【摘要】：目的探討神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白（NRG)1β在炎癥氣道黏液高分泌中的作用。方法用IL-1β刺激人氣道上皮細(xì)胞株HBE16細(xì)胞構(gòu)建黏液高分泌模型，逆轉(zhuǎn)錄PCR法檢測(cè)NRG1β mRNA和黏蛋白（MUC）5ACmRNA，ELISA法檢測(cè)NRG1β和MUC5AC蛋白水平。用NRG1β刺激后，ELISA法檢測(cè)MUC5AC表達(dá)，Western印跡法檢測(cè)磷酸化人表皮生長(zhǎng)因子受體（ErbB）1、2、3、4。預(yù)先分別給予ErbB1、2、3、4抗體及p38觸分裂原活化蛋白（MAPK）特異性抑制劑、細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白（ERK）1/2特異性抑制劑、絲裂原壓力活性蛋白激酶（MSK）1特異性抑制劑、環(huán)磷酸腺苷（c-AMP）反應(yīng)原件結(jié)合蛋白（CREB）單克隆抗體，再經(jīng)NRG1β刺激后，ELISA法檢測(cè)MUC5AC蛋白表達(dá)。 結(jié)果IL-1β顯著增加NRG1β、MUC5AC mRNA水平及其蛋白表達(dá)，且在蛋白水平呈現(xiàn)濃度正相關(guān)性。單獨(dú)給予NRG1β（1、10、100、200nmol/L）刺激HBE16細(xì)胞， MUC5AC蛋白表達(dá)（0.328±0.055、0.364±0.086、0.650±0.134、0.586±0.068）較對(duì)照組（0.227±0.019）顯著增加，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P0.05），同時(shí)磷酸化ErbB2、3呈陽性表達(dá)，而磷酸化ErbB1、4呈近似陰性表達(dá)。預(yù)先給予ErbB2、3抗體、p38MAPK特異性抑制劑、ERK1/2特異性抑制劑和MSK1抑制劑、CREB抗體再給予NRG1β刺激者M(jìn)UC5AC蛋白表達(dá)（0.221±0.033、0.238±0.044、0.386±0.021、0.352±0.022、0.294±0.017、0.252±0.019）較單獨(dú)給予NRG1β（0.650±0.134）顯著降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P0.05）。結(jié)論IL-1β導(dǎo)致氣道黏液高分泌可能通過NRG1β/ErbB2、3異二聚體信號(hào)通路，并激活后續(xù)的MAPK/MSK1/CREB信號(hào)路徑實(shí)現(xiàn)。
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：R562.25
【圖文】：

差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=13.84，P=0.000）；F 組 MUC5AC 為（0與對(duì)照組相比明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=13.01, P=0.00為（0.652±0.046）ng/ml，與對(duì)照組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t2.5 使用各阻斷劑后 NRG-1β 誘導(dǎo)的 MUC5AC 蛋NRG-1β（100 nmol/L）單一刺激組 MUC5AC 表達(dá)為（0.65I、J、K 組 MUC5AC 蛋白表達(dá)分別為（0.352±0.022）、（0.386±0.0（0.252±0.019）ng/ml，與 NRG-1β 單一刺激組相比明顯降低，義（t=9.81、8.69、11.76、13.11，均 P=0.000）2.6 Western 印跡法檢測(cè)磷酸化 ErbB1、2、3、4 經(jīng) 100 nmol/L 的 NRG-1β 處理后，磷酸化 ErbB1 和 4 呈近酸化 ErbB2、3 呈陽性表達(dá)（圖 2.6），未行定量或半定量檢測(cè)1 2 3 4

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 張明周;張明科;歐雪梅;馮玉麟;文富強(qiáng);;HSP70在香煙誘導(dǎo)人類氣道上皮細(xì)胞黏液高分泌中的作用[J];四川大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2009年05期

2 涂靜;周向東;;MARCKS及其對(duì)氣道黏蛋白胞吐作用的調(diào)節(jié)[J];國(guó)際病理科學(xué)與臨床雜志;2009年05期

本文編號(hào)：2729692