【摘要】：目的： 構(gòu)建mIL-10腺病毒重組體Ad-mIL-10，獲得mIL-10基因修飾的樹突狀細胞。 方法： 根據(jù)IL-10基因序列及腺病毒載體的多克隆位點，合成包括酶切位點的基因序列，連接到pMD18-T載體并測序鑒定。用基因工程的方法將小鼠IL-10基因克隆到BD Adeno-X~(TM)腺病毒載體，于人胚腎293細胞中包裝、擴增病毒并測定IL-10蛋白表達，，轉(zhuǎn)染到體外培養(yǎng)的小鼠骨髓來源的樹突狀細胞。 結(jié)果： 成功構(gòu)建小鼠Ad-mIL-10重組腺病毒載體并高包裝、擴增成功，測定高表達IL-10蛋白。體外成功培養(yǎng)小鼠骨髓來源的小鼠狀細胞并順利轉(zhuǎn)染Ad-mIL-10。 結(jié)論： 用基因工程方法構(gòu)建小鼠Ad-mIL-10重組腺病毒載體并轉(zhuǎn)染小鼠骨髓來源的樹突狀細胞是可行的，為進行相關(guān)的基因治療的可能性提供了更充足的理論依據(jù)。
【學位授予單位】：中國協(xié)和醫(yī)科大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2005
【分類號】：R562.25

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本文編號：2594976