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骨髓來源間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)上清液減輕脂多糖誘導(dǎo)的小鼠急性肺損傷

發(fā)布時(shí)間:2018-11-05 16:59
【摘要】:目的:觀察經(jīng)尾靜脈輸注骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)上清液(MSCs CdM)對(duì)脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的小鼠急性肺損傷的治療作用及其機(jī)制。方法:采用全骨髓培養(yǎng)法分離純化骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,傳至第3代時(shí)觀察細(xì)胞形態(tài),流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞表面標(biāo)志,并且收集上清液用超濾離心管進(jìn)行離心。30只BALB/c小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、LPS模型組和MSCs CdM治療組。對(duì)照組腹腔內(nèi)注射生理鹽水(0.01 mL/g),LPS組和MSCs CdM治療組腹腔內(nèi)注射LPS(5 mg/kg,0.01 mL/g)制備急性肺損傷模型。造模1 h后經(jīng)尾靜脈輸注MSCs CdM(MSCs CdM治療組)或生理鹽水(LPS組或?qū)φ战M)300μL。6 h后處死小鼠,留取標(biāo)本檢測肺組織病理形態(tài)學(xué)、肺組織濕干重比(W/D)、支氣管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白含量、血清及BALF中細(xì)胞因子水平和肺組織中髓過氧化物酶(MPO)的活性。結(jié)果:與對(duì)照組比較,LPS處理后肺組織病理損傷嚴(yán)重,BALF中蛋白、血清腫瘤壞死因子α(TNF-α)和白細(xì)胞介素6(IL-6)含量、肺組織中MPO活性及肺組織濕干重比均顯著升高。與LPS組比較,MSCs CdM治療組肺組織病理損傷程度減輕,BALF中蛋白、血清TNF-α和IL-6含量、肺組織中MPO活性及肺組織濕干重比均顯著降低,而BALF中白細(xì)胞介素10(IL-10)和角質(zhì)細(xì)胞生長因子(KGF)水平顯著高于LPS組和對(duì)照組。結(jié)論:骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)上清液可有效減輕LPS誘導(dǎo)的急性肺損傷,其作用機(jī)制可能與其調(diào)節(jié)肺部TNF-α、IL-6、IL-10和KGF的水平有關(guān)。
[Abstract]:Aim: to observe the therapeutic effect of (MSCs CdM) on acute lung injury induced by lipopolysaccharide (LPS) in mice. Methods: bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) were isolated and purified by whole bone marrow culture. Cell morphology was observed at the third passage, and cell surface markers were detected by flow cytometry. The supernatant was collected and centrifuged with ultrafiltration centrifuge tube. 30 BALB/c mice were randomly divided into control group, LPS model group and MSCs CdM treatment group. The model of acute lung injury was induced by intraperitoneal injection of normal saline (0. 01 mL/g), LPS) and intraperitoneal injection of LPS (5 mg/kg,0.01 mL/g) in the control group. The mice were sacrificed after 1 hour intravenous infusion of MSCs CdM (MSCs CdM or normal saline (LPS group or control group) for 1 hour. The lung tissue morphology and wet / dry weight ratio (W / D) of lung tissue were measured. Protein content in bronchoalveolar lavage fluid (BALF), cytokine level in serum and BALF and myeloperoxidase (MPO) activity in lung tissue. Results: compared with the control group, the pathological injury of lung tissue was serious after LPS treatment, and the contents of protein, serum tumor necrosis factor 偽 (TNF- 偽) and interleukin 6 (IL-6) in BALF were observed. The activity of MPO and the wet dry weight ratio of lung tissue increased significantly. Compared with LPS group, the pathological injury of lung tissue was alleviated in, MSCs CdM treatment group. The contents of BALF protein, serum TNF- 偽 and IL-6, the activity of MPO in lung tissue and the wet / dry weight ratio of lung tissue were significantly decreased in, MSCs CdM treatment group. The levels of interleukin 10 (IL-10) and keratinocyte growth factor (KGF) in BALF were significantly higher than those in LPS and control groups. Conclusion: the supernatant of bone marrow mesenchymal stem cell culture can effectively attenuate acute lung injury induced by LPS, and its mechanism may be related to the regulation of TNF- 偽, IL-6,IL-10 and KGF levels in lung.
【作者單位】: 第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院呼吸與危重癥醫(yī)學(xué)科;第四軍醫(yī)大學(xué)病理和病理生理教研室;
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.81072642;No.81372129)
【分類號(hào)】:R563.8

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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6 任召,

本文編號(hào):2312716


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