【摘要】：目的：探討紅霉素對(duì)經(jīng)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)誘導(dǎo)人胚肺成纖維細(xì)胞（human fetal lung fibroblast, HFL-F）samd3、samd7表達(dá)的影響，探討其是否對(duì)成纖維細(xì)胞（fibroblast, FB）的增殖和膠原的產(chǎn)生有直接的抑制作用及可能作用機(jī)制，為尋求有效的抗肺纖維化藥物提供臨床治療的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。 方法：體外培養(yǎng)HFL-F MRC-5至指數(shù)生長(zhǎng)期，先加入不同濃度的紅霉素作用12h，再加入TGF-β1作用一定時(shí)間后，采用MTT比色法檢測(cè)細(xì)胞的增殖，篩選出最適的處理濃度。后續(xù)試驗(yàn)細(xì)胞分組：對(duì)照組：細(xì)胞使用MEM/NEAA培養(yǎng)基加10％FBS(Hyclone)培養(yǎng)；TGF-β1組：正常培養(yǎng)的HFL-F加入TGF-β1(5μg/m1)刺激24h；紅霉素提前組：用最適濃度紅霉素預(yù)先處理人胚肺纖維細(xì)胞12h，再用TGF-β1(5μg/ml)共孵育24h；紅霉素延遲組：TGF-β1(5μg/ml)先處理24h，后予以合適的紅霉素共培養(yǎng)12h。以上各組細(xì)胞，用堿性水解法測(cè)定細(xì)胞HYP含量，天狼星紅染色測(cè)細(xì)胞層膠原，MTT法測(cè)細(xì)胞增殖，用RT-PCR的方法檢測(cè)細(xì)胞Smad3、Smad7mRNA表達(dá)的水平，用Western blot的方法檢測(cè)p-Smad3、Smad3、Smad7蛋白表達(dá)水平。 結(jié)果：與TGF-β1組比較，紅霉素組細(xì)胞增殖和膠原的含量減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P 0.05），而紅霉素提前組低于延遲組；Smad3mRNA及p-Smad3蛋白在延遲組及提前組中的表達(dá)低于TGF-β1組，提前組下降最明顯，而smad7的表達(dá)高于TGF-β1組，其中提前組表達(dá)水平最高。 結(jié)論：紅霉素抑制TGF-β1刺激HFL-F(MRC-5)增殖及膠原產(chǎn)生，可以預(yù)防及延緩肺纖維化形成，其機(jī)制可能與上調(diào)LFB(lung fibroblast, LFB)Smad7的表達(dá)、并抑制p-Smad3蛋白的表達(dá)有關(guān)。
【圖文】：

紅霉素提前及延遲處理對(duì) TGF-β1 刺激 MRC-5 細(xì)胞增殖的影TGF-β1 組 MRC-5 細(xì)胞增殖高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05素提前組(T+Pre-EM)和延遲組(T+Post-EM) MRC-5 細(xì)胞增殖均低于 TG差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而紅霉素提前組(T+Pre-EM)細(xì)胞增殖低于ost-EM)，，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。（見(jiàn)圖 1)

21圖 6 紅霉素對(duì) TGF-β1 刺激 MRC-5 細(xì)胞中 Smad3 蛋白TGF-β1 組細(xì)胞中 Smad7 蛋白的表達(dá)低于對(duì)照組，差異有提前組（T+Pre-EM）Smad7 蛋白表達(dá)高于 TGF-β1 組T+Post-EM 組）（見(jiàn)圖 7）。三組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：R965;R563.9

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 章巍,劉新民,李海潮,張紅;博來(lái)霉素致大鼠肺纖維化模型肺組織MMP-2、MMP-9、MT1-MMP及TIMP-1、TIMP-2的表達(dá)[J];北京大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2002年06期

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3 楊坤禹;劉莉;張濤;伍鋼;Claudia Ruebe;Christian Ruebe;胡豫;;基質(zhì)金屬蛋白酶及其組織抑制物在小鼠肺纖維化發(fā)生中的作用[J];中華內(nèi)科雜志;2006年07期

本文編號(hào)：2521716