【摘要】：研究背景與目的: 結(jié)核病是由結(jié)核分枝桿菌( Mycobacterium tuberculosis M. TB)感染引起的慢性傳染病。近年來由于環(huán)境污染的日益加重、糖尿病等發(fā)病率的上升以及AIDS的流行,肺結(jié)核發(fā)病率再次攀升,已成為嚴(yán)重危害人類健康的全球性公害。 自80年代中期以來,結(jié)核病發(fā)病率呈回升趨勢(shì),其中機(jī)體免疫功能失調(diào)是其原因之一。結(jié)核病最易侵犯的器官是肺,但對(duì)肺結(jié)核病變局部細(xì)胞免疫反應(yīng)情況尚知之不多,近年來對(duì)結(jié)核病免疫反應(yīng)的研究從未間斷過,從機(jī)體本身出發(fā)來控制結(jié)核病對(duì)控制傳染源具有重大的意義。大量的臨床資料及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明,一般結(jié)核病感染者不發(fā)病,但約有5~10%受感染者當(dāng)多種原因引起的機(jī)體免疫力下降時(shí),便以10%的速度最終發(fā)展為臨床結(jié)核病�？梢�,結(jié)核病的發(fā)生和發(fā)展是結(jié)核分枝桿菌與宿主的相互作用的結(jié)果,與機(jī)體的免疫狀況息息相關(guān)。近年來,人們?cè)谘芯拷Y(jié)核病的細(xì)胞免疫機(jī)制時(shí)越來越多的認(rèn)識(shí)到:在結(jié)核病中,眾多的細(xì)胞因子參與了結(jié)核病免疫反應(yīng)及免疫病理的發(fā)生和發(fā)展。其中細(xì)胞因子TNF-α、IL-4、IFN-γ、TGF-β的水平對(duì)結(jié)核病發(fā)病相關(guān)性最大。結(jié)核病免疫病原學(xué)研究顯示,結(jié)核病病變組織的增生、壞死是導(dǎo)致結(jié)核病惡化乃至死亡的直接原因,故結(jié)核病也是機(jī)體免疫紊亂的后果,常規(guī)的化療藥物只能殺死病原微生物,不能糾正已經(jīng)啟動(dòng)的免疫病原性異常免疫反應(yīng),因此調(diào)整結(jié)核分枝桿菌致病后的異常免疫恢復(fù)到正常的狀態(tài)對(duì)成功的化療,消滅傳染源具有至關(guān)重大的意義。目前已有部分免疫基礎(chǔ)上發(fā)展起來的細(xì)胞因子應(yīng)用于臨床,其在實(shí)際中的應(yīng)用越來越被人們所認(rèn)識(shí),如IFN-γ制劑, TNF-α抑制劑等的使用,但到目前為止尚無明確指導(dǎo)細(xì)胞因子的局部治療的臨床依據(jù)。 結(jié)核病是一種與免疫反應(yīng)密切相關(guān)的感染性疾病,其中在結(jié)核分枝桿菌感染的過程中細(xì)胞免疫反應(yīng)占主導(dǎo)地位。細(xì)胞免疫反應(yīng)是以T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)、以巨噬細(xì)胞為效應(yīng)細(xì)胞的免疫反應(yīng),多種細(xì)胞因子構(gòu)成免疫網(wǎng)絡(luò),共同參與了結(jié)核病的免疫應(yīng)答及免疫發(fā)病過程。隨著人們對(duì)結(jié)核基礎(chǔ)免疫的研究,目前國(guó)內(nèi)外的大多數(shù)學(xué)者認(rèn)為,細(xì)胞因子TNF-α、IL-4、IFN-γ、TGF-β的水平與肺結(jié)核的嚴(yán)重程度,活動(dòng)性,病情預(yù)后等密切相關(guān)。本研究以相關(guān)的研究為基礎(chǔ),以自身為對(duì)照,探討肺結(jié)核患者肺部與外周血細(xì)胞因子水平及其相互關(guān)系,肺部細(xì)胞因子水平與痰菌量的關(guān)系,以及治療過程中肺部細(xì)胞因子水平的變化為臨床開展肺結(jié)核細(xì)胞因子治療提供依據(jù)。 方法: 選取2009年9月至2009年12月在廣州市胸科醫(yī)院住院的符合診斷標(biāo)準(zhǔn)的肺結(jié)核患者33例。在患者入院時(shí)及治療2周后分別留取痰標(biāo)本及血標(biāo)本。記錄納入研究的肺結(jié)核患者入院時(shí)臨床和實(shí)驗(yàn)室資料,如性別,年齡,疾病診斷,細(xì)菌學(xué)檢查,胸部影像學(xué)檢查等。痰上清液和血清均采取ELISA的方法測(cè)定IL-4、TNF-α、TGF-β、IFN-γ的含量。痰涂片分別行抗酸染色和瑞士-吉姆薩染色,光學(xué)顯微鏡下分別用來觀察痰菌量及痰細(xì)胞學(xué)情況。 結(jié)果: 1.肺結(jié)核患者在抗結(jié)核治療前痰上清液中IL-4(171.77±150.17)pg/ml、TNF-α(513.52±340.69)pg/ml、TGF-β(7578.75±4090.65)pg/ml、IFN-γ(342.76±142.20)pg/ml的水平都明顯高于血清IL-4(48.60±18.60)pg/ml、TNF-α(145.06±48.55)pg/ml、TGF-β(181.63±118.73)pg/ml、IFN-γ(16.51±10.79)pg/ml,其中痰上清液中IL-4的水平約是血清中的3.68倍, TNF-α的水平約是血清中的4.03倍, IFN-γ的水平約是血清中的12.40倍, TGF-β的水平約是血清中的65.02倍,兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 2.治療前痰上清液中IL-4和TNF-α的水平有直線正相關(guān),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);而痰上清液中IFN-γ與IL-4、TNF-α、TGF-β的水平均無明顯相關(guān),無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);痰上清液中TGF-β與IL-4、TNF-α的水平亦無明顯相關(guān)性,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 3.治療前血清中IL-4與TNF-α水平無明顯相關(guān)性,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);血清中TGF-β與IFN-γ水平存在直線正相關(guān),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);而血清中IL-4與TGF-β、IFN-γ的水平均無明顯相關(guān)性,無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P值0.05);血清中TNF-α與TGF-β、IFN-γ的水平亦無明顯相關(guān)性,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 4.治療前不同痰菌量病人痰上清液中IL-4、TNF-α、TGF-β、IFN-γ的水平有明顯差異,從各細(xì)胞因子的均值及臨床角度來看,痰菌量增多,相關(guān)細(xì)胞因子分泌水平不同程度升高,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。治療前不同痰菌量病人血清中IL-4、TNF-α、TGF-β、IFN-γ的水平無明顯差異,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 5.治療前非空洞型結(jié)核病人痰上清液中相關(guān)細(xì)胞因子IL-4(140.73±83.23)pg/ml、TNF-α(463.90±268.22)pg/ml、TGF-β(6482.21±3670.54)pg/ml、IFN-γ(118.90±96.24)pg/ml的水平與空洞型肺結(jié)核病人IL-4(200.99±191.67)pg/ml、TNF-α(560.22±399.89)pg/ml、TGF-β(8610.79±4301.39)pg/ml、IFN-γ(164.96±119.34)pg/ml的水平相比較有明顯差異,從臨床及細(xì)胞因子的平均水平來看,空洞型肺結(jié)核病人的相關(guān)細(xì)胞因子水平較非空洞型有不同程度的升高,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 6.非空洞型肺結(jié)核病人血清中相關(guān)細(xì)胞因子水平IL-4(47.41±14.45)pg/ml、TNF-α(145.19±58.30)pg/ml、TGF-β(175.47±122.35)pg/ml、IFN-γ(15.95±11.12)pg/ml的水平與空洞型肺結(jié)核病人IL-4(49.71±22.20)pg/ml、TNF-α(144.93±39.10)pg/ml、TGF-β(187.43±118.69)pg/ml、IFN-γ(17.04±10.79)pg/ml的水平相比較無明顯差異,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 7.治療前空洞型肺結(jié)核病人痰IL-4/血IL-4(4.45±4.16)、痰TNF-α/血TNF-α(4.52±4.08)、痰TGF-β/血TGF-β(71.89±57.89)、痰IFN-γ/血IFN-γ(12.55±10.66)較非空洞型肺結(jié)核病人痰IL-4/血IL-4(2.87±1.65)、痰TNF-α/血TNF-α(3.50±2.30)、痰TGF-β/血TGF-β(57.73±51.19)、痰IFN-γ/血IFN-γ(12.26±13.08)有不同程度的升高,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 8.治療2周后痰上清液中IL-4(191.89±126.89)pg/ml、TNF-α(498.35±374.92)pg/ml、TGF-β(6939.69±5008.63)pg/ml、IFN-γ(145.73±75.21)pg/ml的水平與治療前相比無明顯變化,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 9.治療2周后肺結(jié)核患者痰上清液中IL-4與TNF-α水平呈直線正相關(guān),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);痰上清液中TGF-β與TNF-α的水平呈直線正相關(guān),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);而痰上清液中IFN-γ與IL-4、TNF-α、TGF-β的水平均無明顯相關(guān),無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);痰上清液中TGF-β與IL-4的水平亦無明顯相關(guān)性,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 10.肺結(jié)核患者痰上清液中△IL-4與△TNF-α的水平呈直線正相關(guān),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);而痰上清液中△IFN-γ與△IL-4、△TNF-α、△TGF-β的水平均無明顯相關(guān),無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);痰上清液中△TGF-β與△IL-4、△TNF-α的水平亦無明顯相關(guān)性,無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。 11.治療后IL-4/TNF-α(0.49±0.33)與治療前相比IL-4/ TNF-α(0.31±0.21)呈明顯上升趨勢(shì),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。而治療后IL-4/IFN-γ(1.79±1.94)與治療前IL-4/IFN-γ(2.58±4.49)相比,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P 0.05)。 結(jié)論: 1.肺結(jié)核患者治療前痰上清液中細(xì)胞因子IL-4、TNF-α、TGF-β、IFN-γ的水平較血清中明顯增高,其中痰上清液中IL-4的水平約是血清中的3.68倍, TNF-α的水平約是血清中的4.03倍, IFN-γ的水平約是血清中的12.40倍, TGF-β的水平約是血清中的65.02倍。 2.隨著痰菌量增多,痰上清液中IL-4、TNF-α、TGF-β、IFN-γ的水平不同程度的升高,而血清中相關(guān)細(xì)胞因子變化不明顯; 3.空洞型肺結(jié)核病人較非空洞型肺結(jié)核病人痰上清液中IL-4、TNF-α、TGF-β、IFN-γ的水平不同程度增高,而血清中相關(guān)細(xì)胞因子變化不明顯;空洞型肺結(jié)核病人較非空洞型肺結(jié)核病人痰上清液與血清中相關(guān)細(xì)胞因子的比值有不同程度的升高; 4.治療前與治療2周后痰上清液中IL-4與TNF-α的水平均呈直線正相關(guān),而血清中IL-4與TNF-α的水平無明顯相關(guān)性; 5.治療后痰上清液中IL-4/TNF-α較治療前明顯升高,可能作為疾病治療效果評(píng)價(jià)的指標(biāo),而IL-4/IFN-γ在治療前后變化不明顯。
【圖文】：

表 2 治療前痰上清液中 IL-4、TNF-α、TGF-β、IFN-γ 的相互關(guān)系IL-4 TNF-α TGF-β IFN-γIL-4P 0.005 0.124 0.599r 1 0.475 0.273 0.124TNF-αP 0.005 0.054 0.236r 0.475 1 0.339 0.212TGF-βP 0.124 0.054 0.825r 0.273 0.339 1 0.040IFN-γP 0.599 0.236 0.825r 0.095 0.212 0.040 1注:表示 P<0.05 有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異直線相關(guān)分析提示，痰上清液中 IL-4 水平與 TNF-α 水平呈直線正相關(guān)(r=0.475,P<0.05）；痰上清液中 IFN-γ 水平與 TNF-α、IL-4、TGF-β 水平均無明顯相關(guān)性；IL-4、TNF-α 水平與 TGF-β 水平無明顯相關(guān)性。詳見表 2，圖 2a。2.2 治療前痰上清液中相關(guān)細(xì)胞因子的關(guān)系

2.3 治療前血清中相關(guān)細(xì)胞因子的關(guān)系表 3 治療前血清中 IL-4、TNF-α、TGF-β、IFN-γ 的相互關(guān)系IL-4 TNF-α TGF-β IFN-γIL-4P 0.726 0.059 0.059r 1 -0.063 -0.333 -0.333TNF-αP 0.726 0.281 0.281r -0.063 1 0.193 0.193TGF-βP 0.059 0.281 0.000r -0.333 0.193 1 1.000IFN-γP 0.059 0.281 0.000r -0.333 0.193 1.000 1注:表示 P<0.05 有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異由上圖表所分析所示, 血清中 TGF-β 與 IFN-γ 的水平呈直線相關(guān)(r=1.000,P<0.05), 血清中 IL-4 水平與 TNF-α、IFN-γ、TGF-β 水平均無明顯相關(guān)性； 血清中 TNF-α 水平與 TGF-β、IFN-γ 水平無明顯相關(guān)性。詳見表 3，，圖 3a。
【學(xué)位授予單位】：廣州醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號(hào)】：R521

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2594180