發(fā)布時(shí)間：2020-05-27 07:31

【摘要】：實(shí)驗(yàn)一:高潮氣量通氣激活大鼠肺組織絲裂原活化蛋白激酶的時(shí)程變化 目的:研究高潮氣量通氣激活大鼠肺組織絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)的時(shí)程變化。 方法: 清潔級(jí)SD大鼠18只分6組,分別為對(duì)照組和高潮氣量機(jī)械通氣15min、30min、45min、60min、120min組(n=3)。機(jī)械通氣采用容量控制模式,潮氣量25ml/kg,呼氣末正壓 3 cmH2O,吸呼比1:2,呼吸頻率20次/分,吸入氧濃度100%。用Western免疫印跡法測(cè)定大鼠肺組織MAPK家族成員[細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(ERK)、p38和c-jun N末端激酶(JNK)]磷酸化強(qiáng)度的變化。 結(jié)果:肺組織磷酸化ERK1/2表達(dá)在機(jī)械通氣30min時(shí)最高(331.5±25.8),顯著高于對(duì)照組和機(jī)械通氣15min(分別為69.8±1.1和94.2±3.1,P均(0.05)。與機(jī)械通氣30min比較,機(jī)械通氣45min、60min及120min時(shí),磷酸化ERK1/2表達(dá)逐漸降低,但120min時(shí)(149.4±31.4)仍顯著高于對(duì)照組(P(0.05)。肺組織磷酸化p38表達(dá)在機(jī)械通氣15min時(shí)為83±10,顯著高于對(duì)照組(51±4,P(0.05),30min時(shí)表達(dá)量最高(107±6),45min、60min及120min時(shí)逐漸降低,60min及120min(62±6、65±8)已降至對(duì)照組水平。對(duì)照組及機(jī)械通氣各組中肺組織磷酸化JNK均未表達(dá)。 結(jié)論:高潮氣量機(jī)械通氣激活肺組織ERK1/2和p38,并且呈現(xiàn)時(shí)間依賴性。 WP=5 實(shí)驗(yàn)二 高潮氣量通氣大鼠肺組織絲裂原活化蛋白激酶的激活 及脂多糖增敏作用 目的:研究高潮氣量通氣大鼠肺組織絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)的激活及脂多糖(LPS)的增敏作用。 方法:清潔級(jí)SD大鼠56只分成4組,(1) 高潮氣量通氣組(HV):潮氣量(VT) 25ml/kg,呼氣末正壓(PEEP) 3cmH2O,呼吸頻率(f) 20次/分,吸呼比(I:E) 1:2,吸入氧濃度(FiO2) 100%;(2) 正常潮氣量通氣組(LV):VT 8ml/kg,PEEP 3cmH2O,f 50次/分,I:E 1:2,FiO2 100%;(3) 高潮氣量通氣+LPS組(HVL):通氣實(shí)施前20min靜脈注射LPS 6mg/kg,通氣條件同HV組;(4) 正常潮氣量通氣+LPS組(LVL):通氣實(shí)施前20min靜脈注射LPS 6mg/kg,通氣條件同LV組。每組通氣時(shí)間分別為15min (n=6)和30min (n=8)。Western免疫印跡法測(cè)定大鼠肺組織磷酸化MAPK家族成員[細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(ERK)、p38和c-jun N末端激酶(JNK)]表達(dá),逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法(RT-PCR)檢測(cè)肺組織巨噬細(xì)胞炎癥蛋白(MIP)-2和腫瘤壞死因子(TNF)-( mRNA表達(dá)。 結(jié)果: (1) 高潮氣量機(jī)械通氣促進(jìn)ERK1/2和p38激活 機(jī)械通氣30min HV組肺組織磷酸化ERK1/2表達(dá)(221±25)顯著高于LV組(135±20,P(0.05),HV組肺組織磷酸化p38表達(dá)(268±109)較LV組(182±44)也顯著增加(P(0.05),15min時(shí)HV和LV組磷酸化ERK1/2和p38表達(dá)均無(wú)顯著差異(P均0.05)。HV和LV組機(jī)械通氣15和30min肺組織磷酸化JNK均未表達(dá)。 (2) LPS對(duì)高潮氣量機(jī)械通氣引起的ERK1/2和p38激活具有增敏效應(yīng) 機(jī)械通氣15min時(shí)LVL組肺組織磷酸化ERK1/2為403±39,顯著高于LV組(210±36,P(0.05),HVL組肺組織磷酸化ERK1/2表達(dá)(456±49)亦顯著高于HV組(197±28,P(0.05)。機(jī)械通氣30min時(shí),LVL組肺組織磷酸化ERK1/2 (252±22)較LV組(135±20)顯著增加(P(0.05),但HVL組肺組織磷酸化ERK1/2表達(dá)與HV組比較,差異無(wú)顯著性(P0.05)。 機(jī)械通氣15min時(shí)HVL組肺組織磷酸化p38表達(dá)(243±89)顯著高于HV組(161±42,P(0.05),而30min時(shí)HVL組(132±44)較HV組(268±109)顯著減少(P(0.05)。 WP=6 與LV組比較,LVL組肺組織磷酸化p38表達(dá)在機(jī)械通氣15和30min均無(wú)明顯差異(P均0.05)。 HVL和LVL組機(jī)械通氣15和30min肺組織磷酸化JNK均未表達(dá)。 (3) 高潮氣量機(jī)械通氣增加肺組織炎癥介質(zhì)的表達(dá) 機(jī)械通氣30min時(shí),HV組肺組織MIP-2 mRNA表達(dá)(95±28)顯著高于LV組(68±5,P(0.05)。機(jī)械通氣15min時(shí),HV組和LV組肺組織MIP-2 mRNA表達(dá)無(wú)顯著差異(P0.05)。HV組和LV組機(jī)械通氣30min時(shí)肺組織MIP-2 mRNA表達(dá)均明顯高于15min(P均0.05)。與LV組比較,HV組肺組織TNF-( mRNA表達(dá)在機(jī)械通氣15min和30min均無(wú)顯著差異(P均0.05)。 (4) LPS對(duì)高潮氣量機(jī)械通氣引起的炎癥介質(zhì)表達(dá)有增敏作用 機(jī)械通氣15min時(shí),LVL組肺組織MIP-2 mRNA表達(dá)為99±3,顯著高于LV組(47±8,P(0.05),HVL組肺組織MIP-2 mRNA表達(dá)(106±19)亦顯著高于HV組(46±11,P(0.05)。機(jī)械通氣30min時(shí),LVL組肺組織MIP-2 mRNA表達(dá)(116±30)較LV組(68±5)顯著增加(P(0.05),但HVL組肺組織MIP-2 mRNA表達(dá)與HV組比較,無(wú)顯著差異(P0.05)。 機(jī)械通氣15min時(shí),LVL組肺組織TNF-(mRNA表達(dá)(92±6)顯著高于LV組(73±7,P(0.05),HVL組肺組織TNF-(mRNA表達(dá)(95±11)也顯著高于HV組(78±3,P(0.05)。機(jī)械通氣30min時(shí),LVL組肺組織TNF-(mRNA表達(dá)(104±13)與LV組(65±20)比較有顯著增加(P(0.05),HVL組肺組織TNF-(mRNA表達(dá)(103±11)也顯著高于HV組(70±13,P(0.05)。 結(jié)論:高潮氣量通氣和LPS均促進(jìn)肺組織ERK1/2和p38激活,LPS對(duì)高潮氣量通氣引起的ERK1/2和p38激活具有增敏作用,同時(shí)炎癥介質(zhì)表達(dá)增加,加劇炎癥反應(yīng)。
【學(xué)位授予單位】：東南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2004
【分類號(hào)】：R563.8

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