發(fā)布時(shí)間：2018-06-25 04:08

  本文選題：支氣管哮喘 + 人軟骨糖蛋白　； 參考：《中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志》2017年18期

【摘要】：目的探討小干擾核糖核酸(siRNA)沉默人軟骨糖蛋白39(YKL-40)對(duì)支氣管哮喘小鼠氣道平滑肌增殖及遷移的影響。方法 20只健康雌性BALB/c小鼠隨機(jī)分為健康組(n=10)和哮喘組(n=10),采取腹腔注射抗原和霧化吸入卵蛋的方式復(fù)制哮喘模型,健康組小鼠處理與哮喘組相同,只是將致敏物換成生理鹽水,留取氣管和支氣管進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),兩組小鼠氣道壁平滑肌細(xì)胞根據(jù)轉(zhuǎn)染物不同分為si RNA-YKL-40組、陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組,MTT法檢測(cè)不同轉(zhuǎn)染組小鼠氣道壁平滑肌細(xì)胞增殖情況,Transwell法檢測(cè)不同轉(zhuǎn)染組小鼠氣道壁平滑肌細(xì)胞遷移能力,實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(q RT-PCR)和蛋白免疫印跡法(Western blot)檢測(cè)不同轉(zhuǎn)染組小鼠氣道壁平滑肌細(xì)胞中YKL-40、白細(xì)胞介素4(IL-4)和干擾素-γ(IFN-γ)基因和蛋白表達(dá)。結(jié)果哮喘組中si RNA-YKL-40組48~96h時(shí)細(xì)胞吸光度A值均低于陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組,哮喘組中si RNA-YKL-40組、陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組48~96 h時(shí)細(xì)胞吸光度A值均高于健康組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);哮喘組中si RNA-YKL-40組遷移細(xì)胞數(shù)(86.38±8.61)個(gè),低于陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組,哮喘組遷移細(xì)胞數(shù)均高于健康組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);哮喘組和健康組中si RNA-YKL-40組YKL-40基因和蛋白相對(duì)表達(dá)量均低于陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組(P0.05),哮喘組中si RNA-YKL-40組IL-4基因和蛋白相對(duì)表達(dá)量均低于陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組,而IFN-γ基因和蛋白相對(duì)表達(dá)量與IFN-γ/IL-4均高于陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組(P0.05),與健康組比較,哮喘組中si RNA-YKL-40組、陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組IL-4基因和蛋白相對(duì)表達(dá)量均升高,而IFN-γ基因和蛋白相對(duì)表達(dá)量和IFN-γ/IL-4均降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論靶向YKL-40基因沉默能抑制氣道壁平滑肌細(xì)胞增殖及遷移,可能與調(diào)節(jié)IL-4/IFN-γ失衡狀態(tài)而減少氣道炎癥反應(yīng)有關(guān)。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of small interfering ribonucleic acid (siRNA) silencing human cartilage glycoprotein 39 (YKL-40) on airway smooth muscle proliferation and migration in asthmatic mice. Methods Twenty healthy female BALB / c mice were randomly divided into two groups: normal control group (n = 10) and asthmatic group (n = 10). The asthmatic model was induced by intraperitoneal injection of antigens and atomized eggs. The healthy mice were treated the same as the asthmatic group, but the sensitizers were replaced by normal saline. The airway wall smooth muscle cells of the two groups were divided into si RNA-YKL-40 group according to the transfection. The proliferation of smooth muscle cells in airway wall of mice in different transfection groups was detected by MTT assay and the migration ability of smooth muscle cells in airway wall of mice in different transfection groups was detected by Transwell method. The expression of YKL-40, interleukin-4 (IL-4) and interferon- 緯 (IFN- 緯) genes and proteins in airway wall smooth muscle cells of mice in different transfection groups were detected by real-time quantitative polymerase chain reaction (Q RT-PCR) and Western blot (Western blot). Results the absorbance A value of siRNA-YKL-40 group was lower than that of negative control group and blank control group at 4896 h. The absorbance A value of siRNA-YKL-40 group, negative control group and blank control group was higher than that of healthy group at 4896 h. The number of migration cells in the asthma group (86.38 鹵8.61) was lower than that in the negative control group and the blank control group, and the number of the migration cells in the asthma group was higher than that in the healthy group. The relative expression of siRNA-YKL-40 gene and protein in asthma group and healthy group was lower than that in negative control group and blank control group (P0.05), and the relative expression of IL-4 gene and protein in siRNA-YKL-40 group was lower than that in negative control group (P0.05). Radiation group and blank control group, The relative expression of IFN- 緯 gene and protein and IFN- 緯 / IL-4 were higher than those of negative control group and blank control group (P0.05). Compared with healthy group, the relative expression of IL-4 gene and protein in asthma group, negative control group and blank control group were increased. The relative expression of IFN- 緯 gene and protein and IFN- 緯 / IL-4 decreased significantly (P0.05). Conclusion targeting YKL-40 gene silencing can inhibit the proliferation and migration of airway smooth muscle cells, which may be related to the regulation of IL-4 / IFN- 緯 imbalance and the reduction of airway inflammation.
【作者單位】： 貴州省人民醫(yī)院胸外科;
【基金】：貴州省科技計(jì)劃(黔科合SY字,No:20123101)
【分類號(hào)】：R562.25

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本文編號(hào)：2064493