發(fā)布時間：2018-08-15 18:30

【摘要】：目的構建小鼠鮑曼不動桿菌(A.baumannii)誘導的肺炎模型,研究A.baumannii致病的分子機制。方法實驗分為正常對照組、環(huán)磷酰胺預處理組、正常小鼠接種組和免疫缺陷小鼠接種組。利用免疫抑制劑環(huán)磷酰胺預處理實驗雄性C57BL/6小鼠制備免疫缺陷小鼠模型,使用臨床重癥監(jiān)護病房(ICU)分離的A.baumannii制備新鮮菌液(1×108集落形成單位/m L),通過氣道接種方法接種至小鼠,分別于接種后6、24、72 h,進行小鼠肺及肺泡灌洗液白細胞和中性粒細胞計數(shù),HE染色觀察肺組織炎癥變化,ELISA檢測試劑盒檢測血清粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)、γ干擾素(IFN-γ)、白細胞介素1β(IL-1β)、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IL-12、腫瘤壞死因子α(TNF-α)水平。結(jié)果免疫功能正常的小鼠感染A.baumannii72 h后,肺內(nèi)細菌基本被清除,而免疫抑制劑處理的小鼠接種A.baumannii后,肺及血液中細菌計數(shù)持續(xù)增加;正常小鼠感染6 h后,體內(nèi)白細胞計數(shù)和中性粒細胞升高,至72 h下降,而經(jīng)過免疫抑制劑處理的小鼠感染后,肺及血液中白細胞計數(shù)和中性粒細胞持續(xù)升高;感染72 h后,免疫功能正常小鼠肺部有輕微炎癥,免疫缺陷小鼠肺部炎癥較為明顯;正常小鼠感染6 h后,血清中上述細胞因子含量均增加,至72 h下降,而經(jīng)過免疫抑制劑處理的小鼠感染后,肺及血液中上述細胞因子水平均持續(xù)升高。結(jié)論成功制備了A.baumannii誘導的小鼠肺部感染模型。
[Abstract]:Objective to establish a mouse model of pneumonia induced by Acinetobacter baumannii (A.baumannii) and to study the molecular mechanism of A.baumannii. Methods the experiment was divided into normal control group, cyclophosphamide pretreatment group, normal mice inoculation group and immune deficiency mice inoculation group. Immunosuppressant cyclophosphamide was used to pretreat male C57BL/6 mice to establish the model of immunodeficient mice. Fresh bacterial solution was prepared by A.baumannii isolated from (ICU) of clinical intensive care unit (1 脳 10 8 colony forming unit / m L), was inoculated into mice by airway inoculation method). The leukocytes and neutrophils in lung and alveolar lavage fluid of mice were stained with HE to observe the changes of lung inflammation. The serum granulocyte macrophage colony stimulating factor (GM-CSF) and interferon 緯 (IFN- 緯) were detected by Elisa kit. The levels of IL-12, TNF- 偽, TNF- 偽 and IL-6, IL-10, IL-12, TNF- 偽, IL-12, TNF- 偽, IL-12, TNF- 偽, TNF- 偽, IL-12, TNF- 偽, TNF- 偽, TNF- 偽, Results the bacteria in the lungs of mice with normal immune function were basically cleared after infection with A.baumannii72 h, but the counts of bacteria in lung and blood of mice treated with immunosuppressant increased continuously after A.baumannii inoculation, and the bacteria count in normal mice increased after 6 hours of infection. The leukocyte count and neutrophils increased in vivo and decreased at 72 h, but the leukocyte count and neutrophils in lung and blood of mice treated with immunosuppressant increased continuously after 72 h of infection. There was slight inflammation in the lungs of normal immune function mice, but obvious inflammation in the lungs of immunodeficient mice, and the contents of above mentioned cytokines in serum of normal mice increased after 6 h of infection, and decreased at 72 h. The levels of these cytokines in lung and blood of mice treated with immunosuppressant increased continuously after infection. Conclusion A.baumannii induced lung infection in mice was successfully established.
【作者單位】： 陜西中醫(yī)藥大學病原微生物及檢驗教研室;陜西中醫(yī)藥大學第一附屬醫(yī)院檢驗科;
【基金】：陜西中醫(yī)藥大學自然科學青年基金(2016QN29) 陜西省教育廳專項科研計劃(17JK0200)
【分類號】：R-332;R563.1

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