠體重下降、肺組織衣原體繁殖及大量炎癥細(xì)胞浸潤為特征。Cm呼吸道感染可誘導(dǎo)小鼠肺組織及脾臟產(chǎn)生高水平的Thl和Th17應(yīng)答,肺組織IFN-γ和IL-17及其上游因子IL-12和IL-23mRNA表達(dá)顯著增高、脾臟IFN-γ-CD4+T細(xì)胞及IL-17-CD4+T細(xì)胞顯著擴(kuò)增。內(nèi)源性IFN-γ或IL-17中和衣原體感染小鼠呈現(xiàn)嚴(yán)重的疾病狀態(tài),表現(xiàn)為嚴(yán)重的體重降低、較長的疾病過程、肺組織較高的衣原體生長及嚴(yán)重的肺組織病理損傷;與PBS對(duì)照組小鼠相比,IFN-γ與IL-17抗體中和小鼠IL-17及IFN-γ及其上游因子IL-23及IL-12mRNA的表達(dá)均明顯下調(diào);脾臟IL-17-CD4+T細(xì)胞與IFN-γ-CD4+T細(xì)胞擴(kuò)增能力也顯著降低。 結(jié)論: Cm呼吸道感染小鼠引起典型的衣原體肺炎。衣原體呼吸道感染誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生高水平的Th1Th17應(yīng)答IFN-γ和IL-17通過交互上調(diào)衣原體特異性的Th17與Th1應(yīng)答在小鼠衣原體肺感染中發(fā)揮免疫保護(hù)作用。
【學(xué)位授予單位】:天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2010
【分類號(hào)】:R56
【圖文】:

相關(guān)因子,脾臟,小鼠,抗體


內(nèi)是否對(duì)Thl7應(yīng)答有調(diào)節(jié)作用。如圖 2:21.2所示,與PBS對(duì)照組相比,IFN-Y抗體中和小鼠肺組織IL一17和IL一23mRNA的表達(dá)水平顯著降低(圖2.2.1.2A),<0.01):脾臟IL一17一CD4+T細(xì)胞百分率也顯著降低(圖2.2.l.2B)(尸<0.01)。以上結(jié)果提示,衣原體呼吸道感染中,IFN一Y對(duì)Thl7應(yīng)答具有促進(jìn)作用。In:屯l、卜呂“一In一 IFN-Yl》BSILI.IL一23p一二一eti一anti一I剛斗。寫。冬左外啟甲紹目

本文編號(hào):2734897

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