【摘要】：目的：通過觀察Fas抗體、白細胞介素-1β(IL-1β)對體外培養(yǎng)的氣道上皮細胞凋亡、增殖的影響，探討炎癥狀態(tài)下氣道上皮細胞凋亡、增殖的變化規(guī)律及可能對氣道炎癥和氣道重塑的作用。 方法：分離兔的氣道上皮細胞，在體外培養(yǎng)的過程中，加入白細胞介素-1β與不同濃度的Fas抗體共同孵育，以流式細胞術(shù)Annexin V-FITC、PI染色法和TUNEL法檢測氣道上皮細胞凋亡率的變化，以免疫細胞化學方法檢測氣道上皮細胞增殖細胞核抗原（PCNA）的表達程度。 結(jié)果：(1)加入不同濃度的Fas抗體作用24小時，隨Fas抗體濃度的增加（100，500，1000ng /ml），氣道上皮細胞的凋亡率逐漸增加[分別為（3.74±0.267）%，（6.97±0.131）%，（8.76±0.261）%]，與對照組凋亡率[（2.46±0.272）%]比較，500，1000ng/ml組差異有顯著性（P㩳0.05）；在IL-1β存在的炎性條件下，加入Fas抗體作用24小時，隨Fas抗體濃度的增加（100，500，1000ng/ml），，氣道上皮細胞的凋亡率逐漸增加[分別為（4.04±0.070）%，（6.08±0.150）%，（7.98±0.061）%]，與對照組凋亡率[（2.63±0.245）%]比較，500，1000ng/ml組差異有顯著性（P㩳0.05），加IL-1β組與不加IL-1β組間差異無顯著性； (2)Fas抗體(500 ng/ml)分別作用12，24，36小時，氣道上皮細胞的凋亡率逐漸增加[分別為（4.85±0.221）%，（7.24±0.673）%，（11.86±0.266）%]，與同時間點對照組凋亡率[（1.96±0.309）%，（2.81±0.287）%，（5.43±0.438）%]比較，差異有顯著性（P均㩳0.05）； (3)以TUNEL方法檢測氣道上皮細胞的凋亡率，分別加入不同濃度Fas抗體（500，1000 ng/ml）作用24小時，其凋亡率分別為[（8.91±0.249）%，（12.24±0.610）%]，與對照組[（3.07±0.386）%]比較，差異有顯著性（P㩳0.05），在存在IL-1β的條件下，F(xiàn)as抗體(500 ng/ml)組凋亡率為[（10.94±0.270）%]，與對照組[（3.07±0.386）%]比較，差異有顯著性（P㩳0.05），加IL-1β與不加IL-1β組間差異無顯著性； (4)加入不同濃度Fas抗體（500，1000 ng/ml）作用24小時，以免疫 WP=5 細胞化學方法觀察，隨Fas抗體濃度增加，PCNA表達陽性率逐漸增高，分別為[（49.66±6.714）%，（57.03±1.923）%]，IL-1β組和IL-1β+Fas抗體(500 ng/ml)組 PCNA表達陽性率為[（72.21±5.904）%，（44.57±7.959）%]，以上各實驗組與對照組表達陽性率[（36.50±2.106）%]比較，差異均有顯著性（P㩳0.05），各加Fas抗體組與單加IL-1β組比較，差異均有顯著性（P㩳0.05）。 結(jié)論：Fas抗體能夠有效的誘導正常和炎癥狀態(tài)下原代氣道上皮細胞發(fā)生凋亡，IL-1β能有效的增強氣道上皮細胞的增殖作用，但其促細胞凋亡的作用不明顯，F(xiàn)as抗體可以有效抑制IL-1β所致氣道上皮細胞的增殖作用，可能對抑制氣道炎癥和氣道重塑有積極作用。
【學位授予單位】：山西醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2004
【分類號】：R562.25

【參考文獻】

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1 薛建敏,徐永健,張珍祥,熊盛道;抗CD_4~+人-鼠嵌合抗體對哮喘患者淋巴細胞增殖和凋亡的影響[J];中華結(jié)核和呼吸雜志;1999年08期

本文編號：2592088