本文關(guān)鍵詞：哮喘小鼠氣道中性粒細(xì)胞對(duì)Th17細(xì)胞趨化募集作用機(jī)制的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《華中科技大學(xué)》 2012年

哮喘小鼠氣道中性粒細(xì)胞對(duì)Th17細(xì)胞趨化募集作用機(jī)制的研究

王正云  

【摘要】：目的 1.研究小鼠BALF與血清中趨化因子CCL2和CCL20在正常組和哮喘組的表達(dá)變化，探討小鼠BALF中CCL2、CCL20與中性粒細(xì)胞數(shù)目之間的相關(guān)性。 2.研究正常組和哮喘組小鼠外周血Th17細(xì)胞比例，以及Th17細(xì)胞表面相應(yīng)受體CCR2和CCR6的表達(dá)變化。 3.體外實(shí)驗(yàn)探討CCL2、CCL20對(duì)Th17細(xì)胞的趨化募集作用。 材料與方法 制備急性哮喘小鼠模型，取BALF細(xì)胞沉淀進(jìn)行分類(lèi)計(jì)數(shù)，ELISA檢測(cè)BALF上清及血清CCL2、CCL20的含量。流式細(xì)胞術(shù)測(cè)量小鼠外周血Th17細(xì)胞含量及其表面CCR2和CCR6受體表達(dá)水平。磁珠分離小鼠脾臟CD4+T細(xì)胞,體外誘導(dǎo)分化培養(yǎng)Th17細(xì)胞，Transwell小室觀察CCL2、CCL20對(duì)Th17細(xì)胞的趨化作用。 結(jié)果 1.分別比較支氣管肺泡灌洗液（BALF）中的炎性細(xì)胞計(jì)數(shù)和細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)，哮喘組小鼠BALF內(nèi)炎性細(xì)胞總數(shù)和嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)目均高于正常對(duì)照組，兩組之間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[(68±18)×10~4/ml vs (33±5)×10~4/ml,(42±14)×10~4/ml vs(5±2)×10~4/ml](n=10, P＜0.01)，(n=10, P＜0.01)。哮喘組小鼠淋巴細(xì)胞數(shù)目也高于正常對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[(5±1)×10~4/ml vs (3±1)×10~4/ml](n=10, P＜0.05)。哮喘組小鼠BALF內(nèi)中性粒細(xì)胞數(shù)目也高于正常對(duì)照組，此差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 2.與正常小鼠比較，哮喘小鼠血清中CCL2和CCL20均增高，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(n=10,P＜0.01)。哮喘小鼠BALF中CCL2濃度是高于正常小鼠的(n=10, P＜0.01)，但是哮喘小鼠BALF中CCL20濃度是低于正常小鼠的(n=10, P＜0.01)。 3. BALF中CCL2與BALF中性粒細(xì)胞數(shù)目有顯著正相關(guān)性（r=0.52, P＜0.05)。BALF中CCL20含量與BALF中性粒細(xì)胞數(shù)目呈顯著負(fù)相關(guān)性（r=-0.63, P＜0.01)。 4.在外周血中，哮喘小鼠Th17細(xì)胞比例（4.65±0.85%）顯著高于正常小鼠（0.89±0.53%）（n=10, P＜0.01)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。并且與正常小鼠比較，哮喘小鼠外周血Th17細(xì)胞表面受體CCR2表達(dá)也增高（1.69±0.68%vs0.56±0.37%）（n=10，P＜0.01),CCR6表達(dá)也是增高的（1.80±1.04%vs0.77±0.51%)(n=10，P＜0.01)。差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 5.體外誘導(dǎo)分化培養(yǎng)的小鼠Th17細(xì)胞，CCL2、CCL20對(duì)其存在募集作用，與不加趨化因子組比較，，差異均有顯著性意義（7.44±1.44%vs0.33±0.05%）（n=6, P＜0.05）,（5.40±0.64%vs0.33±0.05%）（n=6, P＜0.05）。 結(jié)論 哮喘小鼠血清中CCL2、CCL20各自表達(dá)較正常組有所增高，哮喘小鼠BALF中CCL2表達(dá)較正常組增高，CCL20表達(dá)卻比正常組低。BALF中CCL2含量與BALF內(nèi)中性粒細(xì)胞數(shù)目有一定的相關(guān)性。哮喘小鼠外周血Th17細(xì)胞比例及其上面的受體CCR2、CCR6較正常組增高。CCL2、CCL20對(duì)Th17細(xì)胞具有一定的趨化作用。提示哮喘小鼠氣道中性粒細(xì)胞有可能通過(guò)CCL2/CCR2的作用來(lái)募集Th17細(xì)胞。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類(lèi)號(hào)】：R-332;R562.25
【目錄】：

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