【摘要】：目的探討活性維生素D3[1,25(OH)2D3]在大鼠肺纖維化發(fā)生發(fā)展中的作用及對(duì)miR-29a的影響。方法 150只SD雄性大鼠隨機(jī)分為纖維化發(fā)生干預(yù)組(90只)和纖維化后干預(yù)組(60只),纖維化發(fā)生干預(yù)組分為模型組Ⅰ、給藥組Ⅰ和對(duì)照組Ⅰ(n=30),纖維化后干預(yù)組分為模型組Ⅱ、給藥組Ⅱ和對(duì)照組Ⅱ(n=20)。模型組Ⅰ/Ⅱ和給藥組Ⅰ/Ⅱ經(jīng)氣管注入博來(lái)霉素(5mg/kg)建立肺纖維化模型,對(duì)照組Ⅰ/Ⅱ經(jīng)氣管注入等體積生理鹽水。給藥組Ⅰ/Ⅱ分別于手術(shù)后第2天和第14天腹腔注射活性維生素D3,模型組Ⅰ/Ⅱ分別于手術(shù)后第2天和第14天腹腔注射等量的活性維生素D3溶劑(0.1%乙醇和99.9%的丙二醇),對(duì)照組Ⅰ/Ⅱ分別在術(shù)后第2天和第14天腹腔注射等量的生理鹽水。各種處理均為兩天1次。纖維化發(fā)生干預(yù)組分別于手術(shù)后第14天、第21天和第28天處死大鼠取材,纖維化后干預(yù)組分別于手術(shù)后第21天和第28天處死大鼠取材,各小組每個(gè)時(shí)間點(diǎn)10只大鼠。用Masson染色法觀察各組實(shí)驗(yàn)大鼠肺中膠原纖維的差異,用堿水解法檢測(cè)羥脯氨酸含量的變化,用實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)、Ⅰ型膠原蛋白(Col)ⅠmRNA及miR-29a的相對(duì)表達(dá)量,用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)α-SMA和ColⅠ蛋白質(zhì)表達(dá)水平,并經(jīng)圖像分析進(jìn)行量化。結(jié)果博來(lái)霉素處理后,第14天大鼠肺部已經(jīng)出現(xiàn)纖維化,隨著時(shí)間推移,纖維化進(jìn)一步加重。模型組Ⅰ/Ⅱ和給藥組Ⅰ/Ⅱ中的羥脯氨酸含量、α-SMA和ColⅠ的mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)都明顯高于對(duì)照組Ⅰ/Ⅱ,而其miR-29a表達(dá)與對(duì)照組Ⅰ/Ⅱ相比則明顯減少。給藥組Ⅰ/Ⅱ中miR-29a的表達(dá)與模型組Ⅰ/Ⅱ相比有所增加(P0.05)。在纖維化發(fā)生干預(yù)組中,與模型組Ⅰ相比,給藥組Ⅰ在3個(gè)時(shí)間點(diǎn)羥脯氨酸含量、α-SMA、ColⅠ的mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)都顯著降低(P0.05),但在纖維化后干預(yù)組中的給藥組Ⅱ中羥脯氨酸含量、α-SMA、ColⅠ的mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)比模型組Ⅱ雖有所降低,但差異無(wú)顯著性(P0.05)。結(jié)論活性維生素D3對(duì)大鼠肺纖維化的發(fā)生發(fā)展具有一定的抑制作用,其預(yù)防效果更好一些,并且能促進(jìn)miR-29a的表達(dá),活性維生素D3可能是通過促進(jìn)miR-29a的表達(dá)來(lái)抑制肺纖維化的發(fā)生發(fā)展。
[Abstract]:Aim to investigate the role of active vitamin D 3 [1, 25 (OH) 2D3] in the development of pulmonary fibrosis in rats and its effect on miR-29a. Methods 150 male SD rats were randomly divided into fibrosis intervention group (90 rats) and post-fibrosis intervention group (60 rats). Fibrosis intervention group was divided into model group 鈪，

本文編號(hào)：2436533