從T細胞受體δ鏈多態(tài)性及T細胞凋亡的改變探討支氣管哮喘的慢性氣道炎癥機制
發(fā)布時間:2020-05-10 17:11
【摘要】:目的: γδT細胞與支氣管哮喘的慢性氣道炎癥的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān),本研究旨在通過檢測支氣管哮喘患者外周血及氣道內(nèi)γδT細胞百分率,Vδ_1~Vδ_3亞群的表達和多態(tài)性,探討γδT細胞在哮喘氣道慢性炎癥產(chǎn)生或延續(xù)機制中的作用,以期為支氣管哮喘的新免疫療法提供理論指導和實驗依據(jù)。 方法: 我們選擇間歇發(fā)作或輕~中度非急性發(fā)作期哮喘患者7例,年齡、性別相匹配的對照8例,其中2例偶爾痰帶血絲但多項檢查未見胸腔內(nèi)病變,4例為早期的周圍型肺癌患者,,1例因左主支氣管陳舊性內(nèi)膜結(jié)核導致瘢痕狹窄,1例因食道反流導致慢性咳嗽。全部納入的研究對象留清晨空腹外周血8ml,同時行纖維支氣管鏡檢及支氣管肺泡灌洗,計數(shù)灌洗液中細胞總數(shù)及分類計數(shù)。 實驗方法為:(1)采用免疫熒光染色和流式細胞分析技術(shù)檢測外周血及灌洗液中CD_4~+、CD_8~+T細胞和γδT細胞的百分率;(2)用逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈式反應(RT-PCR)法分析研究對象的外周血及灌洗液中T細胞受體Vδ基因(Vδ_1~Vδ_3)亞族的表達,并通過基因掃描分析確定各Vδ亞族的相對取用頻率及T淋巴細胞的克隆狀態(tài);(3)對單克隆表達的Vδ基因,進一步行CDR_3區(qū)片段的亞克隆及測序。 結(jié)果: 1)哮喘患者在纖維支氣管鏡直視下均可見氣道粘膜炎癥改變,支氣管肺泡灌洗液(BALF)細胞分類計數(shù)顯示淋巴細胞及嗜酸細胞比例較對照明顯增加。兩組外周血及灌洗液中CD_4~+和CD_8~+T細胞亞群分布無顯著差異。哮喘患者灌洗液中γδT細胞比例(7.8±4.7%)較對照組(3.1±2.5%)顯著增加(p<0.05)。
【圖文】:
圖4.流式細胞分析檢測外周血和BALYF6TC+RT細胞比例Fig4.Pereenatgeof泌TeellsinPeriPhearlbloodnadBALFasmeasuerdbyfioweytometyr左列:哮喘患者外周血(上圖)及BALF(下圖)檢測圖右列:對照者外周血(上圖)及BALF(下圖)檢測圖
)l哮喘組與對照組的T淋巴細胞在未予PHA一P刺激時,體外培養(yǎng)24小時后,細胞表面Fas的表達無顯著差異,而予PHA一P刺激后哮喘組Fas的表達明顯低于對照(見表4、圖4a、4b)。表4.外周血T淋巴細胞Fas表達情況幾b4.ExPressio從ofFasereePtoronhtePeriPheralbloodTI加nrPhoyctes研究對象未刺激病例組對照組刺激病例組對照組F+as細胞比例(%)44.8士20.750.8士16.767.8公4.3.88.2士10.3*與對照組相比p<.005圖4a.T細胞Fas表達情況Fig4a.ExprssionofFasreeeptoronTeells
【學位授予單位】:中國協(xié)和醫(yī)科大學
【學位級別】:博士
【學位授予年份】:2000
【分類號】:R562.25
本文編號:2657626
【圖文】:
圖4.流式細胞分析檢測外周血和BALYF6TC+RT細胞比例Fig4.Pereenatgeof泌TeellsinPeriPhearlbloodnadBALFasmeasuerdbyfioweytometyr左列:哮喘患者外周血(上圖)及BALF(下圖)檢測圖右列:對照者外周血(上圖)及BALF(下圖)檢測圖
)l哮喘組與對照組的T淋巴細胞在未予PHA一P刺激時,體外培養(yǎng)24小時后,細胞表面Fas的表達無顯著差異,而予PHA一P刺激后哮喘組Fas的表達明顯低于對照(見表4、圖4a、4b)。表4.外周血T淋巴細胞Fas表達情況幾b4.ExPressio從ofFasereePtoronhtePeriPheralbloodTI加nrPhoyctes研究對象未刺激病例組對照組刺激病例組對照組F+as細胞比例(%)44.8士20.750.8士16.767.8公4.3.88.2士10.3*與對照組相比p<.005圖4a.T細胞Fas表達情況Fig4a.ExprssionofFasreeeptoronTeells
【學位授予單位】:中國協(xié)和醫(yī)科大學
【學位級別】:博士
【學位授予年份】:2000
【分類號】:R562.25
【參考文獻】
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1 李偉杰;T細胞受體及其與支氣管哮喘[J];國外醫(yī)學.呼吸系統(tǒng)分冊;1999年02期
2 彭黎明;六種細胞凋亡檢測方法的比較[J];中華病理學雜志;1999年01期
3 薛建敏,徐永健,張珍祥,沈關(guān)心,熊盛道;哮喘患者外周血T淋巴細胞凋亡及其分子機制[J];中華結(jié)核和呼吸雜志;1999年09期
4 彭黎明;細胞凋亡檢測的研究進展[J];中華醫(yī)學檢驗雜志;1996年06期
本文編號:2657626
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