【摘要】：目的探討香煙煙霧提取物(CSE)在呼吸道上皮細(xì)胞間質(zhì)性轉(zhuǎn)化(EMT)中的作用,為進(jìn)一步研究香煙煙霧提取物在慢性阻塞性肺疾病(COPD)氣道重構(gòu)發(fā)生機(jī)制提供新的線索。方法用不同濃度(0%、0.5%、1.0%、2.5%、5.0%,其中濃度0作為對照組)的CSE刺激呼吸道上皮細(xì)胞BEAS-2B72h,逆轉(zhuǎn)錄PCR檢測E鈣粘蛋白(E-cad)、N鈣粘蛋白(N-cad)mRNA表達(dá)情況,酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測細(xì)胞培養(yǎng)上清液中TGF-β1濃度;用2.5%CSE刺激BEAS-2B細(xì)胞不同時長(0、12、24、48h,其中時間0h作為對照),倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)變化,逆轉(zhuǎn)錄PCR檢測E-cad、N-cad、補(bǔ)體C3mRNA表達(dá)情況,ELISA法檢測細(xì)胞培養(yǎng)上清液中TGF-β1、過敏毒素C3a濃度。結(jié)果在不同濃度的CSE刺激BEAS-2B細(xì)胞72h后,CSE各濃度刺激組較對照組E-cad mRNA表達(dá)下調(diào),N-cad mRNA表達(dá)增加,且呈濃度依賴性(P0.05);ELISA法檢測細(xì)胞培養(yǎng)上清液中TGF-β1水平,CSE各濃度刺激組較對照組增加(P0.05);2.5%CSE在不同時間點(diǎn)作用BEAS-2B細(xì)胞,刺激組細(xì)胞呈梭形改變,CSE各時間段刺激組較對照組E-cad mRNA表達(dá)減少,補(bǔ)體C3、N-cad mRNA表達(dá)增加,且呈時間依賴性(P0.05),CSE各時間段刺激組細(xì)胞培養(yǎng)上清液中TGF-β1、C3a水平較對照組增加(P0.05)。結(jié)論 CSE可誘導(dǎo)正常的呼吸道上皮細(xì)胞BEAS-2B發(fā)生EMT,補(bǔ)體C3激活可能參與此過程。
【作者單位】： 貴州省遵義市第一人民醫(yī)院呼吸科;貴州省遵義市第一人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科;江蘇省蘇州市科技城醫(yī)院呼吸科;
【基金】：貴州省科學(xué)技術(shù)基金項(xiàng)目(黔科合J字[2013]2301)
【分類號】：R563.9

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本文編號：2540530