【摘要】：背景和目的特發(fā)性肺纖維化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)是最為常見的特發(fā)性間質(zhì)性肺炎,其預(yù)后比多數(shù)肺癌差,中位生存期從確診之日起為2-5年,5年生存率僅為20%,其最近幾十年來發(fā)病率一直在上升,目前還沒有治愈的方法。長鏈非編碼RNA(long non-coding RNA,lncRNA)肺腺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)轉(zhuǎn)錄本1(metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1,MALAT1)是一種表達(dá)較為普遍的lncRNA,可以促進(jìn)多種腫瘤細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲過程,并且可以參與肝臟纖維化進(jìn)展過程,然而,目前尚未見到有關(guān)lncRNA MALAT1在IPF中的作用的相關(guān)研究,肺成纖維細(xì)胞增殖及向肌成纖維細(xì)胞分化是影響IPF發(fā)生的關(guān)鍵過程之一,為此,本研究就lncRNA MALAT1在人肺成纖維細(xì)胞增殖分化中的作用展開了研究。材料與方法培養(yǎng)人肺成纖維細(xì)胞HFL-1,應(yīng)用二苯基四氮唑溴鹽(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)實(shí)驗(yàn)檢測不同濃度轉(zhuǎn)化生長因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)作用不同時間對HFL-1細(xì)胞增殖的影響,確定TGF-β1最佳作用濃度和時間;在以上實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,采用5ug/L TGF-β1作用于HFL-1細(xì)胞48h,將其定義為藥物組,未進(jìn)行任何處理的細(xì)胞定義為對照組,實(shí)時熒光定量核酸擴(kuò)增檢測(real-time quantitative PCR detecting system,qPCR)技術(shù)檢測兩組lncMALAT1表達(dá)水平;將細(xì)胞分為空白對照組TGF-β1組陰性轉(zhuǎn)染組和siMALAT1組:空白對照組不做任何處理,TGF-β1組采用5ug/L的TGF-β1處理,陰性轉(zhuǎn)染組采用TGF-β1和siMALAT1 NC共處理,siMALAT1組采用TGF-β1和siMALAT1共處理,qPCR檢測不同組別α-平滑肌肌動蛋白(α-smooth muscle activation protein,α-SMA)Ⅰ型膠原(collagen1,COL1)mRNA及l(fā)ncMALAT1的表達(dá)水平;Western-blot法檢測以上四組α-SMACOL1蛋白的表達(dá)情況;MTT法檢測四組HFL-1細(xì)胞的增殖情況。結(jié)果(1)在244872h,不同濃度TGF-β1刺激時HFL-1細(xì)胞的增殖均呈現(xiàn)出先增后減的趨勢(P0.05);TGF-β1作用48h時,不同濃度組別間細(xì)胞增殖活力有差異(P0.05);5ug/LTGF-β1作用48h為最適藥物作用濃度和時間。(2)藥物組lncMALAT1相對表達(dá)量高于對照組(P0.05)。(3)四組α-SMACOL1mRNA及l(fā)ncMALA的相對表達(dá)量具有統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05);TGF-β1組陰性轉(zhuǎn)染組上述RNA相對表達(dá)量均高于空白對照組和siMALAT1組(P0.05),陰性轉(zhuǎn)染組各RNA相對表達(dá)量同TGF-β1組相比無差異(P0.05)。(4)四組α-SMACOL1蛋白的相對表達(dá)量具有統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05);TGF-β1組陰性轉(zhuǎn)染組蛋白相對表達(dá)量均高于空白對照組和siMALAT1組(P0.05),陰性轉(zhuǎn)染組和TGF-β1組相比無差異(P0.05)。(5)四組HFL-1細(xì)胞增殖活力有統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05);TGF-β1組陰性轉(zhuǎn)染組細(xì)胞增殖活力高于空白對照組和siMALAT1組(P0.05),陰性轉(zhuǎn)染組同TGF-β1組相比無差異(P0.05)。結(jié)論(1)lncMALAT1在TGF-β1刺激HFL-1細(xì)胞后表達(dá)水平升高。(2)lncMALAT1基因沉默后,經(jīng)TGF-β1誘導(dǎo)活化的人肺成纖維細(xì)胞中α-SMACOL1的mRNA和蛋白表達(dá)水平下降。(3)lncMALAT1基因沉默可以抑制人肺成纖維細(xì)胞的增殖活力。(4)深入探索lncMALAT1的作用機(jī)制及其影響的分子通路并進(jìn)行靶向調(diào)控可能為IPF的治療提供新的治療手段。
【圖文】：

P=0.054），，詳見圖 5，圖 6圖 5 不同組別 α-SMACOL1 蛋白相組和 siMALAT1 組比較 P<0.05****ontrol group TGF-β1 group negativetransfection gOL1 α-SMA
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R563

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 王粉利;付偉;李健;李彥斌;;吡非尼酮治療特發(fā)性肺纖維化的臨床效果[J];臨床醫(yī)學(xué)研究與實(shí)踐;2019年09期

2 王海琳;余學(xué)慶;;從肺腎論老年特發(fā)性肺纖維化的治療[J];中醫(yī)研究;2019年05期

3 曹孟淑;蔡后榮;;2018年特發(fā)性肺纖維化臨床診斷指南解讀[J];中國實(shí)用內(nèi)科雜志;2019年05期

4 何浪濤;何亦濤;宋衛(wèi)東;;支氣管肺泡灌洗液和血清中細(xì)胞介素-17和白細(xì)胞介素-6在老年特發(fā)性肺纖維化中的應(yīng)用價值[J];臨床醫(yī)藥文獻(xiàn)電子雜志;2017年60期

5 楊鳳;金藝鳳;;特發(fā)性肺纖維化治療的研究進(jìn)展[J];沈陽醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2018年01期

6 王淼;;特發(fā)性肺纖維化 比肺癌致命[J];江蘇衛(wèi)生保健;2018年09期

7 楊丹丹;張杰;;特發(fā)性肺纖維化中西治療藥物研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志;2016年34期

8 蘇衛(wèi);;特發(fā)性肺纖維化 老人的索命殺手——訪南京鼓樓醫(yī)院呼吸科副主任醫(yī)師、副教授 代靜泓[J];江蘇衛(wèi)生保健;2017年03期

9 沈凌;夏俊波;祁明浩;王利民;;特發(fā)性肺纖維化合并肺癌8例臨床分析[J];浙江醫(yī)學(xué);2014年20期

10 盛立新;;特發(fā)性肺纖維化疾病的中醫(yī)臨床診治[J];中醫(yī)臨床研究;2015年17期

相關(guān)會議論文 前10條

1 羅瓊;孫洋;徐強(qiáng);;艾拉莫德改善小鼠特發(fā)性肺纖維化的免疫學(xué)機(jī)制研究[A];第十屆全國免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會匯編[C];2015年

2 張紓難;;特發(fā)性肺纖維化患者生存質(zhì)量評價研究[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會內(nèi)科第十二次肺系病學(xué)術(shù)交流大會論文集[C];2006年

3 張穎;楊春燕;陳安寶;;特發(fā)性肺纖維化藥物治療研究進(jìn)展[A];中華醫(yī)學(xué)會急診醫(yī)學(xué)分會第十三次全國急診醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會大會論文集[C];2010年

4 丁輝;周鳳秋;蔡后榮;孟凡青;;特發(fā)性肺纖維化患者肺組織的窖蛋白-1、膠原-Ⅰ、α-平滑肌肌動蛋白表達(dá)變化及意義[A];中華醫(yī)學(xué)會第三屆全國間質(zhì)性肺病暨彌漫性泛細(xì)支氣管炎學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

5 李振華;彭守春;康健;于潤江;;特發(fā)性肺纖維化患者死亡預(yù)后因素的回顧性隊(duì)列研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第三屆全國間質(zhì)性肺病暨彌漫性泛細(xì)支氣管炎學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

6 李振華;康健;侯顯明;于潤江;;特發(fā)性肺纖維化患者生存相關(guān)因素分析[A];中華醫(yī)學(xué)會第三屆全國間質(zhì)性肺病暨彌漫性泛細(xì)支氣管炎學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

7 康健;;特發(fā)性肺纖維化診斷和治療的最新動態(tài)[A];呼吸與危重癥醫(yī)學(xué)（2010-2011）[C];2011年

8 鄭洪;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與特發(fā)性肺纖維化治療[A];中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)年會——2011（第十二次全國呼吸病學(xué)學(xué)術(shù)會議）論文匯編[C];2011年

9 張柳春;;特發(fā)性肺纖維化的治療進(jìn)展[A];中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)年會——2013第十四次全國呼吸病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2013年

10 曹黛茵;陳靜瑜;高霏;李智;羅益鋒;郭禹標(biāo);;巨噬細(xì)胞移動抑制因子及轉(zhuǎn)化生長因子-β1在特發(fā)性肺纖維化患者中的表達(dá)及意義[A];中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)年會——2013第十四次全國呼吸病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2013年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 南方日報記者 嚴(yán)慧芳;特發(fā)性肺纖維化尚缺“特效藥”[N];南方日報;2018年

2 本報記者 白毅;特發(fā)性肺纖維化診療盼提速[N];中國醫(yī)藥報;2016年

3 本報記者 白毅;特發(fā)性肺纖維化診治有可喜進(jìn)展[N];中國醫(yī)藥報;2015年

4 本報記者 陳青;特發(fā)性肺纖維化誤診率高達(dá)50%[N];文匯報;2015年

5 本報記者 趙玲;讓吹肥皂泡不再成為挑戰(zhàn)[N];中國醫(yī)藥報;2014年

6 本報記者 魏平;特發(fā)性肺纖維化,診斷標(biāo)準(zhǔn)廢舊立新[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報;2011年

7 春光;什么是“特發(fā)性肺纖維化”[N];農(nóng)村醫(yī)藥報（漢）;2009年

8 閆辛;特發(fā)性肺纖維化應(yīng)早診治[N];中國中醫(yī)藥報;2007年

9 代華平;特發(fā)性肺纖維化尚不能根治[N];健康報;2006年

10 ;特發(fā)性肺纖維化的臨床特點(diǎn)及治療[N];人民日報海外版;2005年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 邱岳;特發(fā)性肺纖維化中醫(yī)證候研究及右歸飲干預(yù)肺纖維化大鼠的實(shí)驗(yàn)研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2019年

2 徐昌君;基于特發(fā)性肺纖維化miRNA-21、let-7d和自噬調(diào)控關(guān)系研究黃芪組分的干預(yù)作用[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2017年

3 任延毅;基于文獻(xiàn)分析和病例回顧的特發(fā)性肺纖維化病機(jī)、證候與方藥規(guī)律研究[D];遼寧中醫(yī)藥大學(xué);2017年

4 周瑋;中國人ABCA3和MUTYH基因變異與特發(fā)性肺纖維化的遺傳基礎(chǔ)研究[D];南京大學(xué);2017年

5 臧建華;周兆山教授臨床經(jīng)驗(yàn)總結(jié)暨和解清利飲治療特發(fā)性肺纖維化的臨床觀察與實(shí)驗(yàn)研究[D];山東中醫(yī)藥大學(xué);2016年

6 郝小燕;長鏈非編碼RNA AP003419.16調(diào)控RPS6KB2對衰老相關(guān)特發(fā)性肺纖維化的機(jī)制研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2018年

7 張紓難;特發(fā)性肺纖維化患者生存質(zhì)量評價研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2006年

8 彭守春;特發(fā)性肺纖維化預(yù)后相關(guān)因素的研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2008年

9 劉波;長期抗反流治療可改善特發(fā)性肺纖維化患者的生存期[D];山東大學(xué);2017年

10 劉佳;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在特發(fā)性肺纖維化發(fā)病機(jī)制中的作用[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 常清;LncMALAT1對轉(zhuǎn)化生長因子-β1誘導(dǎo)人肺成纖維細(xì)胞增殖分化的影響[D];鄭州大學(xué);2019年

2 石巖;基于循證醫(yī)學(xué)的中藥內(nèi)服治療特發(fā)性肺纖維化臨床證據(jù)分析研究[D];遼寧中醫(yī)藥大學(xué);2018年

3 卞園園;肺纖湯治療特發(fā)性肺纖維化（氣陰兩虛，痰熱郁肺證）的臨床觀察[D];湖南中醫(yī)藥大學(xué);2018年

4 馬泉;補(bǔ)肺活血化濁法對特發(fā)性肺纖維化肺功能的影響[D];甘肅中醫(yī)藥大學(xué);2018年

5 王明杰;補(bǔ)陽還五湯對大鼠特發(fā)性肺纖維化的改善機(jī)制與凋亡因子BCL2和自噬的關(guān)系[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2018年

6 陳響;miR-497在特發(fā)性肺纖維化發(fā)生過程中的作用及機(jī)制探討[D];南京大學(xué);2016年

7 王玉潔;通過肺/主動脈直徑比值預(yù)測特發(fā)性肺纖維化預(yù)后的研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2018年

8 劉會金;特發(fā)性肺纖維化疾病中氧化應(yīng)激反應(yīng)對肺泡干細(xì)胞功能的調(diào)控[D];天津醫(yī)科大學(xué);2018年

9 張月薪;特發(fā)性肺纖維化合并肺炎患者的臨床特征及其住院不良預(yù)后的危險因素分析[D];西南醫(yī)科大學(xué);2018年

10 雷凱春;吡非尼酮治療特發(fā)性肺纖維化的臨床療效及不良反應(yīng)[D];蘭州大學(xué);2018年

本文編號：2598976