【摘要】： 目的:研究纖溶酶原激活物抑制物-1(PA1-1)在脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的急性肺損傷中的表達水平及可能的作用機制。 方法:在體外實驗中,采用LPS刺激肺上皮細胞系A(chǔ)549,分別在4小時、8小時、12小時和24小時各時間點觀察PA1-1和其他炎癥介導(dǎo)基因在mRNA水平的表達改變。另外,采用不同劑量的LPS刺激A549細胞,進一步明確PA1-1與炎癥介質(zhì)LPS的劑量依賴性。在體內(nèi)實驗中,給予野生型C57/BL6小鼠氣管內(nèi)滴注LPS建立急性肺損傷的模型。通過ELISA測定了血漿中PA1-1的含量,并通過實時定量RT-PCR測定在各個時間點,PA1-1和其他炎癥介導(dǎo)基因的表達改變譜,從而揭示PA1-1在急性肺損傷中的作用和可能的機制。 結(jié)果:體外實驗結(jié)果顯示,A549細胞在LPS刺激后隨著時間的改變,PA1-1的表達水平顯著升高,在4小時其表達水平與生理鹽水對照組相比已達2.24倍,持續(xù)升高達12小時,24小時時恢復(fù)正常;在給予LPS1mg/ul刺激后12小時,隨著LPS的劑量增加,1ug/ml、5ug/ml和10ug/ml,PA1-1、MMP2和PPAR-γ的表達呈劑量依賴性。氣管內(nèi)滴注5mg/kg LPS,成功建立了急性肺損傷模型。血漿中PA1-1在LPS刺激后4小時顯著升高,24小時后更加明顯。同樣,隨著時間的改變,肺內(nèi)PA1-1 mRNA表達也隨之上調(diào),最高達28倍。同時,MMP9、IL-1β和NF-kB的mRNA水平也明顯升高,而PPAR-γ和MMP2的表達水平反之下降。 結(jié)論:在LPS誘導(dǎo)的急性肺損傷中,肺內(nèi)PA1-1 mRNA水平和血漿中含量在LPS刺激的早期即被顯著上調(diào),具有作為潛在的急性肺損傷早期診斷的標記物和治療靶點。
【圖文】：

p民如洲目。~一}閹沐知論味.萬加.，~油20圖3a，p一aotin的熔解曲線圖3b，p一aotin的擴增曲線在LPS，uglml刺激后隨時間LPS刺激后4小時開始，隊l一1PA!一，表達調(diào)節(jié)情況的表達水平與同時間點無LPS刺激的對照組相比明顯升高，達2.24倍，持續(xù)過表達到，2小時

復(fù)旦大學(xué)碩十學(xué)位論文步判斷該RNA是否有降解或在逆轉(zhuǎn)錄過程中有降解(圖3b)。Ct值越高，說明尸CR產(chǎn)物量越少，RNA或cONA合成過程中有所降解。Ct值過大的cONA將不再用于之后的其他基因表達的實驗。一J一‘一一一一一—一—一一~~一一一一一O弓一01弓扣玲加另p民如洲目。~一}閹沐知論味.萬加.，~油20圖3a，，p一aotin的熔解曲線圖3b，p一aotin的擴增曲線在LPS，uglml刺激后隨時間LPS刺激后4小時開始，隊l一1PA!一
【學(xué)位授予單位】：復(fù)旦大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號】：R563.8

【參考文獻】

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1 白春學(xué);急性呼吸窘迫綜合征診治中存在的問題和對策[J];中國臨床醫(yī)學(xué);2005年02期

2 白春學(xué);;急性肺損傷/呼吸窘迫綜合征進展[J];上海醫(yī)學(xué);2007年09期

本文編號：2633586