本文關(guān)鍵詞： 自噬 人肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 香煙煙霧提取物 細(xì)胞凋亡　出處：《中國病理生理雜志》2017年04期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的:探討自噬在香煙煙霧提取物(cigarette smoke extract,CSE)誘導(dǎo)人肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞(human pulmonary artery endothelial cells,HPAECs)凋亡中的作用。方法:常規(guī)培養(yǎng)HPAECs,分為對(duì)照組、CSE組、3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)組和3-MA+CSE組,應(yīng)用Hoechst 33342染色和Annexin V/PI流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡,單丹磺酰尸胺(monodansylcadaverine,MDC)染色觀察細(xì)胞自噬泡形成,Western bolt測(cè)定自噬相關(guān)蛋白beclin-1、LC3與cleaved caspase-3的水平。結(jié)果:MDC染色示CSE處理可以誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生自噬泡,Western blot結(jié)果示自噬相關(guān)蛋白LC3及beclin-1表達(dá)升高,3-MA預(yù)處理后抑制上述蛋白的表達(dá)。Hoechst 33342染色和Annexin V/PI流式結(jié)果顯示CSE組細(xì)胞凋亡率較對(duì)照組明顯增加,在3-MA+CSE組,細(xì)胞凋亡率較CSE組進(jìn)一步升高;同時(shí),CSE組細(xì)胞cleaved caspase-3蛋白水平較對(duì)照組明顯升高(P0.05),3-MA+CSE組的caspase-3表達(dá)較CSE組進(jìn)一步升高。結(jié)論:CSE能誘導(dǎo)HPAECs發(fā)生自噬和凋亡,抑制自噬能夠進(jìn)一步促進(jìn)CSE對(duì)HPAECs的凋亡作用,這種作用可通過激活caspase-3實(shí)現(xiàn)。
[Abstract]:Objective: to investigate the role of autophagy in inducing apoptosis of human pulmonary artery endothelial cells (HPAECs) induced by cigarette smoke extract smoke (CSE). Methods: HPAECs were routinely cultured and divided into control group and 3-methyladenine CSE group. Apoptosis was detected by Hoechst 33342 staining and Annexin V / P Pi flow cytometry. The levels of autophagy associated protein beclin-1 (LC3) and cleaved caspase-3 were determined by Western bolt. Results the results showed that CSE treatment could induce cells to produce autophagic vesicles, LC3 and beclin-1. After pretreatment with 3-MA, the expression of the above protein was inhibited by .Hoechst 33342 staining and Annexin V / P Pi flow. The results showed that the apoptosis rate of CSE group was significantly higher than that of control group. In the 3-MA CSE group, the apoptosis rate was higher than that in the CSE group, and the level of cleaved caspase-3 protein was significantly higher in the 3-MA CSE group than in the control group. The caspase-3 expression in the 3-MA CSE group was significantly higher than that in the CSE group. Conclusion: CSE can induce autophagy and apoptosis in HPAECs. Inhibition of autophagy can further promote the apoptosis of HPAECs by CSE, which can be achieved by activating caspase-3.
【作者單位】： 福建醫(yī)科大學(xué)省立臨床醫(yī)學(xué)院福建省立醫(yī)院呼吸內(nèi)科 福建省呼吸四病研究室;南京醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院呼吸內(nèi)科;江蘇省疾病預(yù)防控制中心慢性非傳染病防制所;
【基金】：福建省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.2015J05143) 福建省衛(wèi)生計(jì)生委青年科研課題(No.2015-2-4)
【分類號(hào)】：R563.9

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1503425