【摘要】：目的 觀察增加或減少外源性H2S的生成是否影響蝮蛇毒致急性肺損傷中肺泡表面活性物質(zhì)的變化，探究H2S對(duì)蝮蛇毒致大鼠ALI的作用機(jī)制。 方法 1.分組：健康成年雄性SD大鼠(200±20g)共36只，隨機(jī)分為6組，每組6只，分別為I組生理鹽水對(duì)照組，II組蝮蛇毒素組(1.5mg/kg)，III組低劑量硫氫化鈉(sodiumhydrosulfide，NaHS)組(蝮蛇毒+NaHS0.78mg/kg)，IV組中劑量硫氫化鈉組(蝮蛇毒+NaHS1.56mg/kg)，V組高劑量硫氫化鈉組(蝮蛇毒+NaHS3.12mg/kg)，VI組CSE抑制劑L-炔丙基甘氨酸(PPG)處理組(蝮蛇毒素+PPG30mg/kg)。 2.方法：將生理鹽水和蝮蛇毒素分別腹腔注射給I組和剩余組，3小時(shí)后各組再分別腹腔注射生理鹽水、低中高劑量硫氫化鈉和L-炔丙基甘氨酸。蝮蛇毒素注射6小時(shí)后收集肺泡灌洗液(BALF)和相應(yīng)的肺組織標(biāo)本，然后處死大鼠。使用光學(xué)顯微鏡對(duì)各組肺組織的病理學(xué)改變進(jìn)行觀察并對(duì)其進(jìn)行肺損傷病理評(píng)分(HE染色)；測定肺組織中SP-A、B、C mRNA基因表達(dá)的變化(RT-PCR法)；測定各組大鼠BALF中總蛋白(TP)(BCA法)及總磷脂(TPL)含量(比色法)的變化。 結(jié)果 1.肺組織病理學(xué)改變 （1）大體觀：I組肺組織肉眼觀大致正常，呈粉紅色，質(zhì)軟，表面光滑，無明顯出血點(diǎn)和水腫。II組肺組織表面散在點(diǎn)片狀出血灶，充血水腫明顯。III~V組肺組織充血水腫較II組減輕，尤以V組明顯。VI組肺損傷程度最嚴(yán)重，肺組織外觀呈暗紅色，表面可見大片出血灶。 （2）光鏡下觀：I組肺組織結(jié)構(gòu)正常，肺泡無水腫及透明膜形成，肺間質(zhì)沒有增寬，肺泡腔及肺間質(zhì)未見紅細(xì)胞漏出及炎癥細(xì)胞侵潤，無肺不張。與I組相比，II組肺組織結(jié)構(gòu)被損壞，可見肺泡塌陷，肺泡間隔增寬，大量炎性細(xì)胞浸潤，部分肺泡還有透明膜形成，IQA顯著升高(P0.01)。與II組相比，III組肺損傷未見明顯改善(P0.05)；IV、V組可見肺損傷情況減輕，IQA下降(P0.01)，但與I組比仍有明顯肺損傷(P0.01)；與II組相比，VI組肺損傷明顯加重，肺泡塌陷，廣泛透明膜形成，伴有肺不張，IQA升高(P0.01)。 2.肺組織中SP-A、SP-B和SP-C mRNA基因表達(dá)水平變化 與I組比較，II組肺組織中SP-A、SP-B和SP-C mRNA基因表達(dá)均明顯降低，兩組間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P 0.01)。與II組比較，III組肺組織SP-A、SP-B、SP-C mRNA基因表達(dá)升高不顯著(P0.05)；IV、V組肺組織中SP-A、SP-B、SP-C mRNA基因表達(dá)均升高(P0.01)；VI組肺組織SP-A、SP-B、SP-C mRNA基因表達(dá)均有明顯降低(P 0.05)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 3.肺泡灌洗液中TP和TPL的水平變化 與I組比較，II組BALF中TP含量明顯升高(P0.01)，TPL含量明顯降低(P0.01)。與II組比較，IV、V組BALF中TP含量明顯降低(P0.05)，TPL含量明顯升高(P0.05)。與II組比較，VI組BALF中TP含量明顯升高，，TPL含量明顯降低，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。 結(jié)論 1.給予NaHS能使SP-A、SP-B和SP-C mRNA的基因表達(dá)增強(qiáng)， TP含量降低和TPL含量提高，肺組織病理評(píng)分降低，從而減輕大鼠的肺損傷程度。而給予PPG能抑制SP-A、SP-B和SP-C mRNA的基因表達(dá)，TP含量升高和TPL含量降低，肺組織病理評(píng)分升高，從而加重大鼠的肺損傷程度。 2.H2S對(duì)蝮蛇毒大鼠急性肺損傷的保護(hù)作用可能是通過增強(qiáng)肺泡SP-A、SP-B和SP-C mRNA的基因表達(dá)，降低TP和升高TPL含量，降低肺組織病理評(píng)分來實(shí)現(xiàn)的。
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【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R563

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 劉嬌;表面活性蛋白-A和D基因變異與尿路感染易感性的相關(guān)性研究[D];武漢大學(xué);2010年

本文編號(hào)：2306790