微管相關蛋白1輕鏈3及Beclin-1在硅沉著病大鼠肺泡巨噬細胞中的表達
本文選題:硅沉著病 切入點:肺泡巨噬細胞 出處:《解剖學報》2014年05期
【摘要】:目的觀察自噬相關蛋白——微管相關蛋白1輕鏈3(LC-3)、Beclin-1在硅沉著病大鼠肺泡巨噬細胞中的表達,從細胞自噬角度探討硅沉著病形成的分子機制。方法 50只成年雄性SD大鼠隨機分為2組(n=25):對照組和硅沉著病模型組,每組再分5個時相組。采用非暴露氣管灌注二氧化硅(SiO2)粉塵混懸液法(50g/L)建立大鼠硅沉著病模型。分別于造模后1、3、7、14及28 d分批處死5只大鼠,進行原位支氣管肺泡灌洗,獲取肺泡巨噬細胞,進行培養(yǎng)純化和富集后用于后續(xù)研究。HE染色及透射電子顯微鏡觀察肺泡巨噬細胞形態(tài)學改變;免疫細胞化學法檢測LC-3、Beclin-1的表達及分布;免疫印跡法檢測LC-3、Beclin-1的蛋白表達量。結(jié)果與對照組相比模型組肺泡巨噬細胞體積較大,胞質(zhì)豐富,部分細胞內(nèi)可見硅沉著吞噬顆粒,電鏡下可見自噬體形成;模型組LC-3、Beclin-1在各時間點的表達較對照組均增多(P0.05),1 d即開始增多,隨著時間的延長表達逐漸增多,至14 d時達高峰(P0.05),28d時回落,但仍高于對照組的表達。結(jié)論在硅沉著病大鼠肺泡巨噬細胞中有自噬的激活,肺泡巨噬細胞自噬參與了大鼠硅沉著病的病理進程。
[Abstract]:Objective to observe the expression of microtubule-associated protein-1 (LC-3LC-3) Beclin-1 in alveolar macrophages of silicosis rats. Methods 50 adult male SD rats were randomly divided into two groups: control group and silicosis model group. Each group was further divided into 5 time phase groups. The silicosis model in rats was established by 50 g / L dust suspension method of non-exposed tracheal instillation of silica, and 5 rats were killed in batches on the 1st day, 714 d and 28 d after the establishment of the model, and then bronchoalveolar lavage was performed in situ. The alveolar macrophages were purified and enriched for further study. He staining and transmission electron microscopy were used to observe the morphological changes of alveolar macrophages and the expression and distribution of LC-3 Beclin-1 were detected by immunocytochemistry. Results compared with the control group, the alveolar macrophages in the model group were larger in volume and abundant in cytoplasm, and the phagocytic particles could be seen in some cells, and autophagy formation was observed under electron microscope. The expression of LC-3 and Beclin-1 in the model group began to increase at 1 day as compared with that in the control group, and gradually increased with the prolongation of the time, and then decreased to the peak at the 14th day (P 0.05) and decreased at 28 days. Conclusion autophagy is activated in alveolar macrophages of silicosis rats, and alveolar macrophage autophagy is involved in the pathological process of silicosis in rats.
【作者單位】: 河北聯(lián)合大學基礎醫(yī)學院組織學胚胎學系;河北聯(lián)合大學冀唐學院;唐山市工人醫(yī)院神經(jīng)外科;河北省煤礦衛(wèi)生與安全實驗室;唐山市慢性病基礎與臨床實驗室;
【基金】:河北省科技支撐重點專項資助項目(09276191D) 河北省重點職業(yè)病防治技術研究資助項目(13277709D)
【分類號】:R135.2
【參考文獻】
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,本文編號:1680496
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