發(fā)布時(shí)間：2020-06-01 10:29

【摘要】：1. 背景與目的: 急性肺損傷(acute lung injury, ALI)/急性呼吸窘迫綜合征(acute respiratory distress syndrome, ARDS)是臨床上常見(jiàn)的急性低氧血癥性呼吸衰竭,其發(fā)病機(jī)制是創(chuàng)傷、休克、感染等引起的全身炎癥反應(yīng)綜合征(Systemic inflammatory response syndrome, SIRS)在肺部的表現(xiàn),并最終發(fā)展為終末呼吸單位彌漫性損傷并發(fā)滲出性肺水腫。ARDS是臨床病死率極高的危重癥,其病死率約50%。研究發(fā)現(xiàn),ALI/ARDS的發(fā)生與過(guò)度的全身炎癥反應(yīng)(SIRS)有關(guān)。如果能夠在SIRS這一環(huán)節(jié)進(jìn)行及時(shí)、正確的調(diào)控全身性炎癥反應(yīng),就可以在很大程度上降低ALI/ARDS的病死率。 糖皮質(zhì)激素(glucocorticoid, GC)是治療ARDS應(yīng)用較普遍的藥物,其中糖皮質(zhì)激素受體(glucocorticoid receptor, GR)是GC效應(yīng)發(fā)揮的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。盡管GC對(duì)肺臟的保護(hù)效應(yīng)是肯定的,但目前臨床上應(yīng)用GC救治ARDS病人的遠(yuǎn)期治療效果不甚理想,據(jù)多中心臨床研究發(fā)現(xiàn),GC不能降低ARDS的發(fā)生率和病死率,大劑量GC應(yīng)用的后果可能是感染擴(kuò)散所導(dǎo)致的病死率增加。近年來(lái)研究表明,ARDS病人存在著GC抵抗,這種GC抵抗機(jī)制不明確,可能與GR表達(dá)下調(diào)或GR功能受到抑制有關(guān)。所以,本課題以脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)致SIRS-肺損傷組大鼠以及地塞米松(Dexamethasone, Dex)治療組大鼠為研究對(duì)象,對(duì)GR的表達(dá)和活性調(diào)控機(jī)制進(jìn)行深入研究,旨在闡明外源性GC治療SIRS-肺損傷大鼠的同時(shí),BAG-1-GR信號(hào)通路被激活。該信號(hào)通路負(fù)向調(diào)節(jié)GR抗炎活性,是導(dǎo)致外源GC抵抗(glucocorticoid receptor resistance)的重要原因。 2. 研究方法與內(nèi)容 本實(shí)驗(yàn)運(yùn)用蛋白免疫印跡、凝膠遷移率電泳、逆轉(zhuǎn)錄PCR、免疫細(xì)胞化學(xué)染色、GRE 體外轉(zhuǎn)錄激活分析等技術(shù),分以下3 個(gè)部分進(jìn)行了探討:1)首先對(duì)LPS 致SIRS-肺損傷組大鼠血清皮質(zhì)醇、肺組織細(xì)胞GR 表達(dá)和DNA 結(jié)合力的變化特點(diǎn)進(jìn)行分析;研究LPS+Dex、LPS+Dex+Dex 治療組大鼠肺組織細(xì)胞糖皮質(zhì)激素受體DNA 結(jié)合力的變化,闡明LPS 致SIRS-肺損傷組大鼠存在著內(nèi)源性和外源性的GC 抵抗及其可能機(jī)制;2)通過(guò)研究LPS+Dex 治療組大鼠肺組織細(xì)胞中GR 輔伴侶蛋白Bcl-2 相關(guān)抗凋亡蛋白-1 (Bcl-2-associated athanogene 1, BAG-1)表達(dá)變化及其與GR 的相互作用關(guān)
【圖文】：

00000h 1h 2h 4h 8h 12h * P<0.01 vs. Control圖 1-1 SIRS-肺損傷大鼠血清皮質(zhì)醇濃度變化肺損傷組大鼠肺組織 GR mRNA 表達(dá)一過(guò)性降低-PCR 結(jié)果顯示：GR mRNA 表達(dá)在 LPS 致傷后 2h 明顯平，12h 開(kāi)始恢復(fù)，24h 基本恢復(fù)至正常水平，，見(jiàn)圖 1-2M N 1 2 3 4 5 6

N：Normal control；1、2、3、4、5、6：LPS/1、2、4、8、12、24h圖 1-3 SIRS-肺損傷大鼠肺組織 GR 蛋白表達(dá)表 1-2 LPS 致傷組大鼠肺組織 GR mRNA 和蛋白表達(dá)變化(n=5， x ±s)組別 GR mRNA GR protein常對(duì)照組 4.02±0.09 3.75±0.25PS 致傷組1 h 3.97±0.12 3.59±0.202 h 1.56±0.11* 3.52±0.094 h 1.48±0.09* 1.25±0.15*8 h 1.65±0.15* 1.08±0.08*12 h 3.20±0.16#1.21±0.16*24 h 4.15±0.19 1.15±0.12*
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2005
【分類號(hào)】：R563.8

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2691348