【摘要】：目的 研究淮南礦區(qū)塵肺結(jié)核患者感染的結(jié)核分枝桿菌L型katG、rpoB、rpsL基因的突變特點及規(guī)律,探討結(jié)核分枝桿菌L型耐藥性的產(chǎn)生與其相關(guān)耐藥基因突變之間的內(nèi)在聯(lián)系,以及聚合酶鏈反應(yīng).單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析(PCR-SSCP)方法的臨床應(yīng)用價值。 方法 選擇典型的塵肺結(jié)核患者,采集痰標(biāo)本進(jìn)行結(jié)核分枝桿菌L型培養(yǎng)和鑒定;提取結(jié)核分枝桿菌L型菌株的DNA,應(yīng)用PCR技術(shù)擴(kuò)增katG、rpoB、rpsL基因,并對分離的L型菌株進(jìn)行回復(fù)試驗及藥物敏感性檢測;通過單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析法(SSCP)比較結(jié)核分枝桿菌L型菌株與細(xì)菌型菌株的katG、rpoB、rpsL耐藥基因的差異,分析其突變規(guī)律。 結(jié)果 研究組 52例結(jié)核分枝桿菌L型感染的塵肺結(jié)核患者中,采用PCR-SSCP方法檢測katG、rpoB和rpsL基因,檢出率分別為57.70%(30/52)、65.38%(32/52)和40.38%(21/52)�；貜�(fù)試驗后,52株結(jié)核分枝桿菌L型中有41株回復(fù)為結(jié)核分枝桿菌細(xì)菌型,回復(fù)率為78.85%(41/52),回復(fù)后耐藥基因的檢測結(jié)果與回復(fù)前相同。采用常規(guī)藥敏試驗(AST)法檢測異煙肼(INH)、利福平(RFP)和鏈霉素(SM)的耐藥,檢出率分別為76.92%(40/52)、90.38%(47/52)和50.00%(26/52),但是耐藥株中有10株katG基因檢測陰性,15株rpoB基因檢測陰性,5株rpsL基因檢測陰性。其中多耐藥株40例(76.92%),包括同時耐三種藥的21例(40.38%),耐兩種藥的19例(36.54%),單耐藥株12例(23.08%),耐藥率100%。PCR-SSCP方法檢測出3個基因聯(lián)合突變的有15株,與AST法的符合率為71.43%(15/21),檢出2個基因突變的有16株,符合率為84.21%(16/19),檢出1個基因突變的有6株,符合率為50.00%(6/12)。 對照組 28例結(jié)核分枝桿菌細(xì)菌型感染的塵肺結(jié)核患者中,采用PCR-SSCP方法檢測katG、rpoB和rpsL基因,檢出率分別為42.86%(12/28)、42.86%(12/28)和32.14%(9/28)。采用AST法檢測INH、RFP和SM的耐藥,檢出率分別為64.23%(18/28)、60.71%(17/28)和53.57%(15/28),在耐藥株中有6株katG基因檢測陰性,5株rpoB基因檢測陰性,6株rpsL基因檢測陰性。其中多耐藥株20例(71.43%),包括同時耐三種藥的12例(42.86%),耐兩種藥的8例(28.57%),單耐藥株6例(21.43%),敏感株2例,耐藥率92.086%。 結(jié)核分枝桿菌L型與細(xì)菌型采用PCR-SSCP方法檢測的結(jié)果分別做χ~2檢驗,發(fā)現(xiàn)katG、rpoB和rpsL基因檢測二者之間均無顯著差異(P0.05);采用AST
【學(xué)位授予單位】：安徽理工大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2006
【分類號】：R521

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2620985