大鼠實(shí)驗(yàn)性矽肺中樹突狀細(xì)胞及其相關(guān)細(xì)胞因子分布規(guī)律
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《鄭州大學(xué)》 2015年
大鼠實(shí)驗(yàn)性矽肺中樹突狀細(xì)胞及其相關(guān)細(xì)胞因子分布規(guī)律
暴磊
【摘要】:背景和目的矽肺危害嚴(yán)重,然而機(jī)制仍不完全清楚,但已知其發(fā)生發(fā)展過程的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一是免疫反應(yīng)。樹突狀細(xì)胞(dendritic cell,DC)是已知功能最強(qiáng)的抗原呈遞細(xì)胞,且與巨噬細(xì)胞有相近、交叉的結(jié)構(gòu)與功能,推測(cè)DC在矽塵識(shí)別與攝取、矽肺獲得性免疫應(yīng)答中很可能也是極其重要的效應(yīng)細(xì)胞。因此建立大鼠實(shí)驗(yàn)性矽肺模型,對(duì)不同時(shí)間點(diǎn)大鼠肺組織和外周血中DC表面分子MHC-Ⅱ、CD80及其相關(guān)細(xì)胞因子進(jìn)行檢測(cè)。初步探討其在矽肺發(fā)生發(fā)展過程中的作用及意義,為進(jìn)一步開展矽肺免疫干預(yù)研究提供新思路和理論依據(jù)。方法1、選用河南省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供的無特定病原體(Specific pathogen free,SPF)健康成年雄性SD大鼠96只,體重200~250g。將其隨機(jī)分為2組:染塵組、對(duì)照組。2、采用非氣管暴露法染塵建立大鼠矽肺模型,分別在染塵前、染塵后24h、1周、2周3周、6周、9周、12周處死6只。3、流式細(xì)胞術(shù)對(duì)外周血中DC表面分子MHC-Ⅱ、CD80進(jìn)行檢測(cè)。4、免疫組化法對(duì)肺組織中DC表面分子MHC-Ⅱ、CD80進(jìn)行定位、分布。5、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)檢測(cè)肺組織中細(xì)胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-18、IL-4和IL-10的表達(dá)。6、統(tǒng)計(jì)方法:采用Excel2007建立數(shù)據(jù)集,應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)描述以(X±S)表示,兩組間均數(shù)比較采用t檢驗(yàn);Pearson相關(guān)進(jìn)行相關(guān)性分析。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。結(jié)果1、染塵組外周血CD80和MHC-Ⅱ的表達(dá)量在染塵后逐漸升高,在2周表達(dá)量最高并保持穩(wěn)定。染塵組與對(duì)照組外周血CD80、MHC-Ⅱ的表達(dá)量在染塵2周后差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);染塵組肺組織CD80表達(dá)量在染塵后逐漸增加,在2周表達(dá)量最高并保持穩(wěn)定,染塵組與對(duì)照組肺組織CD80的表達(dá)量在染塵2周后差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。染塵組肺組織MHC-Ⅱ表達(dá)量在染塵后1周到達(dá)高峰并保持穩(wěn)定,染塵組與對(duì)照組肺組織MHC-Ⅱ在染塵1周后差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2、染塵后各時(shí)間點(diǎn)染塵組TNF-α表達(dá)量均高于對(duì)照組(P0.05);染塵后24h、1周和2周染塵組IFN-γ表達(dá)量高于對(duì)照組(P0.05);染塵后1周染塵組中IL-4表達(dá)量低于對(duì)照組(P0.05),染塵后9周及12周高于與對(duì)照組(P0.05);染塵后6周、9周染塵組IL-10表達(dá)量高于對(duì)照組(P0.05)。3、Pearson相關(guān)性分析顯示,染塵組大鼠外周血中CD80、MHC-Ⅱ與IL-18、IL-4、IL-10均相關(guān),相關(guān)系數(shù)分別為0.367、0.429,0.516、0.615,-0.419、-0.432(P0.05)。結(jié)論在大鼠實(shí)驗(yàn)性矽肺模型中,樹突狀細(xì)胞增殖并且調(diào)控Th1/Th2型細(xì)胞因子的分泌,參與矽肺的發(fā)生發(fā)展過程。
【關(guān)鍵詞】:
【學(xué)位授予單位】:鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R135.2
【目錄】:
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