【摘要】：目的：通過(guò)觀察腹腔注射白介素10(IL-10)對(duì)哮喘小鼠肺組織中子宮珠蛋白相關(guān)蛋白1(UGRP1)和肺泡灌洗液(BALF)中白介素5(IL-5)表達(dá)的影響,探討IL-10、UGRP1及IL-5在哮喘發(fā)病中的作用機(jī)制及其相互關(guān)系。方法：將40只Balb/c雌性小鼠,隨機(jī)分為哮喘模型組(X)(n=8只)、IL-10干預(yù)組(B1,B2,B3)(n=24只)、空白對(duì)照組(K)(n=8只)。哮喘模型組：每只小鼠于第1天和第8天腹腔注射0.2ml抗原混懸液(雞卵清蛋白OVA100ug+氫氧化鋁2mg+生理鹽水0.2ml)致敏,第14天開(kāi)始激發(fā),經(jīng)0.75%戊巴比妥麻醉后,采用鼻腔滴入法,每只小鼠滴入40u12%OVA溶液(即2gOVA+100ml生理鹽水)連續(xù)7天。IL-10干預(yù)組(B 1,B2,B3)：致敏同哮喘模型組,在激發(fā)前30分鐘腹腔注射0.125%IL-10溶液(10ugIL-10+400ml生理鹽水)。注射量依次為：B1組：0.02ml(含IL-1025ng)；B2組：0.06ml(含75ng IL-10)；B3組：0.6ml(含750ng IL-10)�？瞻讓�(duì)照組：第1天和第8天腹腔注射0.2ml生理鹽水,第14天開(kāi)始在0.75%戊巴比妥麻醉后用40ul生理鹽水滴鼻,連續(xù)7天。于末次激發(fā)24小時(shí)后處死小鼠。采用HE染色評(píng)估小鼠肺組織的一般形態(tài)和氣道炎性細(xì)胞浸潤(rùn)情況,用免疫組織化學(xué)檢測(cè)小鼠肺組織中UGRP1的表達(dá),行實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)小鼠肺組織中UGRP1和內(nèi)參基因(GAPDH)的mRNA含量,并用酶聯(lián)免疫夾心法(ELISA)檢測(cè)肺泡灌洗液中UGRP1和IL-5的含量。各組數(shù)據(jù)均用x士s表示,不同組間行單因素方差分析,肺泡灌洗液中UGRP1和IL-5相關(guān)性用直線相關(guān)分析,用SPSS13軟件系統(tǒng)統(tǒng)計(jì)處理數(shù)據(jù),p0.05表明存在顯著差異。結(jié)果：(1)肺組織病理組織學(xué)HE染色：K組小氣管黏膜無(wú)明顯水腫,管腔光滑、無(wú)閉塞,小氣道及小血管周?chē)匆?jiàn)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。X組可見(jiàn)小氣道及小血管周?chē)写罅康难仔约?xì)胞浸潤(rùn),粘膜及粘膜下層水腫,肺泡腔可見(jiàn)嗜酸性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞及溢出的紅細(xì)胞等。B1、B2及B3組肺泡結(jié)構(gòu)清晰,肺泡腔內(nèi)及肺泡間質(zhì)炎性細(xì)胞和滲出物減少,支氣管粘膜上皮基本完整,可見(jiàn)有明顯的炎癥吸收,且B1組炎癥吸收較差,B3組較明顯。(2)免疫組織化學(xué)檢測(cè)肺組織UGRP1表達(dá)：K組肺組織氣道上皮UGRP1表達(dá)呈強(qiáng)陽(yáng)性,X組UGRP1表達(dá)呈陰性,B1、B2及B3組UGRP1表達(dá)呈陽(yáng)性,其中B 1組較弱,B3組較強(qiáng)；(3)肺組織UGRP1mRNA的表達(dá)：肺組織UGRP1mRNA在K組中的表達(dá)最高,在X組中的表達(dá)顯著降低,而B(niǎo) 1、B2及B3組中的表達(dá)則介于前兩組之間,且隨著IL-10劑量的增加,UGRP1的表達(dá)也增加。各組之間進(jìn)行兩兩比較,存在顯著差異(P0.05)。(4)肺泡灌洗液中UGRP1及IL-5的含量：1)UGRP1含量：K組BALF由UGRP1含量最高,X組UGRP1含量最低,而B(niǎo)1、B2及B3組UGRP1含量介于前兩組之間,且其含量隨著IL-10增加而增加。X組BALF中UGRP1含量明顯低于B 1、B2、B3組及K組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；B1組UGRP1含量明顯低于B2,B3、K組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),其余組間UGRP1差異不明顯(P0.05)。2)IL-5的含量：K組BALF中IL-5含量最低,X組IL-5含量最高,B1、B2、B3組IL-5含量介于兩者之間,且其含量隨著IL-10增加而減少。X組IL-5含量明顯高于K組和B1、B2、B3組(P0.05)；B1、B2、B3、K組之間進(jìn)行比較,IL-5含量無(wú)明顯差異(P0.05)。結(jié)論：(1)哮喘組小鼠肺組織及肺泡灌洗液UGRP1表達(dá)顯著降低,而肺泡灌洗液IL-5含量明顯增加。(2)IL-10能增加哮喘小鼠BALF中UGRP1的含量,誘導(dǎo)小鼠肺組織UGRP1及其mRNA的表達(dá),降低肺泡灌洗液中IL-5的含量水平,從而達(dá)到抑制肺部炎癥反應(yīng)。
【學(xué)位授予單位】：瀘州醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類(lèi)號(hào)】：R562.25

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本文編號(hào)：2658575