【摘要】：研究目的急性肺損傷/急性呼吸窘迫綜合征是多器官功能障礙綜合征在肺部的重要臨床表現(xiàn)。急性肺損傷的病因包括膿毒癥、燒傷、重癥肺炎或者嚴重創(chuàng)傷等。其病理生理特點是肺泡毛細血管內(nèi)皮-上皮屏障受損,炎癥細胞浸潤,失控的炎癥反應(yīng)以及氧化應(yīng)激損傷等。雖然研究人員對急性肺損傷的早期診斷和治療策略進行了深入研究,但急性肺損傷的發(fā)病率和死亡率一直居高不下,這對公共衛(wèi)生健康造成極大影響。哇巴因(Ouabain)是一種鈉鉀ATP酶抑制劑,曾用于治療充血性心力衰竭。近年來,有較多研究發(fā)現(xiàn)哇巴因在器官損傷、免疫反應(yīng)及腫瘤治療中發(fā)揮重要作用。目前,哇巴因在急性肺損傷中是否具有保護作用還未見報道。本研究的目的是探討哇巴因是否抑制脂多糖(LPS)誘導的急性肺損傷,并初步探尋其潛在機制。研究方法8-12周雄性C57BL/6小鼠(20g-25g)隨機分為三組:對照組(Control);肺損傷組(LPS);哇巴因組(LPS+OUB)。對照組和肺損傷組小鼠腹腔注射無菌PBS溶液,連續(xù)3天;哇巴因組小鼠腹腔注射哇巴因,連續(xù)3天。第3天腹腔注射哇巴因1 h后,肺損傷組和哇巴因組小鼠在七氟醚麻醉下,經(jīng)鼻吸入溶解于無菌PBS的LPS溶液,對照組小鼠吸入等體積PBS溶液。LPS吸入6 h和24 h后,使用二氧化碳吸入法處死小鼠,收集各組小鼠肺組織和肺泡灌洗液進行肺損傷相關(guān)指標檢測。實驗結(jié)果1.LPS處理6 h和24 h后,肺組織HE染色病理切片顯示肺損傷組小鼠肺間質(zhì)水腫、出血、肺間隔增厚或受損以及顯著的炎細胞浸潤;哇巴因組小鼠的肺組織HE染色切片顯示肺組織病變程度減輕。肺損傷病理評分也表明哇巴因組病理評分顯著低于肺損傷組,這說明哇巴因可降低LPS造成的肺組織損傷。2.LPS顯著增加小鼠肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1β和IL-6水平;而哇巴因可降低肺泡灌洗液中上述細胞因子的含量。qRT-PCR檢測結(jié)果表明,LPS可致小鼠肺組織TNF-α、IL-1β和IL-6的mRNA表達升高,哇巴因可抑制上述細胞因子的mRNA水平。3.LPS處理后,小鼠肺組織濕/干比升高,哇巴因可改善ALI小鼠的濕/干比;LPS可顯著增加小鼠支氣管肺泡灌洗液蛋白含量,而哇巴因可減少小鼠支氣管肺泡灌洗液蛋白含量;Evans藍尾靜脈注射1 h后,肺損傷組小鼠肺組織Evans藍含量最高,而哇巴因可顯著下調(diào)肺組織Evans藍的含量。4.與對照組相比,肺損傷組小鼠肺泡灌洗液總細胞數(shù)、中性粒細胞和巨噬細胞比例顯著增加,哇巴因可一定程度減少這些細胞浸潤。此外,哇巴因也能降低小鼠肺組織MPO活性。5.肺損傷組小鼠肺組織NF-κB p65的磷酸化水平顯著高于對照組,哇巴因可降低肺組織NF-κB p65的磷酸化水平;哇巴因組小鼠肺組織磷酸化的ERK、JNK和p38表達高于對照組,但低于肺損傷組。結(jié)論哇巴因可改善LPS誘導的小鼠急性肺損傷嚴重程度,其機制可能與哇巴因抑制ERK、JNK、p38和NF-κB p65磷酸化水平相關(guān),從而調(diào)控TNF-α、IL-1β和IL-6等炎癥因子分泌并抑制炎性細胞浸潤。
【圖文】：

圖 1 哇巴因?qū)?LPS 誘導的急性肺損傷小鼠肺組織鏡下病理表現(xiàn)及病理評分A：LPS 處理 6 h；B：LPS 處理 24 h；C：LPS 處理 6 h 病理評分；D：LPS 處理 24 h 病# P<0.05，##P<0.01 vs Control group; *P<0.05 vs LPS group巴因?qū)?LPS 誘導的急性肺損傷小鼠肺組織通透性的(一) 烘干法檢測小鼠肺組織濕/干比測肺組織濕/干比可評估肺組織液體滲出以及肺組織水腫情況，這也可組織通透性，是急性肺損傷的一個重要病理表現(xiàn)[17]。如圖所示（圖 2導急性肺損傷 6 h 和 24 h 后，相比于肺損傷組，哇巴因組小鼠肺組織濕定程度的降低（P＜0.05），這證明哇巴因有效緩解 LPS 造成的肺水腫。

圖 1 哇巴因?qū)?LPS 誘導的急性肺損傷小鼠肺組織鏡下病理表現(xiàn)及病理評分A：LPS 處理 6 h；B：LPS 處理 24 h；C：LPS 處理 6 h 病理評分；D：LPS 處理 24 h 病理評# P<0.05，##P<0.01 vs Control group; *P<0.05 vs LPS group巴因?qū)?LPS 誘導的急性肺損傷小鼠肺組織通透性的影) 烘干法檢測小鼠肺組織濕/干比肺組織濕/干比可評估肺組織液體滲出以及肺組織水腫情況，這也可進一織通透性，是急性肺損傷的一個重要病理表現(xiàn)[17]。如圖所示（圖 2A, B急性肺損傷 6 h 和 24 h 后，相比于肺損傷組，哇巴因組小鼠肺組織濕/干程度的降低（P＜0.05），這證明哇巴因有效緩解 LPS 造成的肺水腫以及
【學位授予單位】：中國人民解放軍海軍軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R563

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 張明娟,呂卓人;特異性哇巴因結(jié)合肽的篩選及其結(jié)合活性的測定[J];中國藥理學通報;2003年03期

2 陳芷芳,廖仕湖,羅潛;川芎嗪對哇巴因及氯化鈣所致心律失常的影響[J];中國藥理學通報;1988年02期

3 于曉江,臧偉進,李孝光,劉傳鎬;硫酸鎂對哇巴因誘發(fā)豚鼠心臟自發(fā)電活動的生理效應(yīng)[J];西安交通大學學報(醫(yī)學版);1988年04期

4 張麗芬;鐘玲;劉建軍;羅潛;;硫酸鋅對哇巴因毒性的影響[J];暨南理醫(yī)學報(醫(yī)學專版);1988年02期

5 李鳳林,周效平,李文漢;鹽酸小檗胺對哇巴因心臟毒性的保護作用[J];中國藥理學與毒理學雜志;1989年01期

6 黃仁彪;羅潛;;某些自由基清除劑對哇巴因致豚鼠心律失常的影響——自由基可能參與洋地黃類的毒性過程[J];暨南大學學報(自然科學與醫(yī)學版);1989年04期

7 陳芷芳;季曉玲;羅潛;;某些自由基清除劑對抗哇巴因致豚鼠心律失常的研究(簡報)[J];暨南大學學報(自然科學與醫(yī)學版);1989年04期

8 馬可為,袁育康,范桂香,呂卓人,王軍陽,李建國,任會勛;抗哇巴因單克隆抗體的制備及初步鑒定[J];西北藥學雜志;2005年05期

9 葛蘅,呂卓人,于汶,張漢偉;哇巴因濃度檢測方法與評估[J];中國實驗診斷學;1999年03期

10 胡天圣;;睫狀上皮中對哇巴因敏感的腺嘌呤核苷三磷酸酶的定位[J];醫(yī)學文摘(眼科學);1965年02期

相關(guān)會議論文 前10條

1 任延平;葛蘅;呂卓人;;哇巴因引起大鼠血管內(nèi)皮細胞結(jié)構(gòu)和功能損害[A];中華醫(yī)學會心血管病分會第八次全國心血管病學術(shù)會議匯編[C];2004年

2 占躍晨;王燕;邵榮光;王真;;哇巴因誘導腫瘤細胞自噬及相關(guān)激酶信號通路的研究[A];第八屆中國腫瘤學術(shù)大會暨第十三屆海峽兩岸腫瘤學術(shù)會議論文匯編[C];2014年

3 楊磊;李娟;歐陽建;;低濃度哇巴因調(diào)控Jurkat細胞增殖與凋亡的實驗研究[A];第13屆全國實驗血液學會議論文摘要[C];2011年

4 金潤銘;白燕;熊安秀;林雯;余慧;吳曉燕;費洪寶;;MAPK信號通路參與哇巴因誘導Jurkat細胞的增殖[A];湖北省遺傳學會第七次代表大會暨學術(shù)討論會論文摘要集[C];2004年

5 王騰;黃從新;江洪;唐其柱;楊波;;家兔左心房后壁心肌細胞瞬時外向鉀電流和L-型鈣電流的特征及哇巴因?qū)ζ溆绊慬A];中華醫(yī)學會第11次心血管病學術(shù)會議論文摘要集[C];2009年

6 陳敏敏;李娟;歐陽建;;低劑量哇巴因誘導血液系統(tǒng)惡性腫瘤凋亡機制的實驗研究[A];第13屆全國實驗血液學會議論文摘要[C];2011年

7 商黔惠;吳澤兵;姜黔峰;張貴海;李成浩;;哇巴因和心鈉素對大鼠動脈平滑肌細胞分泌血管緊張素Ⅱ的影響[A];第十三次全國心血管病學術(shù)會議論文集[C];2011年

8 龔冬梅;單宏麗;董德利;周宇宏;楊寶峰;;哇巴因和烏頭堿誘發(fā)大鼠心律失常的作用靶點研究[A];2002全國青年藥理學英文學術(shù)會議論文匯編[C];2002年

9 楊輝;周遠大;何海霞;王弛;;果糖二磷酸鉀鹽對哇巴因誘導豚鼠心律失常的治療作用研究[A];2004年中國西部藥學論壇論文匯編（上冊）[C];2004年

10 徐佳偉;金潤銘;王艷榮;田莉;劉苗;;Bcl-2基因家族參與哇巴因調(diào)節(jié)白血病細胞增殖的研究[A];第八屆全國兒童腫瘤學術(shù)會議論文匯編[C];2009年

相關(guān)博士學位論文 前5條

1 李欣;哇巴因特異性調(diào)節(jié)細胞生長與Na~+/K~+-ATP酶表達的關(guān)系[D];華中科技大學;2009年

2 徐佳偉;哇巴因調(diào)節(jié)白血病細胞增殖的作用與相關(guān)分子機制的研究[D];華中科技大學;2009年

3 李艷;哇巴因致大鼠視網(wǎng)膜內(nèi)核層變性與再生及明膠酶的調(diào)控作用[D];復旦大學;2009年

4 尹永強;�；撬徭V抗烏頭堿、哇巴因誘發(fā)心肌細胞心律失常的電生理學研究[D];天津醫(yī)科大學;2012年

5 劉相菊;GSPE對哇巴因高血壓大鼠靶器官的保護機制研究[D];山東大學;2011年

相關(guān)碩士學位論文 前10條

1 王昌理;哇巴因?qū)PS致急性肺損傷的保護作用及潛在機制研究[D];中國人民解放軍海軍軍醫(yī)大學;2018年

2 陳國浩;哇巴因?qū)Υ笫笮呐K的毒性作用分析[D];山西醫(yī)科大學;2017年

3 趙臨;�；撬徭V抗哇巴因誘發(fā)心肌細胞心律失常的電生理學研究[D];天津醫(yī)科大學;2010年

4 張倩;哇巴因誘導Jeko-1細胞凋亡的機理研究[D];南京醫(yī)科大學;2014年

5 趙雷;KB-R7943對哇巴因誘發(fā)正常及心衰家兔心律失常的影響[D];山西醫(yī)科大學;2012年

6 楊明珠;NCX-2D2抗體對哇巴因誘發(fā)正常及心力衰竭大鼠心律失常的抑制作用及其機制研究[D];山西醫(yī)科大學;2017年

7 郭雪梅;哇巴因?qū)毙粤馨图毎籽〖毎鲋澈偷蛲龅挠绊慬D];南京醫(yī)科大學;2010年

8 劉瑩瑩;耳蝸螺旋神經(jīng)節(jié)細胞損傷后BDNF對其存活的影響[D];昆明醫(yī)科大學;2014年

9 林婕;哇巴因抗腫瘤作用及其相關(guān)靶點的研究[D];福建師范大學;2013年

10 吳黎;內(nèi)源性哇巴因在妊娠期高血壓疾病發(fā)病機理中的作用研究[D];華中科技大學;2008年

，

本文編號：2599560