天堂国产午夜亚洲专区-少妇人妻综合久久蜜臀-国产成人户外露出视频在线-国产91传媒一区二区三区

當(dāng)前位置:主頁 > 醫(yī)學(xué)論文 > 呼吸病論文 >

miRNA-186-5p在慢性阻塞性肺疾病支氣管上皮細(xì)胞中的作用及其調(diào)控機(jī)制探究

發(fā)布時間:2024-07-05 22:06
  目的:本課題組前期通過慢性阻塞性肺疾病(Chronic obstructive pulmonary disease,COPD)的miRNA轉(zhuǎn)錄組分析發(fā)現(xiàn),miRNA-186-5p在COPD中表達(dá)存在差異,可能在COPD的發(fā)生發(fā)展中起重要作用,但其具體作用機(jī)制不明。進(jìn)一步的生物信息學(xué)分析發(fā)現(xiàn),miR-186-5p可與lncRNA RP11-20G6.3及HIF-1α靶向結(jié)合。因此,本研究擬從細(xì)胞水平探究miRNA-186-5p在COPD中的生物學(xué)功能,并揭示miRNA-186-5p與lncRNA RP11-20G6.3及HIF-1α的靶向調(diào)控作用,初步在細(xì)胞水平探究lncRNA RP11-20G6.3對COPD發(fā)生的影響,同時在COPD患者血清中驗證lncRNA RP11-20G6.3表達(dá)水平,為揭示其分子機(jī)制提供理論依據(jù)。方法:(1)采用脂多糖(LPS)誘導(dǎo)炎癥構(gòu)建人支氣管上皮(BEAS-2B)細(xì)胞模型。(2)分別合成miR-186-5p、lncRNA RP11-20G6.3低表達(dá)序列并轉(zhuǎn)染細(xì)胞,用CCK-8法檢測細(xì)胞增殖活性、流式檢測細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期;RT-qPCR檢測TNF-α、...

【文章頁數(shù)】:66 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
中英文縮略對照表
第1章 緒論
    1.1 慢性阻塞性肺疾病簡介
    1.2 miRNA在慢性阻塞性肺疾病中的研究進(jìn)展
    1.3 ceRNA調(diào)控網(wǎng)絡(luò)在慢性阻塞性肺疾病中的研究進(jìn)展
第2章 實驗方法
    2.1 實驗主要儀器與試劑
        2.1.1 主要實驗儀器
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 引物與轉(zhuǎn)染序列
    2.2 實驗方法
        2.2.1 實驗對象與標(biāo)本收集
        2.2.2 血液樣本采集
        2.2.3 RNA的提取
        2.2.4 RNA濃度測定
        2.2.5 RNA反轉(zhuǎn)錄
        2.2.6 熒光定量PCR
        2.2.7 細(xì)胞總蛋白提取及濃度測定
        2.2.8 Western Blot
        2.2.9 ELISA
        2.2.10 細(xì)胞培養(yǎng)及LPS誘導(dǎo)炎癥模型建立
            2.2.10.1 細(xì)胞培養(yǎng)
            2.2.10.2 脂多糖LPS誘導(dǎo)炎癥細(xì)胞模型構(gòu)建
        2.2.11 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
        2.2.12 細(xì)胞增殖檢測(CCK-8法)
        2.2.13 細(xì)胞凋亡檢測(AnnexinV-FITC/PI法)
        2.2.14 細(xì)胞周期分析(PI染色法)
        2.2.15 lncRNA-miRNA靶基因預(yù)測與雙熒光素酶實驗驗證
        2.2.16 統(tǒng)計學(xué)方法
第3章 實驗結(jié)果
    3.1 miR-186-5p在 COPD中的功能研究
        3.1.1 miR-186-5p低表達(dá)/過表達(dá)BEAS-2B細(xì)胞系的建立
        3.1.2 LPS誘導(dǎo)的細(xì)胞COPD炎癥模型構(gòu)建
        3.1.3 構(gòu)建COPD炎癥模型中IL-6、TNF-ɑ的表達(dá)檢測
        3.1.4 低表達(dá)miR-186-5p檢測其表達(dá)改變對細(xì)胞行為的影響
            3.1.4.1 低表達(dá)miR-186-5p抑制BEAS-2B細(xì)胞增殖活性
            3.1.4.2 低表達(dá)miR-186-5p促進(jìn)BEAS-2B細(xì)胞凋亡
            3.1.4.3 miR-186-5p對 BEAS-2B細(xì)胞周期的影響
        3.1.5 miR-186-5p對 BEAS-2B細(xì)胞NF-κB炎癥相關(guān)信號通路的影響
            3.1.5.1 qRT-PCR檢測miR-186-5p對BEAS-2B細(xì)胞對NF-κB炎癥通路基因表達(dá)水平的影響
            3.1.5.2 Western Blot檢測miR-186-5p對BEAS-2B細(xì)胞對NF-κB炎癥通路蛋白表達(dá)水平的影響
    3.2 LncRNA RP11-20G6.3在COPD中的功能研究
    3.3 miR-186-5p對 HIF-1ɑ和 LncRNA RP11-20G6.3 的調(diào)控作用探究
        3.3.1 miR-186-5p對 HIF-1ɑ的調(diào)控關(guān)系探究
            3.3.1.1 生物信息數(shù)據(jù)庫預(yù)測miR-186-5p與 HIF-1ɑ的靶向結(jié)合
            3.3.1.2 miR-186-5p低表達(dá)/高表達(dá)對HIF-1ɑ基因的影響
            3.3.1.3 miR-186-5p低表達(dá)/高表達(dá)對HIF-1ɑ蛋白的影響
            3.3.1.4 雙熒光素酶報告實驗驗證miR-186-5p與 HIF-1ɑ的直接靶向關(guān)系
        3.3.2 LncRNA RP11-20G6.3對miR-186-5p的調(diào)控關(guān)系探究
            3.3.2.1 生物信息數(shù)據(jù)庫預(yù)測LncRNA RP11-20G6.3對miR-186-5p的靶向結(jié)合
            3.3.2.2 雙熒光素酶報告實驗驗證miR-186-5p與 LncRNA RP11-20G6.3的直接靶向關(guān)系
    3.4 LncRNA RP11-20G6.3在COPD患者中的表達(dá)檢測
        3.4.1 樣本的一般特征
        3.4.2 qRT-PCR檢測外周血LncRNA RP1120G6.3 基因表達(dá)
第4章 討論
第5章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的科研成果
致謝



本文編號:4001610

資料下載
論文發(fā)表

本文鏈接:http://sikaile.net/yixuelunwen/huxijib/4001610.html


Copyright(c)文論論文網(wǎng)All Rights Reserved | 網(wǎng)站地圖 |

版權(quán)申明:資料由用戶3ec6e***提供,本站僅收錄摘要或目錄,作者需要刪除請E-mail郵箱bigeng88@qq.com
99亚洲综合精品成人网色播| 夫妻性生活动态图视频| 丰满人妻熟妇乱又伦精另类视频 | 激情丁香激情五月婷婷| 国产精品刮毛视频不卡| 久久国产精品熟女一区二区三区| 国产自拍欧美日韩在线观看| 激情五月天免费在线观看| 成人综合网视频在线观看| 91人妻久久精品一区二区三区 | 中文字幕精品少妇人妻| 黑丝国产精品一区二区| 激情五月天深爱丁香婷婷| 国产成人综合亚洲欧美日韩| 免费观看日韩一级黄色大片| 国产欧美一区二区另类精品| 久久黄片免费播放大全| 亚洲日本久久国产精品久久| 午夜国产成人福利视频| 99亚洲综合精品成人网色播| 色婷婷中文字幕在线视频| 粉嫩国产一区二区三区在线| 太香蕉久久国产精品视频| 国产精品一区欧美二区| 爽到高潮嗷嗷叫之在现观看| 日本加勒比中文在线观看| 黄色国产自拍在线观看| 好吊色欧美一区二区三区顽频| 伊人网免费在线观看高清版| 欧美日韩国产二三四区| 国产精品激情对白一区二区| 亚洲视频一区二区久久久| 大香蕉网国产在线观看av| 91偷拍裸体一区二区三区| 五月激情婷婷丁香六月网| 久久99这里只精品热在线| 中文字幕亚洲在线一区| 久久免费精品拍拍一区二区| 东京热男人的天堂一二三区| 亚洲深夜精品福利一区| 国产高清视频一区不卡|