本文選題：人氣道平滑肌細胞 + 白介素33��； 參考：《華中科技大學(xué)》2013年碩士論文

【摘要】：目的： 白介素33（IL-33）是最新發(fā)現(xiàn)的IL-1家族成員，是一個組織來源的細胞因子，主要位于核內(nèi)。其受體為ST2，兩者結(jié)合可以介導(dǎo)Th2免疫反應(yīng)，而Th2/Th1反應(yīng)失衡在支氣管哮喘的發(fā)病中起重要作用。脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）是革蘭陰性桿菌的胞壁成分，能介導(dǎo)支氣管哮喘炎癥反應(yīng)。LPS通過結(jié)合Toll樣受體4（TLR-4）參與免疫反應(yīng)。近年的研究發(fā)現(xiàn)氣道平滑肌細胞（ASMC）同樣能夠參與炎癥反應(yīng)，且細胞表面可以表達TLR-4。這篇研究旨在對LPS能否刺激離體培養(yǎng)的人ASMC產(chǎn)生IL-33，作為難治性哮喘可能相關(guān)因子之一——TNF-α是否與LPS具有協(xié)同刺激作用以及糖皮質(zhì)激素對IL-33生成的影響展開討論。 方法： 手術(shù)室收取因肺部疾病行肺段或肺葉切除的人支氣管標(biāo)本（直徑0.5-1.0cm）,原代培養(yǎng)支氣管平滑肌細胞，選取6-8代平滑肌細胞進行實驗。以每孔105cells/cm2種于六孔板中，分別或聯(lián)合加入各刺激物L(fēng)PS、TNF-α、哮喘致敏血清（AAS）、IgE。抑制實驗則將DXM、SB203580、PD98059等抑制物提前各刺激物30分鐘加入。相應(yīng)時間點收集細胞上清行ELISA，收集細胞提取RNA行實時熒光定量PCR檢測。 結(jié)果： LPS引起人氣道平滑肌細胞IL-33基因表達增高（p0.05）;哮喘致敏血清可能促進氣道平滑肌細胞IL-33產(chǎn)生，但這種效應(yīng)與IgE作用關(guān)系不大（p0.05）;DXM抑制經(jīng)LPS和TNF-α誘導(dǎo)的IL-33mRNA生成（p0.05）；SB203580和PD98059部分抑制LPS和TNF-α誘導(dǎo)的IL-33生成。IL-33在細胞上清中的水平實驗組與對照組基本一致。 結(jié)論： 糖皮質(zhì)激素能抑制多種細胞因子的生成而發(fā)揮抗炎作用。本實驗證明地塞米松能夠在體外抑制LPS和TNF-α誘導(dǎo)的IL-33基因表達，而p38MAPK和ERK通路抑制劑不能完全阻斷這種作用。目前糖皮質(zhì)激素在哮喘控制和治療中仍然有重要地位。
[Abstract]:Aim: interleukin-33 (IL-33) is a newly discovered member of the IL-1 family. It is a tissue-derived cytokine mainly located in the nucleus. The receptor is ST2, which can mediate Th2 immune response, and the imbalance of Th2 / Th1 response plays an important role in the pathogenesis of bronchial asthma. Lipopolysaccharide (LPS) is a cell wall component of Gram-negative bacilli, which mediates the inflammatory response of bronchial asthma. LPS takes part in the immune response by binding Toll-like receptor 4 (TLR-4). In recent years, it has been found that airway smooth muscle cells (ASMC) can also participate in inflammatory response, and the surface of the cells can express TLR-4. The aim of this study was to investigate whether LPS could stimulate the production of IL-33 in cultured human ASMC, and whether TNF- 偽 could co-stimulate with LPS and the effect of glucocorticoid on IL-33 production as one of the possible factors associated with refractory asthma. Methods: the primary cultured bronchial smooth muscle cells (BSMCs) were collected from human bronchial specimens (diameter 0.5-1.0cm) after lung segmenting or lobectomy in the operating room, and 6-8 passages of smooth muscle cells were selected for the experiment. 105cells/cm2 was seeded into the six-hole plate with the addition of each stimulator LPS-TNF- 偽, and the asthma sensitized serum (AAS) IgE. In the inhibition experiment, DXMN SB203580, PD98059 and other inhibitors were added 30 minutes in advance. ELISAs were collected from the supernatant of the cells collected at the corresponding time points, and RNA extracted from the collected cells was detected by real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction (FQ-PCR). Results: LPS-induced increase of IL-33 gene expression in human airway smooth muscle cells (p0.05), asthma sensitized serum may promote IL-33 production in airway smooth muscle cells, but this effect is not related to the effect of IgE (p0.05) DXM inhibits IL-33 mRNA production induced by LPS and TNF- 偽 (p0.05). SB203580 and PD98059 partially inhibited the production of IL-33 induced by LPS and TNF- 偽. The level of IL-33 in the supernatant of the experimental group was similar to that of the control group. Conclusion: glucocorticoid can inhibit the production of many cytokines and play an anti-inflammatory effect. This study demonstrated that dexamethasone could inhibit the expression of IL-33 gene induced by LPS and TNF- 偽 in vitro, but p38 MAPK and ERK pathway inhibitors could not completely block this effect. At present, glucocorticoids still play an important role in asthma control and treatment.
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R562.25

【共引文獻】

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本文編號：2064668