從T細(xì)胞受體δ鏈多態(tài)性及T細(xì)胞凋亡的改變探討支氣管哮喘的慢性氣道炎癥機(jī)制
發(fā)布時(shí)間:2020-05-10 17:11
【摘要】:目的: γδT細(xì)胞與支氣管哮喘的慢性氣道炎癥的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān),本研究旨在通過(guò)檢測(cè)支氣管哮喘患者外周血及氣道內(nèi)γδT細(xì)胞百分率,Vδ_1~Vδ_3亞群的表達(dá)和多態(tài)性,探討γδT細(xì)胞在哮喘氣道慢性炎癥產(chǎn)生或延續(xù)機(jī)制中的作用,以期為支氣管哮喘的新免疫療法提供理論指導(dǎo)和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法: 我們選擇間歇發(fā)作或輕~中度非急性發(fā)作期哮喘患者7例,年齡、性別相匹配的對(duì)照8例,其中2例偶爾痰帶血絲但多項(xiàng)檢查未見(jiàn)胸腔內(nèi)病變,4例為早期的周圍型肺癌患者,,1例因左主支氣管陳舊性內(nèi)膜結(jié)核導(dǎo)致瘢痕狹窄,1例因食道反流導(dǎo)致慢性咳嗽。全部納入的研究對(duì)象留清晨空腹外周血8ml,同時(shí)行纖維支氣管鏡檢及支氣管肺泡灌洗,計(jì)數(shù)灌洗液中細(xì)胞總數(shù)及分類計(jì)數(shù)。 實(shí)驗(yàn)方法為:(1)采用免疫熒光染色和流式細(xì)胞分析技術(shù)檢測(cè)外周血及灌洗液中CD_4~+、CD_8~+T細(xì)胞和γδT細(xì)胞的百分率;(2)用逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)法分析研究對(duì)象的外周血及灌洗液中T細(xì)胞受體Vδ基因(Vδ_1~Vδ_3)亞族的表達(dá),并通過(guò)基因掃描分析確定各Vδ亞族的相對(duì)取用頻率及T淋巴細(xì)胞的克隆狀態(tài);(3)對(duì)單克隆表達(dá)的Vδ基因,進(jìn)一步行CDR_3區(qū)片段的亞克隆及測(cè)序。 結(jié)果: 1)哮喘患者在纖維支氣管鏡直視下均可見(jiàn)氣道粘膜炎癥改變,支氣管肺泡灌洗液(BALF)細(xì)胞分類計(jì)數(shù)顯示淋巴細(xì)胞及嗜酸細(xì)胞比例較對(duì)照明顯增加。兩組外周血及灌洗液中CD_4~+和CD_8~+T細(xì)胞亞群分布無(wú)顯著差異。哮喘患者灌洗液中γδT細(xì)胞比例(7.8±4.7%)較對(duì)照組(3.1±2.5%)顯著增加(p<0.05)。
【圖文】:
圖4.流式細(xì)胞分析檢測(cè)外周血和BALYF6TC+RT細(xì)胞比例Fig4.Pereenatgeof泌TeellsinPeriPhearlbloodnadBALFasmeasuerdbyfioweytometyr左列:哮喘患者外周血(上圖)及BALF(下圖)檢測(cè)圖右列:對(duì)照者外周血(上圖)及BALF(下圖)檢測(cè)圖
)l哮喘組與對(duì)照組的T淋巴細(xì)胞在未予PHA一P刺激時(shí),體外培養(yǎng)24小時(shí)后,細(xì)胞表面Fas的表達(dá)無(wú)顯著差異,而予PHA一P刺激后哮喘組Fas的表達(dá)明顯低于對(duì)照(見(jiàn)表4、圖4a、4b)。表4.外周血T淋巴細(xì)胞Fas表達(dá)情況幾b4.ExPressio從ofFasereePtoronhtePeriPheralbloodTI加nrPhoyctes研究對(duì)象未刺激病例組對(duì)照組刺激病例組對(duì)照組F+as細(xì)胞比例(%)44.8士20.750.8士16.767.8公4.3.88.2士10.3*與對(duì)照組相比p<.005圖4a.T細(xì)胞Fas表達(dá)情況Fig4a.ExprssionofFasreeeptoronTeells
【學(xué)位授予單位】:中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2000
【分類號(hào)】:R562.25
本文編號(hào):2657626
【圖文】:
圖4.流式細(xì)胞分析檢測(cè)外周血和BALYF6TC+RT細(xì)胞比例Fig4.Pereenatgeof泌TeellsinPeriPhearlbloodnadBALFasmeasuerdbyfioweytometyr左列:哮喘患者外周血(上圖)及BALF(下圖)檢測(cè)圖右列:對(duì)照者外周血(上圖)及BALF(下圖)檢測(cè)圖
)l哮喘組與對(duì)照組的T淋巴細(xì)胞在未予PHA一P刺激時(shí),體外培養(yǎng)24小時(shí)后,細(xì)胞表面Fas的表達(dá)無(wú)顯著差異,而予PHA一P刺激后哮喘組Fas的表達(dá)明顯低于對(duì)照(見(jiàn)表4、圖4a、4b)。表4.外周血T淋巴細(xì)胞Fas表達(dá)情況幾b4.ExPressio從ofFasereePtoronhtePeriPheralbloodTI加nrPhoyctes研究對(duì)象未刺激病例組對(duì)照組刺激病例組對(duì)照組F+as細(xì)胞比例(%)44.8士20.750.8士16.767.8公4.3.88.2士10.3*與對(duì)照組相比p<.005圖4a.T細(xì)胞Fas表達(dá)情況Fig4a.ExprssionofFasreeeptoronTeells
【學(xué)位授予單位】:中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2000
【分類號(hào)】:R562.25
【參考文獻(xiàn)】
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1 李偉杰;T細(xì)胞受體及其與支氣管哮喘[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).呼吸系統(tǒng)分冊(cè);1999年02期
2 彭黎明;六種細(xì)胞凋亡檢測(cè)方法的比較[J];中華病理學(xué)雜志;1999年01期
3 薛建敏,徐永健,張珍祥,沈關(guān)心,熊盛道;哮喘患者外周血T淋巴細(xì)胞凋亡及其分子機(jī)制[J];中華結(jié)核和呼吸雜志;1999年09期
4 彭黎明;細(xì)胞凋亡檢測(cè)的研究進(jìn)展[J];中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志;1996年06期
本文編號(hào):2657626
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