香煙煙霧提取物下調(diào)小鼠C2C12成肌細(xì)胞組蛋白去乙酰化酶2表達(dá)并增強(qiáng)炎性細(xì)胞因子釋放
本文選題:香煙煙霧提取物 + CC成肌細(xì)胞��; 參考:《細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志》2015年03期
【摘要】:目的觀察香煙煙霧暴露后,小鼠C2C12成肌細(xì)胞內(nèi)炎癥介質(zhì)、組蛋白去乙�;�2(HDAC2)和核因子κB(NF-κB)的變化。方法培養(yǎng)小鼠C2C12成肌細(xì)胞,用香煙煙霧提取物(CSE)進(jìn)行處理。采用MTT法觀察CSE對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響,以確定作用于細(xì)胞的合適濃度。將培養(yǎng)6~7 d的C2C12細(xì)胞接種到6孔板,分為對(duì)照組和(6.25、12.50、25.0)mL/L CSE組,培養(yǎng)24h。ELISA測(cè)定各組細(xì)胞上清液白細(xì)胞介素8(IL-8)和腫瘤壞死因子α(TNF-α)的含量;實(shí)時(shí)定量PCR(qRT-PCR)檢測(cè)各組細(xì)胞HDAC2 mRNA的表達(dá);Western blot法檢測(cè)各組細(xì)胞中HDAC2的蛋白相對(duì)表達(dá)量;免疫共沉淀技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)HDAC2/NF-κB復(fù)合物。結(jié)果 MTT結(jié)果提示終濃度為50 mL/L的CSE抑制C2C12細(xì)胞的生長(zhǎng);CSE刺激24h后,C2C12細(xì)胞IL-8和TNF-α釋放增加,HDAC2的mRNA及蛋白相對(duì)表達(dá)量減少,并在一定程度上具有濃度依賴性;免疫共沉淀技術(shù)證實(shí)存在HDAC2/NF-κB復(fù)合物。結(jié)論 CSE下調(diào)C2C12細(xì)胞HDAC2表達(dá),引起炎癥因子釋放增加。
[Abstract]:Objective to observe the changes of inflammatory mediators, histone deacetylase 2 (HDAC2) and nuclear factor- 魏 B (NF- 魏 B) in mouse C2C12 myoblasts after cigarette smoke exposure. Methods Mouse C2C12 myoblasts were cultured and treated with cigarette smoke extract. The effect of CSE on cell growth was observed by MTT method to determine the appropriate concentration. C2C12 cells cultured for 6 days were inoculated into 6 well plates and divided into two groups: control group and CSE group. The contents of interleukin-8 (IL-8) and tumor necrosis factor- 偽 (TNF- 偽) in supernatant of each group were measured by 24h.ELISA. The expression of HDAC2 mRNA was detected by real-time quantitative PCR qRT-PCR. the relative expression of HDAC2 protein was detected by Western blot assay, and the HDAC2 / NF- 魏 B complex was detected by immunoprecipitation. Results MTT results showed that 50 mL/L CSE inhibited the release of IL-8 and TNF- 偽 from C2C12 cells for 24 h and increased the relative expression of mRNA and protein of HDAC2 in a concentration-dependent manner. The existence of HDAC _ 2 / NF- 魏 B complex was confirmed by immunoprecipitation technique. Conclusion CSE can down-regulate the expression of HDAC2 in C2C12 cells and increase the release of inflammatory factors.
【作者單位】: 廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院呼吸內(nèi)科;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(81260012)
【分類號(hào)】:R563.9
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):1833472
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