本文選題：哮喘　切入點(diǎn)：氣道重塑　出處：《河北醫(yī)科大學(xué)》2012年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的：研究辛伐他汀對(duì)哮喘大鼠氣道炎癥和氣道重塑的影響，揭示辛伐他汀對(duì)氣道炎癥、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，簡(jiǎn)稱VEGF）及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2（Vascular endothelial growth factorreceptor2，簡(jiǎn)稱VCGFR_2）的調(diào)節(jié)作用。 方法：將40只健康清潔級(jí)SD大鼠（雄性，6周齡，體重130-150克），隨機(jī)分成5組，分別為：正常對(duì)照組、哮喘組、S1組（辛伐他汀灌胃20mg/Kg）、S2組（辛伐他汀灌胃40mg/Kg）、S3組（辛伐他汀灌胃60mg/Kg）。哮喘組大鼠于實(shí)驗(yàn)第1、8天腹腔注射卵清蛋白(OVA）100mg和氫氧化鋁100mg進(jìn)行致敏；第15天起將大鼠置于非完全密閉的玻璃箱內(nèi)霧化吸入OVA(OVA濃度由1%逐漸遞增，每激發(fā)4次增加一次，分別為:1%、1.5%、2%、2.5%、3%),每次30min，隔日一次，共激發(fā)20次。S1、2、3組在霧化前30min進(jìn)行辛伐他汀灌胃，余同哮喘組。正常對(duì)照組致敏和激發(fā)均使用生理鹽水，余同哮喘組。末次激發(fā)后24小時(shí)后，用1%戊巴比妥麻醉大鼠，應(yīng)用動(dòng)物肺功能儀檢測(cè)大鼠肺功能；收集肺泡灌洗液（Bronchoalveolar lavage fluid，簡(jiǎn)稱BALF），分別計(jì)算細(xì)胞總數(shù)和嗜酸性粒細(xì)胞總數(shù)；部分肺組織行病理切片，蘇木精-伊紅（hematoxylin-eosin，簡(jiǎn)稱HE）染色；免疫組織化學(xué)法檢測(cè)各組大鼠肺組織中VEGF及VEGFR_2的表達(dá)情況，并應(yīng)用圖像分析軟件測(cè)量VEGF及VEGFR_2相對(duì)表達(dá)強(qiáng)度；采用計(jì)算機(jī)圖象分析技術(shù)測(cè)定肺組織切片中的血管計(jì)數(shù)和支氣管的管壁厚度；用酶聯(lián)免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay,簡(jiǎn)稱ELISA）檢測(cè)血清中白介素-4（IL-4）、干擾素-γ（IFN-γ）、VEGF的水平。 結(jié)果： 1、肺功能檢測(cè)結(jié)果： 5組大鼠基礎(chǔ)氣道峰值相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。給予靜脈注射乙酰膽堿后哮喘組、S1組、S2組和S3組氣道壓力峰值下降,正常對(duì)照組氣道壓力峰值無(wú)明顯變化，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。 2、肺泡灌洗液中細(xì)胞總數(shù)及嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)（×10~6/L）： 哮喘組（32.55±3.2，7.78±0.95）高于其他四組；S1組（22.68±2.92，4.33±0.55）、S2組（16.93±2.70，2.67±0.56）和S3組（13.20±3.66，1.83±0.51），三組均高于正常對(duì)照組（9.49±2.84，0.83±0.42）；S1組高于S2組；S2組高于S3組；差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。 3、病理結(jié)果： 哮喘組大鼠肺組織可見(jiàn)大量的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、黏液分泌、杯狀細(xì)胞增生、平滑肌細(xì)胞增生、血管增生、基底膜增厚、管壁厚度增加。應(yīng)用辛伐他汀干預(yù)后能明顯減輕上述的病理改變。 4、圖像分析支氣管管壁厚度及血管計(jì)數(shù)： 哮喘組（96.71±5.54，23.13±1.89）較其他四組明顯增加；S1組（86.57±6.79，18.50±0.93）、S2組（78.32±2.69，16.83±0.98）、S3組（69.08±7.02，15.17±0.75），三組均高于正常對(duì)照組（60.83±6.42，12.01±0.82）；S1組高于S2組；S2組高于S3組；差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。 5、VEGF和XEGFR2免疫組織化圖像的半定量分析，以陽(yáng)性表達(dá)的平均光密度值為統(tǒng)計(jì)量： 哮喘組（0.37±0.02，0.41±0.03）明顯高于其他四組；S1組（0.32±0.04，0.35±0.03）、S2組（0.27±0.05，0.30±0.03）、S3組（0.23±0.03，0.25±0.03），三組均高于正常對(duì)照組（0.19±0.04，0.20±0.02）；S1組高于S2組；S2組高于S3組；差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。 6、ELISA法檢測(cè)血清中IL-4、VEGF和IFN-γ的水平： IL-4、VEGF：哮喘組（475.71±55.56，48.20±5.23）明顯高于其他四組；S1組（362.91±37.59，，37.25±4.20）、S2組（284.62±34.15，30.27±2.91）、S3組（225.18±26.92，22.77±3.54）均高于正常對(duì)照組（174.34±40.64、14.94±3.18）；S1組高于S2組；S2組高于S3組；差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。IFN-γ：哮喘組（11.86±3.17）明顯低于其他四組；S1組（22.11±4.82）、S2組（34.52±4.95）、S3組（44.70±4.16）均低于正常對(duì)照組（51.26±8.59）；S1組低于S2組；S2組低于S3組；差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P0.05）。 7、直線相關(guān)性分析結(jié)果： 血管計(jì)數(shù)與支氣管管壁厚呈正相關(guān)（r=0.893，P0.01）；血清中IL-4與IFN-γ呈負(fù)相關(guān)（r=-0.867，P0.01）；肺組織中VEGF的表達(dá)與VEGFR_2、血管計(jì)數(shù)、支氣管管壁厚度、血清中IL-4的表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.859，P0.01；r=0.852，P0.01；r=0.858，P0.01；r=0.824，P0.01)，與IFN-γ呈顯著負(fù)相關(guān)（r=-0.866，P0.01）。 結(jié)論： 1、通過(guò)抗原致敏和反復(fù)霧化激發(fā)，成功建立了具有氣道炎癥、氣道高反應(yīng)性和氣道重塑特征的大鼠哮喘模型。 2、哮喘組血清中的VEGF和肺組織中的VEGF及VEGFR_2表達(dá)明顯升高，且肺組織中的VEGF與血管計(jì)數(shù)、支氣管管壁厚度和血清中的IL-4呈正相關(guān)，與血清中的IFN-γ呈負(fù)相關(guān)，提示VEGF對(duì)哮喘的炎癥因子具有介導(dǎo)作用，參與了哮喘氣道炎癥和氣道重塑的發(fā)展過(guò)程。 3、辛伐他汀通過(guò)升高IFN-γ，降低IL-4來(lái)調(diào)節(jié)Th1/Th2失衡，達(dá)到減輕氣道炎癥和氣道阻力的作用。 4、辛伐他汀通過(guò)影響VEGF和VEGFR_2的表達(dá)水平，來(lái)抑制哮喘氣道炎癥、氣道重塑。 5、辛伐他汀對(duì)哮喘的上述作用具有劑量相關(guān)性。
[Abstract]:Objective: To study the effect of simvastatin on airway inflammation and airway remodeling, reveal the effect of simvastatin on airway inflammation, vascular endothelial growth factor (vascular endothelial growth factor, referred to as VEGF) and vascular endothelial growth factor receptor 2 (Vascular endothelial growth factorreceptor2, referred to as VCGFR_2) of the regulation.
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本文編號(hào)：1574390