發(fā)布時間：2020-05-11 14:13

【摘要】：目的：通過觀察腹腔注射白介素10(IL-10)對哮喘小鼠肺組織中子宮珠蛋白相關蛋白1(UGRP1)和肺泡灌洗液(BALF)中白介素5(IL-5)表達的影響,探討IL-10、UGRP1及IL-5在哮喘發(fā)病中的作用機制及其相互關系。方法：將40只Balb/c雌性小鼠,隨機分為哮喘模型組(X)(n=8只)、IL-10干預組(B1,B2,B3)(n=24只)、空白對照組(K)(n=8只)。哮喘模型組：每只小鼠于第1天和第8天腹腔注射0.2ml抗原混懸液(雞卵清蛋白OVA100ug+氫氧化鋁2mg+生理鹽水0.2ml)致敏,第14天開始激發(fā),經(jīng)0.75%戊巴比妥麻醉后,采用鼻腔滴入法,每只小鼠滴入40u12%OVA溶液(即2gOVA+100ml生理鹽水)連續(xù)7天。IL-10干預組(B 1,B2,B3)：致敏同哮喘模型組,在激發(fā)前30分鐘腹腔注射0.125%IL-10溶液(10ugIL-10+400ml生理鹽水)。注射量依次為：B1組：0.02ml(含IL-1025ng)；B2組：0.06ml(含75ng IL-10)；B3組：0.6ml(含750ng IL-10)�？瞻讓φ战M：第1天和第8天腹腔注射0.2ml生理鹽水,第14天開始在0.75%戊巴比妥麻醉后用40ul生理鹽水滴鼻,連續(xù)7天。于末次激發(fā)24小時后處死小鼠。采用HE染色評估小鼠肺組織的一般形態(tài)和氣道炎性細胞浸潤情況,用免疫組織化學檢測小鼠肺組織中UGRP1的表達,行實時熒光定量PCR法檢測小鼠肺組織中UGRP1和內參基因(GAPDH)的mRNA含量,并用酶聯(lián)免疫夾心法(ELISA)檢測肺泡灌洗液中UGRP1和IL-5的含量。各組數(shù)據(jù)均用x士s表示,不同組間行單因素方差分析,肺泡灌洗液中UGRP1和IL-5相關性用直線相關分析,用SPSS13軟件系統(tǒng)統(tǒng)計處理數(shù)據(jù),p0.05表明存在顯著差異。結果：(1)肺組織病理組織學HE染色：K組小氣管黏膜無明顯水腫,管腔光滑、無閉塞,小氣道及小血管周圍未見炎性細胞浸潤。X組可見小氣道及小血管周圍有大量的炎性細胞浸潤,粘膜及粘膜下層水腫,肺泡腔可見嗜酸性粒細胞、單核細胞及溢出的紅細胞等。B1、B2及B3組肺泡結構清晰,肺泡腔內及肺泡間質炎性細胞和滲出物減少,支氣管粘膜上皮基本完整,可見有明顯的炎癥吸收,且B1組炎癥吸收較差,B3組較明顯。(2)免疫組織化學檢測肺組織UGRP1表達：K組肺組織氣道上皮UGRP1表達呈強陽性,X組UGRP1表達呈陰性,B1、B2及B3組UGRP1表達呈陽性,其中B 1組較弱,B3組較強；(3)肺組織UGRP1mRNA的表達：肺組織UGRP1mRNA在K組中的表達最高,在X組中的表達顯著降低,而B 1、B2及B3組中的表達則介于前兩組之間,且隨著IL-10劑量的增加,UGRP1的表達也增加。各組之間進行兩兩比較,存在顯著差異(P0.05)。(4)肺泡灌洗液中UGRP1及IL-5的含量：1)UGRP1含量：K組BALF由UGRP1含量最高,X組UGRP1含量最低,而B1、B2及B3組UGRP1含量介于前兩組之間,且其含量隨著IL-10增加而增加。X組BALF中UGRP1含量明顯低于B 1、B2、B3組及K組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)；B1組UGRP1含量明顯低于B2,B3、K組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),其余組間UGRP1差異不明顯(P0.05)。2)IL-5的含量：K組BALF中IL-5含量最低,X組IL-5含量最高,B1、B2、B3組IL-5含量介于兩者之間,且其含量隨著IL-10增加而減少。X組IL-5含量明顯高于K組和B1、B2、B3組(P0.05)；B1、B2、B3、K組之間進行比較,IL-5含量無明顯差異(P0.05)。結論：(1)哮喘組小鼠肺組織及肺泡灌洗液UGRP1表達顯著降低,而肺泡灌洗液IL-5含量明顯增加。(2)IL-10能增加哮喘小鼠BALF中UGRP1的含量,誘導小鼠肺組織UGRP1及其mRNA的表達,降低肺泡灌洗液中IL-5的含量水平,從而達到抑制肺部炎癥反應。
【學位授予單位】：瀘州醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2011
【分類號】：R562.25

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本文編號：2658575